• Non ci sono risultati.

Cellule endoteliali e Aterosclerosi: studi in vitro e in vivo.

N/A
N/A
Protected

Academic year: 2023

Condividi "Cellule endoteliali e Aterosclerosi: studi in vitro e in vivo."

Copied!
5
0
0

Testo completo

(1)

UNIVERSITA’ DEGLI STUDI DI PARMA Dottorato di Ricerca in Farmacologia e Tossicologia

Sperimentali XXII ciclo

Cellule endoteliali e Aterosclerosi:

studi in vitro e in vivo.

Tesi di Dottorato di:

COSTA SARA

Triennio Accademico 2007-2009

Coordinatore:

Ch.ma Prof.ssa Elisabetta Barocelli

Relatore:

Ch.mo Prof. Franco Bernini

(2)

Introduzione

ATEROSCLEROSI

1

 Patogenesi 2

 Processo ossidativo 5

 Formazione della placca 6

 Adesione 6

 Foam cells 8

 Meccanismi infiammatori dell’aterosclerosi 12

 Formazione della capsula e del cuore necrotico 14

 Trombosi associata ad aterosclerosi 15 IL RUOLO DELLE CITOCHINE NELL’ATEROSCLEROSI 16

o TNF-alpha o

17

o IL-1 17

o IL-2 17

o IL-6 17

o IL-12 18

o IL-18 18

o IFN-gamma 19

RUOLO DELL’ENDOTELIO NELL’ATEROSCLEROSI 20

o Monossido di azoto 23

o L’eccesso ossidativo 24

o Endotelina-1 25

o Valutazione della funzione endoteliale 26

o Trattamento della disfunzione endoteliale 28

I Parte

I CALCIOANTAGONISTI 31

I Calcioantagonisti nel trattamento della disfunzione endoteliale 33

La Manidipina 36

(3)

Scopo della Ricerca

Materiali e Metodi 38

o Caratteri generali 41

o Isolamento e coltura delle cellule endoteliali umane isolate da

cordone ombelicale (HUVEC) 41

o Cultura monociti umani THP-1 44

o Modificazione delle Lipoproteine LDL 44

o Stimolazione e trattamento con Manidipina 44

o Test di vitalità’ (MTT test) 45

o Determinazione del contenuto proteico 46

o Valutazione della secrezione di IL-6 47

o Analisi statistiche 48

Risultati

o Vitalità cellulare 50

o Secrezione di IL-6 da cellule endoteliali, HUVEC, trattate con

lipoproteine modificate 52

o Secrezione di IL-6 e di IL-8 da cellule endoteliali, HUVEC,

stimolate con TNF-α 54

o Secrezione di IL-6 da cellule THP-1, indotta da diversi stimoli

pro infiammatori 56

o Effetto della Manidipina sulla secrezione di IL-6, da cellule

THP-1, indotta da un mix di citochine 57

Discussione

61

II Parte

HDL e Aterosclerosi 67

o HDL nel trasporto inverso del colesterolo (RCT) 67 o Maturazione e rimodellamento intravascolare delle particelle 72

(4)

o Maturazione e rimodellamento intravascolare delle particelle HDL, mediante esterificazione, scambio lipidico e modificazioni lipolitiche.

72

SR-BI 73

RUOLO DELLE HDL E DI SR-BI NEL PROMUOVERE

IL RIPARO ENDOTELIALE 76

Ruolo delle HDL nella regolazione dell’apoptosi,

proliferazione e migrazione delle cellule endoteliali 78

o Apoptosi 78

o Proliferazione e Migrazione cellulari 79

Scopo della Ricerca 81

Materiali e Metodi

o Generazione dei modelli animali utilizzati 83 o Isolamento di cellule endoteliali da aorta di topo 84

o Citofluorimetria a Flusso 89

o Purificazione e quantificazione RNA 91

o Valutazione dell’espressione di SR-BI 91

o Curva di sopravvivenza 92

o Valutazione dell’espressione genica delle cellule endoteliali

isolate da aorta di topo (PCR Array) 92

o Disegni sperimentali 96

Risultati e Discussione

o Messa a punto del protocollo per l’isolamento delle cellule

endoteliali da aorta di topo. 98

o Caratterizzazione delle cellule endoteliali 99

o Validazione del metodo. 102

o Mortalità indotta da LPS 104

o Profilo di espressione genica delle cellule endoteliali isolate da

aorta di topo. 106

Bibliografia 110

(5)

Riferimenti

Documenti correlati

Nella prima parte della tesi si riporta uno studio dell’impedenza d’ingresso di un’antenna, seguito da un’analisi dei metodi di misura della stessa.. Nella seconda parte

come in delle vere e proprie «scatole esistenziali», che riprendono e attualizzano la celebre immagine čechoviana dell’ “uomo nell’astuccio”, è rappresentato lo

Lo storytelling è una delle pratiche più diffuse nella storia culturale irlandese e di conseguenza è divenuto, nel corso del tempo, uno dei tratti maggiormente

L’infermiere è perciò investito, mediante l’adozione della cartella infermieristica, della gestione delle informazioni relativa non più al solo contenuto di lavoro

Per classificare ogni singolo pixel, l’algoritmo di classificazione ne considera un intorno. La dimensione ottimale di tale intorno è risultata essere pari a 21x21

© The Author(s). European University Institute. Available Open Access on Cadmus, European University Institute Research Repository... These sign changes affect the

Due to the different shares of the ICT producer sector in value added in the three countries, the hourly labour productivity of this sector, though identical in the three

Il montante prosegue l’estensione anteriore mediante la sede di alloggiamento per la guarnizione interna in battuta sulla superficie interna delle lastre in vetrocamera; il