Indice I
INDICE
CAPITOLO 1- INTRODUZIONE 1 1.1 LA FATICA CRONICA 1 1.1.1 DEFINIZIONE 1 1.1.2 EPIDEMIOLOGIA E PROGNOSI 2 1.1.3 MANIFESTAZIONI CLINICHE 4 1.1.4 EZIOLOGIA 6 1.1.5 FATTORI PREDISPONENTI 7 1.1.6 FATTORI PRECIPITANTI 7 1.1.7 FATTORI PERPETUANTI 8 1.1.8 FISIOPATOLOGIA 9 1.1.9 DIAGNOSI 10 1.1.10 TERAPIA 12 1.2 MITOCONDRI 14 1.2.1 STRUTTURA 14 1.2.2 FUNZIONI 161.2.3 MITOCONDRI NELLA SINDROME DELLA FATICA CRONICA 20
1.3 LA PROTEOMICA 22
1.3.1 DEFINIZIONE 22
1.3.2 ELETTROFORESI BIDIMENSIONALE 24
1.3.3 PRIMA DIMENSIONE O ISOELETTROFOCUSING (IEF) 25
1.3.4 STRIP 26
1.3.5 SECONDA DIMENSIONE 28
CAPITOLO 2 – SCOPO DELLA TESI 30
Indice
II
3.1 MATERIALI E STRUMENTAZIONE 31
3.2 RECLUTAMENTO DEI PAZIENTI 32
3.3 PREPARAZIONE DEL CAMPIONE 32
3.4 ESTRAZIONE MITOCONDRI DALLE PIASTRINE 33
3.5 DOSAGGIO PROTEICO DC/BIORAD 34
3.6 WESTERN BLOTTING 37
3.7 ELETTROFORESI BIDIMENSIONALE 43
3.7.1 PRIMA DIMENSIONE 43
3.7.2 EQUILIBRATURA DELLE STRIP 44
3.7.3 SECONDA DIMENSIONE 45
3.7.4 COLORAZIONE E ACQUISIZIONE IMMAGINI 46
3.7.5ANALISI DEI GEL TRAMITE SAME SPOT 47
CAPITOLO 4 – RISULTATI E DISCUSSIONI 48
4.1 ISOLAMENTO DEI MITOCONDRI DA PIASTRINE 48
4.2 DETERMINAZIONE DEL PATTERN PROTEICO MITOCONDRIALE DA PIASTRINE TRAMITE ANALISI BIDIMENSIONALE 50
4.3 ANALISI COMPARATIVA DEI PROFILI BIDIMENSIONALI DELLE PROTEINE MITOCONDRIALI NEI DUE GEMELLI 51