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Indice generale
1. Introduzione ... 3 1.1 PATZ1 ... 3 1.1.1 IL GENE ... 4 1.1.2 LA PROTEINA PATZ1 ... 5 1.1.2.1 STRUTTURA ... 5 1.1.2.2 FUNZIONE ... 8 1.1.3 PATZ1 E HMGA ... 131.2 XENOPUS LAEVIS COME SISTEMA MODELLO ... 16
1.4 SVILUPPO DELLE CRESTE NEURALI ... 17
1.4.1 INDUZIONE ... 18
1.4.2 NEURAL PLATE BORDER SPECIFIERS ... 20
1.4.3 NEURAL CREST SPECIFIERS ... 21
1.4.4 EMT E MIGRAZIONE DELLE NCCs ... 22
1.4.5 HMGA2 NELLE NCCs DI XENOPUS ... 25
1.5 SCOPO DEL LAVORO ... 26
2. Materiali e Metodi ... 27
2.1 VETTORI ... 27
2.2 DIGESTIONE DI DNA ... 27
2.3 PURIFICAZIONE DI DNA PLASMIDICO ... 28
2.4 LIGATION ... 29
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2.6 ESTRAZIONE DI DNA PLAMIDICO: mini-prep ... 32
2.7 ESTRAZIONE DI DNA PLASMIDICO: midi-prep ... 33
2.8 ELETTROFORESI SU GEL ... 34
2.9 ANALISI ALLO SPETTROFOTOMETRO ... 36
2.10 TRASCRIZIONE DI RNA CAPPATO ... 36
2.11 TRASCRIZIONE DI SONDE DI RNA ... 38
2.12 WHOLE- MOUNT IN SITU HYBRIDATION (WISH) ... 40
2.13 MICROINIEZIONE DI EMBRIONI DI XENOPUS ... 45
2.14 MORPHOLINO ANTISENSE OLIGOs ... 47
2.15 RIVELAZIONE DELLA β-GAL ... 47
2.16 ESTRAZIONE DI RNA DAGLI EMBRIONI ... 49
2.17 RETROTRASCRIZIONE DI cDNA ... 50
2.18 REAZIONE A CATENA DELLA POLIMERASI (PCR) ... 51
2.19 RT-PCR semiquantitativa ... 52
2.20 PRIMER UTILIZZATI ... 53
2.21 FOTOGRAFIE ... 53
3.Risultati ... 54
3.1 ANALISI IN SILICO DI XPATZ1 ... 54
3.2 ANALISI DELL'ESPRESSIONE DI XPATZ1 ... 57
3.3 ANALISI FUNZIONALE DI PATZ1 ... 60
4.Discussione ... 66
