1. UTILIZARE RECOMANDATA
Metoda imunoenzimatica pentru determinarea cantitativa a tireoglobulinei umane (Tg) in seruri umane, folosind un dispozitiv de unica folosinta pe instrumentele Chorus TRIO.
2. INTRODUCERE
Tireoglobulina (Tg) este o glicoproteină de 660 kDa localizată în coloidul folicular tiroidian, sintetizată sub influența tireotropinei.
Acesta joacă un rol important în acumularea de iod și este un precursor pentru sinteza hormonilor tiroidieni T3 și T4.
Concentrații serice mari de Tg se observă în diferite boli ale tiroidei: hipertiroidismul, gușa netoxică, tiroidita și carcinoamele tiroidiene diferențiate. Dozarea sa are ca principală aplicație clinică monitorizarea postoperatorie a carcinoamelor tiroidiene diferențiate.
Dozarea Tg se utilizează pentru recunoașterea timpurie sau excluderea metastazelor, a recidivelor tumorale și pentru urmărirea terapiilor cu iod radioactiv: pacienții care au suferit o tiroidectomie totală și fără metastaze și țesuturi tumorale nu prezintă Tg în ser, nici măcar în cazul stimulării cu TSH.
Determinarea Tg în serul acestor pacienți este o indicație a unui neoplasm încă existent sau a unei neoformații, în special atunci când Tg este identificabil în faza terapiei de suprimare a TSH cu hormoni tiroidieni (profiluri de Tg). Din aceste motive, testele de înaltă sensibilitate la dozaje este foarte util.
La pacienții care necesită monitorizare pe perioade lungi de timp, se recomandă să se utilizeze întotdeauna același test analitic, incluzând și probele testate anterior în aceeași sesiune.
Prezența anticorpilor anti-Tg în serul pacientului poate altera dozajul de Tg.
3. PRINCIPIUL METODEI
Dispozitivul Chorus Tg High Sensitivity este gata de utilizare pentru identificarea tireoglobulinei umane (Tg), pe instrumentele Chorus TRIO.
În două incubări diferite, Tg prezentă în probă se leagă de doi anticorpi monoclonali anti-Tg diferiți: unul în fază solidă, celălalt conjugat cu Biotină. După spălările efectuate pentru eliminarea componentelor care nu au participat la reacție, se efectuează incubarea cu conjugatul constând din Streptavidină conjugată cu peroxidază din hrean. Conjugatul care nelegat este eliminat și se adaugă substratul pentru peroxidază. Reacția enzimatică este blocată ulterior prin adăugarea soluției blocante care modifică
culoarea soluției în galben. Culoarea care se obține este proporțională cu concentrația de hormoni prezentă în serul examinat.
Dispozitivele de unica folosinta contin toti reactivii pentru efectuarea testului aplicat pe instrumentele Chorus TRIO.
Rezultatele sunt exprimate in ng/ml calculat in raport cu al materialului de referință BCR-457.
4. ATENTIONARI SI MASURI DE PRECAUTIE NUMAI PENTRU UTILIZARE IN DIAGNOSTICAREA IN
VITRO
Acest kit contine materiale de origine umana, care au fost testate si au indicat un rezultat negativ pentru prezenta HBsAg si pentru anticorpii anti-HIV-1, anti-HIV-2 si anti-HCV, prin testarea cu ajutorul metodelor aprobate de catre FDA.
Deoarece nici un test de diagnosticare nu poate oferi garantii complete cu privire la absenta agentilor infectiosi, toate materialele de origine umana trebuie manevrate ca fiind potential infectioase. In cazul manevrarii materialelor de origine umana, trebuie urmate toate masurile de precautie adoptate in mod normal in practica de laborator.
Indepartarea deseurilor: probele de ser, calibratorii si stripurile utilizate trebuie tratate ca fiind reziduuri infectioase si eliminate conform legii.
Informatii cu privire la Sanatate si Siguranta 1. Nu pipetati cu gura.
2. In timpul manevrarii specimenelor, purtati manusi de unica folosinta si ochelari de protectie.
3. Spalati-va temeinic pe maini dupa pozitionarea dispozitivelor in instrumentul Chorus TRIO.
4. Consultati materialul corespunzator - Fisa Tehnica de Securitate (disponibila la cerere) pentru toate informatiile legate de securitatea reactivilor continuti de kit.
5. Acizii neutralizati si alte deseuri lichide ar trebui decontaminate prin adaugarea unui volum suficient de hipoclorit de sodiu pentru a obtine o concentratie finala de cel putin 1%. Un timp de expunere de 30 de minute la hipoclorit de sodiu in concentratie de 1%, poate fi necesar pentru a asigura o decontaminare eficienta.
6. Picaturile de substante potential infectioase trebuie indepartate imediat cu prosop de hartie absorbanta, si, inainte de a continua lucrul, zona contaminata trebuie tamponata, de exemplu, cu 1% solutie de hipoclorit de sodiu. Hipocloritul de sodiu nu trebuie utilizat peste zone in care s-au varsat substante continand acid, cu exceptia cazului in care acea zona a fost mai intai stearsa si uscata.
Materialele utilizate pentru curatarea picaturilor, inclusiv manusile, trebuie indepartate ca fiind deseuri potential bio-periculoase. Nu autoclavati materialele ce contin hipoclorit de sodiu.
Masuri de Precautie Analitice
Inainte de utilizare, lasati dispozitivele sa ajunga la temperatura camerei (18-30°C); utilizati-le in decurs de 60 de minute.
1. Indepartati dispozitivele al caror substrat (godeul 4) este de coloratie albastra.
RO 28/31
IO-09/255-C IFU 86104 – Ed. 21.12.2018 2. La adaugarea probei in godeu, verificati ca aceasta sa fie
perfect distribuita pe fundul godeului.
3. Verificati ca reactivii sa existe in dispozitiv, si ca dispozitivul sa nu fie deteriorat. Nu utilizati dispozitive carora le lipseste vreun reactiv si/sau care, la inspectia vizuala, prezinta corpuri straine in godeul de reactie.
4. Dispozitivele sunt destinate folosirii impreuna cu instrumentul Chorus TRIO; instructiunile de utilizare trebuie urmate cu atentie si trebuie consultat manualul de operare al instrumentului.
Utilizarea kit-ului este posibilă numai cu versiunea actualizată a programului software. Asigurați-vă ca programul software instalat pe instrument să coincidă sau să aibă o versiune Release (Rel.) superioară celei indicate în tabelul publicat pe site-ul Diesse (http://www.diesse.it/en/Support/Download/strumento:39/) 5. Verificati ca instrumentul Chorus TRIO sa fie setat in mod
corect (vezi Manualul de Operare).
6. Nu deteriorati codul de bare aflat pe manerul dispozitivului, pentru a permite instrumentului sa il citeasca in mod corect.
7. Pentru depozitarea probelor, evitati utilizarea congelatoarelor cu auto-dejivrare.
8. Codurile de bare deteriorate pot fi introduse manual in instrument (vezi Manualul de Operare).
9. In timpul depozitarii si utilizarii, nu expuneti dispozitivele la lumina puternica sau la vapori de hipoclorit.
10. Folosirea probelor accentuat hemolizate, lipemice, icterice, din seruri necoagulate complet sau din probe care prezinta contaminare microbiana, pot constitui toate surse de eroare.
11. Nu utilizati dispozitivul dupa data de expirare.
12. Asigurati-va ca instrumentul este conectat la Tampon de Spalare Autoimunitate (Ref. 86004).
5. COMPONENTA KITULUI SI PREGATIREA REACTIVILOR
Kitul contine suficiente dispozitive si substante pentru efectuarea a 36 de determinari.
DD DISPOZITIVE 6 pachete, fiecare continand 6 dispozitive Descrierea dispozitivului:
Pozitia 8: Spatiu pentru aplicarea codului de bare Pozitia 7: STREPTAVIDINA-POD
Conținut: Conținut: Streptavidină conjugată cu peroxidază, în soluție tampon fosfat conținând fenol 0.05% și Bronidox 0.02%.
Pozitia 6: GODEUL MICROPLACII Captusit cu anticorpi monoclonali anti-Tg Pozitia 5: gol
Pozitia 4: TMB SUBSTRAT
Continut: Tetramethylbenzidine si H2O2 stabilizat in tampon Pozitia 3: SOLUȚIE BLOCANTĂ
Conținut: soluție de acid sulfuric 0.3 M Pozitia 2: CONJUGAT
Continut: anticorpi monoclonali anti-Tg marcați cu Biotină, in solutie tampon fosfat continand 0.05% fenol and 0.02%
Bronidox.
Pozitia 1: GODEU GO
In care operatorul trebuie sa introduca serul nediluat
Utilizare: lasati un pachet sa ajunga la temperatura camerei, deschideti pachetul si scoateti dispozitivele necesare; repuneti-le pe cerepuneti-lelalte in punga impreuna cu plicurepuneti-letul cu silica gel, scoateti aerul din punga si sigilati prin presarea sistemului de inchidere. Pastrati la 2-8°C.
CALIBRATOR CALIBRATOR 1 x 0.500 mL
Continut: Tampon continand Tg si conservant. In forma lichida, gata de utilizare.
CONTROL + CONTROL POZITIV 1 x 1 mL
Continut: Tampon continand Tg si conservant. In forma lichida, gata de utilizare.
MATERIALE NECESARE DAR NEFURNIZATE
• WASHING BUFFER AUTOIMMUNITY REF 86004
• CLEANING SOLUTION 2000 REF 83609
• SANITIZING SOLUTION REF 83604 - 83608
• CHORUS NEGATIVE CONTROL/SAMPLE DILUENT REF 83607
• Instrumentul Chorus TRIO
• Apa distilata sau deionizata
• Sticlarie obisnuita de laborator: cilindrii, tuburi de testare etc.
• Micropipete pentru recoltarea exacta a 50-200 µl de solutie
• Manusi de unica folosinta
• Solutie de Hipoclorit de Sodiu (5%)
• Recipiente pentru colectarea materialelor potential infectioase
6. PASTRAREA SI STABILITATEA REACTIVILOR Reactivii trebuie pastrati la 2/8°C. In cazul pastrarii la o temperatura necorespunzatoare, calibrarea trebuie repetata, iar ciclul de rulare trebuie validat utilizand serul de control (a se vedea sectiunea 9, Validarea testului).
Data de expirare este imprimata pe fiecare componenta si pe eticheta kitului.
Dupa deschidere, stabilitatea reactivilor este limitata:
DISPOZITIVELE 8 saptamani la 2/8°C CALIBRATORUL 8 saptamani la 2/8°C CONTROLUL POZITIV 8 saptamani la 2/8°C
7. RECOLTAREA PROBEI SI DEPOZITAREA
Proba este compusa din ser recoltat normal din vena si manevrata cu toate precautiile impuse de buna practica in laborator.
Posibile consecinte aparute in urma folosirii altor lichide biologice, nu sunt cunoscute.
Serul proaspat poate fi depozitat timp de 1 zile la 2/8°C.
Neutralizarea la caldura poate duce la rezultate eronate.
Calitatea probei poate fi serios afectata de contaminarea microbiana, care poate duce la rezultate eronate.
8. PROCEDURA ANALIZEI
RO 29/31
IO-09/255-C IFU 86104 – Ed. 21.12.2018 1. Deschideti pachetul (pe latura care contine dispozitivul de
inchidere prin presare), extrageti numarul necesar de dispozitive si, dupa ce ati eliminat aerul din interiorul pungii continand restul dispozitivelor, sigilati-o.
2. Verificati starea dispozitivului in conformitate cu indicatiile mentionate in capitolul 4, Masuri de Precautie Analitice.
3. Distribuiti 130 µl din serul de testare nediluat in godeul numarul 1 al fiecarui dispozitiv; la fiecare schimbare de lot, utilizati un dispozitiv pentru calibrator.
4. Pozitionati dispozitivele in instrument Chorus TRIO.
Efectuati calibrarea (in cazul in care este necesar) si testul conform specificatiilor din Manualul de Operare al instrumentului.
9. VALIDAREA TESTULUI
Utilizati serul de control pentru a verifica validitatea rezultatelor obtinute. Acesta trebuie folosit conform indicatiilor din manualul de operare al instrumentului. In cazul in care instrumentul semnaleaza faptul ca serul de control are o valoare care se situeaza in afara intervalului acceptabil, calibrarea trebuie repetata. Rezultatele anterioare vor fi corectate in mod automat.
Daca rezultatul serului de control continua sa se situeze in afara intervalului acceptabil, apelati Suportul Stiintific.
Tel: 0039 0577 319554 Fax: 0039 0577 366605 email: [email protected]
10. INTERPRETAREA REZULTATELOR
Instrumentul Chorus/Chorus TRIO exprima rezultatele in ng/ml (material de referință BCR-457), calculate pe baza unei curbe de calibrare pastrata in memeoria instrumentului.
Testul pe serul examinat, poate fi interpretat dupa cum urmeaza:
Eutiroidieni > 3
Pacienții care au suferit o tiroidectomie totală cu
suprimarea TSH
< 0.29 (sensibilitate funcțională)
11. LIMITARI
Toate valorile obtinute necesita o interpretare atenta care trebuie sa ia in considerare alti indicatori referitori la pacient.
Testul, intr-adevar, nu poate fi folosit ca unica metoda pentru diagnosticul clinic. Rezultatele testului ar trebui interpretate in raport cu informatia disponibila din evaluarea istoricului sau a altor proceduri de diagnosticare.
12. ARIA DE CALIBRARE Aria de calibrare: 0.10-5.1 ng/ml.
Pentru probele cu un titru > 5.1 ng/ml, repetati testul pre-diluand proba cu Negative Control Sample Diluent (PF83607 – care nu este furnizat impreuna cu kitul).
13. ARIA DE REFERINTA
Valorile preconizate la populația normală sunt cuprinse între 3 și 60 ng / ml. Având în vedere tipul de test, valorile preconizate la populația normală sunt > 3 ng / ml.
14. SPECIFICITATEA ANALITICA
A fost efectuat un studiu utilizând reactivii critici din kit. Au fost testate 5 probe (3 negative si 2 pozitive) continand urmatoarele substante interferente:
Factor Reumatoid (1.25 IU/ml – 20 IU/ml) Bilirubina (5 mg/dl – 100 mg/dl)
Trigliceride (50 mg/dl - 3000 mg/dl) Hemoglobina (0.6 mg/dl - 10 mg/dl)
Prezenta in serul testat a substantelor interferente metionate mai sus, nu au modificat rezultatele testului.
15. COMPARAREA METODEI
Au fost testate 104 probe cu kitul Diesse si cu un alt kit disponibil pe piata.
Rezultatele experimentului:
Corelație R 95%CI
Pearson 0.93 0.90-0.95
Spearman 0.87 0.82-0.91
Gradul de corelație dintre cele două metode este foarte mare (Pearson) și mare (Spearman).
16. PRECIZIA SI REPETABILITATEA Proba
Precizia in cadrul ciclului
de rulare Precizia intre ciclurile de rulare
Proba Precizia intre loturi Precizia intre instrumente Media marker. World J Biol Chem 2017 February 26; 8(1) ; 8(1): 81-85.
2. Spencer C. A. Clinical Utility of Thyroglobulin Antibody (TgAb) Measurement for Patients with Differentiated Thyroid Cancers (DTC). J Clin Endocrinol Metab, December 2011, 69(12):3615-3627.
3. Giovannella L., M.Clark P., Chiovato L.,Duntas L., Elisei R., Feldt-Rasmussen U., Leenhardt L., Luster M., Schalin-Jantti C., Schott M., Seregini E., Rimmele H., Smith J., and A Verburg F.DIAGNOSIS OF ENDOCRINE DISEASE. Thyroglobulin measurement using highly sensitive assay in patients with differentiated thyroid cancer: a clinical position paper.
European Jurnal of Endocrinology (2014) 171, R33-R46.
4. Spencer C., LoPresti J., and Fatemi S. How sensitive (second-generation) thyroglobulin measurement is changing paradigms for monitoring patients with differentiated thyroid cancer, in the absebce or presence of thyroglobulin autoantibodies. Curr Opin Endocrinol Diabetes Obes 2014, 21:394-404.
RO 30/31
IO-09/255-C IFU 86104 – Ed. 21.12.2018 5. Gunter E. Analyte stability and treeze-thaw information
Specimen solution LCC.
DIESSE Diagnostica Senese S.p.A.
Via delle Rose 10
53035 Monteriggioni (Siena) Italy
31/31 Atención,ver instrucciones de uso Attenzione, vedere le istruzioni per l'uso
FR GR PT
Attention voir notice d'instructions
Προειδοποίηση, συμβουλευτείτε τα συνοδά έντυπα Atenção, consulte a documentação incluída EN
Contains sufficient for <n> tests Contenido suficiente para <n> ensayos Contenuto sufficiente per "n" saggi
FR GR PT
Contenu suffisant pour "n"tests Περιεχόμενο επαρκές για «ν» εξετάσεις Conteúdo suficiente para “n” ensaios EN ES
Consult Instructions for Use Consulte las instrucciones de uso Consultare le istruzioni per l'uso
GR FR PT
Consulter les instructions d'utilisation Συμβουλευτείτε τις οδηγίες χρήσης Consulte as instruções de utilização EN ES
In Vitro Diagnostic Medical Device Producto sanitario para diagnóstico in vitro Dispositivo medico-diagnostico in vitro
FR GR PT
Dispositif médical de diagnostic in vitro In Vitro Διαγνωστικό Ιατροτεχνολογικό προϊόν Dispositivo médico para diagnóstico in vitro EN