INDICE
CAPITOLO 1...1
Abstract...1
CAPITOLO 2...4
Introduzione...4
2.1 La malattia parodontale...4 2.2 Nanotecnologia e nanomedicina...9 2.3 Liposomi...132.3.1 Proprietà chimiche e struttura superficiale...14
2.3.2 Transizione di fase...16 2.3.3 Classificazione...18 2.3.4 Applicazioni...20
CAPITOLO 3...25
Materiali e metodi...25
3.1 I Liposomi...25 3.2 Materiali...273.3 Preparazione di liposomi marcati...34
3.4 Tecniche per il ridimensionamento liposomiale...35
3.5 Protocollo ad hoc per la formazione di magnetite dentro le vescicole...37
3.6 Caratterizzazione delle sospensioni liposomiche...38
3.6.1 Analisi della dispersione: la camera di Burker...38
3.6.2 Microscopia a fluorescenza...39
3.6.3 Analisi dimensionale: Dynamic Light Scattering (DLS)...41
3.6.4 Quantificazione del ferro (iron content)...42
3.6.5 Marcatura di ferro (iron staining)...43
3.7 Modellazione della penetrazione dei liposomi con MATLAB...44
3.8 Analisi istologica di denti estratti...44
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CAPITOLO 4...48
Preparazione e caratterizzazione dei liposomi sub-micrometrici...48
4.1 Ricostituzione e funzionalizzazione dei liposomi...48
4.2. Marcatura con molecole idrofiliche...50
4.3 Marcatura con molecole idrofobiche...52
4.4 Ridimensionamento liposomiale...54
4.5 Analisi dimensionale al DLS...56
CAPITOLO 5...58
Preparazione e caratterizzazione di liposomi magnetici...58
5.1 Introduzione della magnetite all’interno dei liposomi...58
5.2 Contenuto di ferro (iron content)...61
5.3 Marcatura del ferro (iron staining)...64
5.4 Analisi al DLS...65
CAPITOLO 6...68
Modellazione della penetrazione del liposoma all’interno del tubulo
dentinale...68
6.1 Penetrazione passiva...70
6.2 Penetrazione forzata, indotta da un campo magnetico esterno...75
CAPITOLO 7...81
Validazione ex vivo condotta su preparati istologici di denti umani estratti
...81
7.1 Prova sperimentale ex vivo su denti estratti...81
7.2 Risultati ottenuti e discussione...82
7.2.1 Colorazione con ematossilina/eosina...82
7.2.2 Colorazione con Nile Red...84
7.2.3 Colorazione tramite Perl staining...85
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