DESCRIPTION
Alkaline Saline Peptone Water ISO (ASPW) is a liquid medium used for the selective enrichment of Vibrio parahaemolyticus, Vibrio cholerae and Vibrio vulnificus from food, animal feed and environmental samples.
This medium complies to ISO 21872-1.
TYPICAL FORMULA* (g/litre)
*Adjusted and/or supplemented as required to meet performance criteria.
METHOD PRINCIPLE
Peptone provide carbon, nitrogen and amino acids for bacterial growth. The high concentration of sodium chloride along with the alkaline pH provide a favourable environment for growth of Vibrio spp while inhibiting other organisms.
PREPARATION
TEST PROCEDURE
Following the procedure described by ISO 21872-1
1. Take test portions (25 g or 25 ml) and homogenize in a bottle containing 225 ml of ASPW.
2. Incubate at 41.5 ± 1°C and/or 37 ± 1°C for 6 ± 1 h (a).
3. Transfer 1 ml of the primary enrichment culture into a tube containing 10 ml of ASPW (b).
4. Incubate at 41.5 ± 1°C (V. parahaemolyticus and V. cholerae) and/or 37 ± 1°C (V. vulnificus) for 18 ± 1 h (c). 5. From the cultures obtained in the ASPW, inoculate with 1 µl sampling loop the surface of a TCBS agar plate
(ref. 11195) to obtain well-isolated colonies (for more details see the IFU of TCBS agar).
Footnotes
a For primary enrichment, incubation temperature depends on the target species and state of product:
- For detection of V. parahaemolyticus and V. cholerae in fresh product, incubate at 41.5 ± 1°C.
- For detection of V. vulnificus in fresh product, incubate at 37 ± 1°C.
- For detection of all Vibrio species in deep frozen, dried or salted product, incubate at 37 ± 1°C.
b Do NOT agitate the sample while taking the aliquot from the surface of the liquid medium.
c When choosing the incubation temperature for secondary enrichment consider the target species only.
INTERPRETING RESULTS
Growth in ASPW is indicated by turbidity compared to an uninoculated control.
For interpreting the test results on TCBS agar see the relevant IFU.
APPEARANCE OF THE MEDIUM
Dehydrated medium: free-flowing, homogeneous, beige.
Prepared medium: clear, light amber.
STORAGE
The powder is very hygroscopic, store the powder at 10-30°C, in a dry environment, in its original container tightly closed. Store tubes and bottles at 10-25°C away from light. Do not use the product beyond its expiry date on the label or if product shows any evidence of contamination or any sign of deterioration.
SHELF LIFE
Dehydrated medium: 4 years.
Tubes/Bottles: 2 years.
Alkaline Saline Peptone Water ISO
Enrichment medium for detection of Vibrio spp, according to ISO 21872.
Instructions For Use ENGLISH
Peptone 20.0
Sodium Chloride 20.0
Final pH 8.6 ± 0.2 at 25°C
Dehydrated medium Suspend 40.0 g of the powder in 1 liter of distilled or deionized water. Mix well. Heat to boil and shake until completely dissolved. Dispense into final containers, in quantities required for the examination. Sterilize in autoclave at 121°C for 15 minutes.
QUALITY CONTROL
To check the performance of the medium the following reference strains can be used.
WARNING AND PRECAUTIONS
The product does not contain hazardous substances in concentrations exceeding the limits set by current legislation and therefore is not classified as dangerous. It is nevertheless recommended to consult the safety data sheet for its correct use. The product is intended for professional use only and must be used by properly trained operators.
DISPOSAL OF WASTE
Disposal of waste must be carried out according to national and local regulations in force.
BIBLIOGRAPHY
See the references at the end of this document.
TABLE OF SYMBOLS
See the table of symbols at the end of this document.
The product is available in the various configurations listed below. There may be additional product ref. numbers as well. For an updated listing of available products, visit liofilchem.com
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liofilchem.com/ifu-sds
Strain Inoculum Incubation Growth
Vibrio parahaemolyticus WDCM 00185 ≤100 CFU 37 ± 1°C /
18 ± 1 h Good
Vibrio furnissii WDCM 00186 Good
Escherichia coli WDCM 00013 >103 CFU Inhibited
Product Format Packaging Ref.
Alkaline Saline Peptone Water ISO (ASPW) Tube 100 x 10 ml 26486
Alkaline Saline Peptone Water ISO (ASPW) Bottle 6 x 225 ml 414130
Alkaline Saline Peptone Water ISO (ASPW) Dehydrated medium 500 g of powder 610377
LIOFILCHEM
®s.r.l.
Via Scozia, 64026 Roseto degli Abruzzi (TE) Italy
Tel. +39 0858930745 Fax +39 0858930330 www.liofilchem.com liofilchem@liofilchem.com
DESCRIZIONE
Alkaline Saline Peptone Water ISO (ASPW) è un terreno liquido utilizzato per l’arricchimento selettivo di Vibrio parahaemolyticus, Vibrio cholerae e Vibrio vulnificus da alimenti, mangimi e campioni ambientali.
Questo terreno è conforme alla ISO 21872-1.
FORMULA TIPICA* (g/litro)
*Adattata e/o integrata per soddisfare le specifiche di performance richieste.
PRINCIPIO DEL METODO
Il peptone fornisce aminoacidi, azoto, carbonio, vitamine e minerali per la crescita batterica. L’alta
concentrazione di sodio cloruro insieme al pH alcalino sodio forniscono un ambiente ottimale per la crescita di Vibrio spp mentre altri microrganismi vengono inibiti.
PREPARAZIONE
PROCEDURA DEL TEST
Seguendo la procedura descritta dalla ISO 21872-1
1. Prelevare una porzione del campione (25 g o 25 ml) ed omogenizzare in un flacone contenente 225 ml di ASPW.
2. Incubare a 41.5 ± 1°C e/o 37 ± 1°C per 6 ± 1 ore (a).
3. Trasferire 1 ml della coltura di arricchimento primario in una provetta contenente 10 ml di ASPW (b). 4. Incubare a 41.5 ± 1°C (V. parahaemolyticus e V. cholerae) e/o 37 ± 1°C (V. vulnificus) per 18 ± 1 ore (c). 5. Servendosi di un’ansa, prelevare 1 µl delle colture ottenute in ASPW ed inoculare la superficie di una piastra
di TCBS agar (ref. 11195) in modo da ottenere colonie ben isolate [per maggiori dettagli vedere le istruzioni per l’uso (IFU) del TCBS agar].
Note
a Per l’arricchimento primario, la temperatura di incubazione dipende dalle specie oggetto dell’esame (target) e dallo stato del prodotto:
- Per la ricerca di V. parahaemolyticus e V. cholerae nel prodotto fresco, incubare a 41.5 ± 1°C.
- Per la ricerca di V. vulnificus nel prodotto fresco, incubare a 37 ± 1°C.
- Per tutte le specie di Vibrio nel prodotto surgelato, essiccato o salato, incubare a 37 ± 1°C.
b NON agitare il campione mentre si preleva l’aliquota dalla superficie del terreno liquido.
c Quando si sceglie la temperatura di incubazione per l’arricchimento secondario bisogna considerare solo le specie target e non lo stato del prodotto.
INTERPRETAZIONE DEI RISULTATI
La crescita in ASPW è indicata dalla torbidità in confronto ad un controllo non inoculato.
For l’interpretazione dei risultati ottenuti su TCBS agar vedere il relativo documento IFU.
ASPETTO
Terreno disidratato: omogeneo, fine granulometria, beige.
Terreno preparato: ambra chiaro, limpido.
Alkaline Saline Peptone Water ISO
Terreno di arricchimento per la ricerca di Vibrio spp, secondo ISO 21872
Istruzioni per l’uso ITALIANO
Peptone 20.0
Sodio Cloruro 20.0
pH Finale 8.6 ± 0.2 a 25°C
Terreno disidratato Sospendere 40.0 g di polvere in 1 litro di acqua distillata o deionizzata sterile.
Mescolare bene. Riscaldare agitando di frequente e bollire fino a completa
dissoluzione. Distribuire nei contenitori finali, nelle quantità richieste per l’esame.
Sterilizzare in autoclave a 121°C per 15 minuti.
CONSERVAZIONE
La polvere è fortemente igroscopica, conservare a 10-30°C, in ambiente asciutto, nel suo contenitore originale chiuso ermeticamente. Conservare i flaconi e le provette a 10-25°C al riparo dalla luce. Non usare il prodotto dopo la sua data di scadenza indicata sull’etichetta o se il prodotto mostra segni di contaminazione o
deterioramento.
VALIDITÀ
Terreno disidratato: 4 anni.
Terreno in provette/flaconi: 2 anni.
CONTROLLO DI QUALITÀ
Per il controllo delle performance del terreno, possono essere utilizzati i seguenti ceppi di riferimento.
AVVERTENZE E PRECAUZIONI
Il prodotto non contiene sostanza nocive in concentrazioni superiori ai limiti fissati dall’attuale legislazione e perciò non è classificato come pericoloso. Ciononostante si raccomanda di consultare la scheda di sicurezza per il suo corretto uso. Il prodotto è da intendersi per in ambito professionale e deve essere utilizzato
esclusivamente da operatori adeguatamente addestrati.
SMALTIMENTO DEI RIFIUTI
Lo smaltimento dei rifiuti deve essere effettuato in conformità alle normative nazionali e locali in vigore.
BIBLIOGRAFIA
Vedere i riferimenti alla fine di questo documento.
TABELLA DEI SIMBOLI
Vedere la tabella dei simboli alla fine di questo documento.
Il prodotto è disponibile in diverse configurazioni. Vedere l’elenco nella lingua inglese.
Questo documento è disponibile dal Support Center online:
liofilchem.com/ifu-sds
Ceppo di controllo Inoculo Incubazione Crescita
Vibrio parahaemolyticus WDCM 00185 ≤100 CFU 37 ± 1°C / 18 ± 1 h
Buona
Vibrio furnissii WDCM 00186 Buona
Escherichia coli WDCM 00013 >103 CFU Inibita
BIBLIOGRAPHY / BIBLIOGRAFIA
1. EN ISO 11133:2014+Amd1:2018. Microbiology of food, animal feed and water − Preparation, production, storage and performance testing of culture media.
2. ISO 21872-1:2017. Microbiology of the food chain – Horizontal method for the determination of Vibrio spp. – Part 1: Detection of potentially entecrophatogenic Vibrio parahaemolyticus, Vibrio cholerae and Vibrio vulnificus.
3. Shread P., Donovan T. J., and Lee J. V. (1991) Soc. Gen. Microbiol. Q. 8:184.
4. Cruickshank R. (1968) Medical Microbiology. 11th ed. Livingstone Ltd, London, UK.
TABLE OF SYMBOLS / TABELLA DEI SIMBOLI
Batch code / Codice del lotto
Catalogue number / Numero di catalogo Manufacturer / Fabbricante
Use by / Utilizzare entro
Fragile, handle with care / Fragile, maneggiare con cura Temperature limitation / Limiti di temperatura
Contains sufficient for <n> tests / Contenuto sufficiente per <n> saggi Consult Instruction For Use / Consultare le istruzioni per l’uso Do not reuse / Non riutilizzare
Keep away from light / Tenere al riparo dalla luce
LIOFILCHEM
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Via Scozia, 64026 Roseto degli Abruzzi (TE) Italy
Tel. +39 0858930745 Fax +39 0858930330 www.liofilchem.com liofilchem@liofilchem.com
