Università degli Studi di Napoli Federico II Dipartimento di Sanità Pubblica
Unità di Patologia Molecolare Direttore: Prof. Giancarlo Troncone
PDL1
(Programmed death-ligand1) nella pratica clinica:
cloni e cut-off
Umberto Malapelle
Cancer Immunotherapy and Immune check-point inhibitors
Pardoll DM. The blockade of immune checkpoints in cancer immunotherapy. Nat Rev Cancer. 2012;12:252-64.
http://www.oncovip.it/
“The Clone Wars”
5 drugs, each with its own PD-L1 IHC assay
Drug Antibody
(clone)
Platform TC IC
Nivolumab 28-8 Dako +
Pembrolizumab 22C3 Dako +
Atezolizumab SP142 Ventana + +
Durvalumab SP263 Ventana +
Avelumab - Dako +
➢ 4 antibodies
➢ 2 immunostainer platforms
➢ Different cut-offs (<1%, 5%, 10%, 25%, 50%)
➢ Different scoring: Tumor cells +/- Immune cells
FIGURE 1. PDL-1 IHC performed using the E1LN3N clone. A, Squamous cell carcinoma showing a strong, uniform positive reaction in tumor cells. B, Despite being negative in tumor cells in the center of the image, there is a positive reaction in macrophages and other immune cells in the tumor stroma. C, Most alveolar macrophages are positive for PD-L1. D, This adenocarcinoma is negative for PD-L1.It should be noted that this immunohistochemistry clone was not used for PD-L1 detection in any of the trials discussed in this review.
Kerr et al, J Thorac Oncol 2015; 10:985
Keynote 024
Reck M, et al.
Pembrolizumab versus Chemotherapy for PD-L1- Positive Non-Small-Cell Lung Cancer. N Engl J Med. 2016. 375:1823- 1833.
Dietel et al, elcc 2018
Dietel et al, elcc 2018
1. Hellmann MD, et al. Genomic Features of Response to Combination Immunotherapy in Patients with Advanced Non-Small-Cell Lung Cancer. Cancer Cell.
2018. pii: S1535-610830123-5
Study of Nivolumab (BMS-936558) in Combination With
Gemcitabine/Cisplatin, Pemetrexed/Cisplatin,
Carboplatin/Paclitaxel, Bevacizumab Maintenance, Erlotinib, Ipilimumab or as Monotherapy in Subjects With
Stage IIIB/IV Non-small Cell Lung Cancer (NSCLC) (CheckMate 012)
NCT01454102 TMB vs PD – L1
TMB and PD – L1 TMB and MSI
2. Chalmers ZR, et al. Analysis of 100,000 human cancer genomes reveals the landscape of tumor mutational burden. Genome Med. 2017;9:34.
Sample managment for biomarker testing
Upfront empty tissue sections for biomarkers assessment
Pre – and Post H&E
Figura 1. Rappresentazione schematica dell’approccio sequenziale e di quello simultaneo per la valutazione dei biomarcatori predittivi di risposta al trattamento mirato per i pazienti affetti da tumore del polmone non a piccole cellule.
http://www.oncovip.it/
❖ Quale è il reale vantaggio (se pensi ci sia) del “marcatore” da te descritto rispetto agli altri due
PD – L1 request during the time
PD – L1 for patients selections is foundamental … … but it is not enough
Tumor Mutational Load
Percentage of inadequate results
1. Herbst_KN189_Dicussion AACR 2018; 2. data from internal archive Department of Public Health University Federico II of Naples
PD – L1 request during the time
«Personalized Immunotherapy» … but it is not enough
Neo –Antigens Load
1. Herbst_KN189_Dicussion AACR 2018; 2. data prevision basing on similar experiences
Percentage of inadequate results
❖ Quale è il principale difetto del “marcatore” da te descritto
From internal archive Predictive Molecular Pathology Lab, University of Naples Federico II.
❖ Quale è il costo indicativo OGGI per ottenere il risultato del test da te descritto
55 (LDT)* – 240** (Validated CE-IVD)
From internal archive Predictive Molecular Pathology Lab, University of Naples Federico II.
Costi orientativi calcolati in:
* Riferimento a 22C3 su Ventana senza amplificazione polimerica;
* * Riferimento a Kit DaKo 22C3 – listino.
- Controlli?
- Ammortamento strumentale?
- Reagentistica accessoria (vetrini, buffers…)?
- Costo FORMAZIONE OPERATORE?
- Costo OPERATORE?
- COSTO FASE DI VALIDAZIONE INTERNA
❖ Quale è il costo indicativo OGGI per ottenere il risultato del test da te descritto
❖ Quanto materiale (e quale materiale) ti serve per eseguire il test da te descritto nella tua relazione
Malapelle U et al. EGFR mutations detected on cytology samples by a centralized laboratory reliably predict response to gefitinib in non-small cell lung carcinoma patients.
Cancer Cytopathol. 2013;121:552-60.
Inadequate rate in cytology 62/367 samples(16,8%)
Malapelle U et al. EGFR mutation detection on routine cytological smears of non-small cell lung cancer by dPCR: a validation study. J Clin Pathol. 2016 [Epub ahead of print]
TISSUE ?!
Sample managment for biomarker testing
Upfront empty tissue sections for biomarkers assessment
Pre – and Post H&E
❖ Quale è il turnaround time per ottenere il risultato del test da te descritto
5,2 giorni* – 25,4**
- Dalla richiesta dell’oncologo all’emissione del refertro?
- Dall’arrivo del campione in laboratorio all’emissione del referto?
- Dal prelievo del campione all’emissione del referto?
- Ospedali di riferimento – Centri periferici?
- Servizio interno alla struttura?
- Servizio esterno alla struttura?
* Riferimento anno 2017 984 campioni totali, interni ed esterni (archivio interno LPMP FEDII);
** Riferimento anno 2017 174 campioni Ospedale 1 studio multicentrico (in preparazione)
❖ E’ indubbio che tutti noi in questa sessione veniamo da centri “selezionati”, ma ritieni che il test da te descritto sia OGGI fattibile in modo adeguato e con le caratteristiche esposte in questa sessione in tutti i centri italiani?
Fabio Pagni – S.Gerardo di Monza Nicola Fusco – Policlinico di Milano
Foto rappresentativa del 1°core del TMA1 [colorazione PD-L1
su Ventana SP263]
Foto rappresentativa del 1°core del TMA1 [colorazione PD-L1 su Dako Autostainer
22C3]
GOLD STANDARD A CONFRONTO
20 casi, 40 cores
Collaborative Study - manuscript in preparation
Dako Autostainer 22C3 VS Ventana SP263 non significative differenze di
valutazione, i casi 18 e 19 sono stati eliminati per ragioni tecniche; grazie a questa operazione è stato possibile raggiungere una percentuale di riproducibilità fra i due metodi del 100% su 36 cores.
Dako Ventana
Collaborative Study - manuscript in preparation
CONFRONTO CENTRI PARTECIPANTI VS GOLD STANDARD ATTESO
CENTRI PARTECIPANTI CLONE PIATTAFORMA
Ospedale San Gerardo di Monza 28-8 e 22C3
Dako Omnis
ASST Grande Ospedale Metropolitano Niguarda di Milano
22C3 Dako Omnis
Ospedale Maggiore Policlinico di Milano 22C3 Dako Omnis Ospedale San Paolo di Milano 22C3 Dako Omnis
IRCCS San Matteo di Pavia 22C3 Dako Omnis
Università Federico II di Napoli 22C3 Ventana
Collaborative Study - manuscript in preparation
Prof. Giancarlo Troncone Dr. Claudio Bellevicine Dr. Caterina De Luca Dr. Antonino Iaccarino Dr. Maria Russo
Dr. Roberta Sgariglia Dr. Francesco Pepe Dr. Elena Vigliar
Molecular Lab, Department of Public Health Dr. Maria Di Spirito Dr. Pasqualina Galasso Dr. Gianluca Gragnano Dr. Francesca Lanzaro Dr. Mariantonia Nacchio Dr. Pasquale Pisapia
Dr. Riccardo Smeraglio
www.docenti.unina.it/umberto.malapelle PangaeaBiotech an IOR (Barcellona)
Dr. Migel Angel Molina Dr. Clara Mayo
Dr. Monica Gorazòn Dr. Santi Viteri
Dr. Rafael Rosell
Istituto di Endocrinologia ed Oncologia Sperimentale (CNR – Napoli)
Dr. Pierlorenzo Pallante
