g di prodotto desiderato 9.

3-Idrossimetilen-7- metossi-2,3-diidro-1-benzotiopiran-4(4H)- toluensolfonato 10 [63] e 3-idrossimetilen-7-metossi-2,3- diidrotiopirano[2,3-b]piridin-4(4H)-toluensolfonato 11 [65]

Procedura generale:

Una soluzione di 8 e 9 (0.0104 moli) in 40 ml di tetraidrofurano anidro viene addizionata con 0.0208 moli di p-toluensolfonilcloruro e 0.0416 moli di K2CO3. La miscela di reazione viene tenuta in agitazione per 15 ore a temperatura ambiente e per 15 ore a riflusso controllandone l’andamento mediante TLC (miscela eluente: Etere di petrolio/AcOEt 7: 3).

Dopo raffreddamento, la sospensione ottenuta viene portata a secco, trattata con H2O e successivamente estratta con CHCl3. La fase organica è seccata su MgSO4 ed evaporata per dare i prodotti 10 e 11 che vengono purificati mediante cromatografia flash su colonna (gel di silice: d: 3 cm; h: 25 cm; miscela eluente: Etere di petrolio/ AcOEt= 7:3).

57 11: Resa 24,3% P.f. : 35-40°C 1 H-NMR (DMSO-d6, ppm): 2.44 (s, 3H, CH3); 3.96 (s, 2H, CH2S); 7.32-7.37 (dd, 1

H,

ArH); 7.47 (s, 2H, ArH); 7.53-7.57 (m, 2H, ArH); 7.92-7.99 (m,

3H, ArH).

7-metossi-2-(p-sulfonamidofenil)-1,4-diidrobenzotiopiranopirazoli 2a e 7- metil- 2-(p-sulfonamidofenil)-1,4-diidrpiridothiopiranopyrazoli 2e

Procedura generale:

0.0024 moli di p-sulfonamidofenilidrazina cloridrato sono addizionati ad una soluzione di 0.002 moli dell’opportuno derivato toluensolfonato10 e 11 in 10 ml di DMF anidra. La miscela di reazione è mantenuta in agitazione a temperatura ambiente per 24 ore e dopo a riflusso a 100°C per 15 ore controllando mediante TLC (etere di petrolio/AcOEt = 3:2). Dopo raffreddamento la miscela di reazione viene messa in H2O e filtrato (se il solido è presente) o estratta con CHCl3; la fase

organica è seccata su MgSO4 e portata a secco. I prodotti grezzi ottenuti 2a,e sono

purificati mediante passaggio su colonna di gel di silice (cromatografia flash; d = 3 cm; h = 25 cm; miscela eluente: etere di petrolio/AcOEt= 3:2) e cristallizzati da opportuno solvente.

2a: Resa 34,26% P. f.: 230°C

1

H-NMR (DMSO-d6, ppm): 3.74 (s, 3H, OCH3); 3.99 (s, 2H, CH2-S); 6.67 (d,

1H, Ar-H; Jmax =8.8 Hz; Jmin=2.4 Hz); ; 6.76-6.74 (m, 1H, Ar-H); 7.09 (d, 1H, ArH; J=2.4Hz.); 7.53(s,2H; NH2 scamb.); 7 7.61 (d, 2H, Ar-H J=8.8 Hz); 7.71 (s,

1H, Ar-H); 7.95 (d, 2H, Ar-H, J=8.8 Hz)

2e: Resa 13,26% P. f.: >230°C

58 1

H-NMR (DMSO-d6, ppm): 2.38 (s, 3H, CH3); 4.15 (s, 2H, CH2-S); 6.90 (d, 1H,

Ar-H); 6.95 (d, 1H, Ar-H); 7.52 (s, 2H, NH2, scamb.); 7.60 (d, 2H, Ar-H); 7.75 (s,

59

[1] Supuran, C. T., Scozzafava, A. & Casini, A. Carbonicanhydraseinhibitors. Med. Res. Rev., 2003, 23, 146–189.

[2] Hilvo, M.; Tolvanen, M.; Clark, A.; Shen, B.; Shah, G. N.; Waheed, A.; Halmi, P.; Hanninen, M.; Hamalainen, J. M.; Vihinen, M.; Sly, W. S.; Parkkila, S. Characterization of CA XV, a new GPI-anchored form of carbonic anhydrase. Biochem. J., 2005, 392, 83-92.

[3] Guerri, A.; Briganti, F.; Scozzafava, A.; Supuran, C. T.; Mangani, S. Mechanism of cyanamide hydration catalyzed by carbonic anhydrase II suggested by cryogenic X-ray diffraction. Biochemistry, 2000, 39, 12391-12397.

[4] Whittington, D. A.; Grubb, J. H.; Waheed, A.; Shah, G. N.; Sly, W. S.; Christianson, D. W. Expression, assay, and structure of the extracellular domain of murine carbonic anhydrase XIV: implications for selective inhibition of membrane-associated isozymes. J. Biol. Chem., 2004, 279, 7223-7228.

[5] Supuran, C. T. Carbonic Anhydrases as Drug Targets, An Overview Current Topics in Medicinal Chemistry, 2007, 7, 825-833.

[6] Supuran C. T., Carbonic anhydrases: novel therapeutic applications for inhibitors and activators. Nat. Rev. Drug Disc., 2008, 7, 168-181.

[7] Khalifa, R. J. The carbon dioxide hydration activity of carbonic anydrase. I. Stop-flow kinetic studies on the native human isoenzymes B and C. J. Biol. Chem. 1971, 246,2561-2573.

[8] (a) Clare, B. W.; Supuran, C. T. Carbonic anydrase activators. Part3. Structure-activity correlations for a series of isozyme II activators. J. Pharm: Sci. 1994, 83, 768-773; (b) Temperini, C. ; Vullo, D. ; Scozzafava, A. ; Supuram C. T., Carbonicanydraseactivators. Activation of isoforms I, II, IV, VA, VII, and

60

XIV with L – and D- phenylalanine and crystallographic analysis of their adducts with isozyme II: stereospecific recognition within the active site of an enzyme and its consequences for the drug design. J. Med. Chem. , 2006, 49, 3019-3027.

[9] (a) Briganti, F.; Mangani, S.; Orioli, P.; Scozzafava, A.; Vernaglione, G.; Supuran C. T., Carbonic anhydrase activators: X-ray crystallographic and spectroscopic investigations for the interaction of isozymes I and II with histamine. Biochemistry, 1997, 36, 10384-10392; (b) Temperini, C.; Scozzafava, A.; Puccetti, L.; Supuran C. T., Carbonic anhydrase activators: X-ray crystal structure of the adduct of human isozyme II with L-histidine as a platform for the design of stronger activators. Bioorg. Med. Chem. Lett., 2005, 15, 5136-5141; (c) Temperini, C.; Scozzafava, A.; Vullo, D.; Supuran C. T., Carbonic anhydrase activators. Activation of isozymes I, II, IV, VA, VII, and XIV with l- and d- histidine and crystallographic analysis of their adducts with isoform II: engineering proton-transfer processes within the active site of an enzyme. Chemistry, 2006, 12, 7057-7066; (d) Temperini, C.; Innocenti, A.; Scozzafava, A.; Mastrolorenzo, A.; Supuran C.T., Carbonic anhydrase activators: L- Adrenaline plugs the active site entrance of isozyme II, activating better isoforms I, IV, VA, VII, and XIV. Bioorg. Med. Chem. Lett., 2007, 17, 628-635; (e) Temperini, C.; Innocenti, A.; Scozzafava, A.; Supuran C. T., Carbonic anhydrase activators: kinetic and X-.ray crystallographic study for the interaction of D- and L-tryptophan with the mammalian isoforms I-XIV. Bioorg. Med. Chem., 2008, 16, 8373-8378.

[10] Briganti, F.; Mangani, S.; Orioli, P.; Scozzafava, A.; Vernaglione, G.; Supuran, C. T. Carbonic anhydrase activators: X-ray crystallographic and

61

spectroscopic investigations for the interaction of isozymes I and II with istamine. Biochemistry, 1997, 36, 10384-10392.

[11] Stams, T.; Christianson, D. W. X-ray crystallographic studies of mammalian carbonic anhydrase isozymes. In The Carbonic Anhydrases—New Horizons; Chegwidden, W. R., Edwards, Y., Carter, N., Eds.; BirkhäuserVerlag, Basel, 2000; 159–174.

[12] Supuran, C. T., Scozzafava, A., Conway, J., Eds.; Carbonic Anhydrase. Its Inhibitors and Activators; CRC Press: Boca Raton (FL), USA, 2004; 1–363. [13] (a) Supuran, C. T. Carbonic Anhydrases as Drug Targets—General Presentation. In Drug Design of Zinc-Enzyme Inhibitors: Functional, Structural, and Disease Applications; Supuran, C. T., Winum, J. Y., Eds.; Wiley: Hoboken (NJ), 2009; 15–38; (b) Winum, J. Y.; Rami, M.; Scozzafava, A.; Montero, J. L.; Supuran C., Carbonic anhydrase IX: a new druggable target for the design of antitumor agents. Med. Res. Rev., 2008, 28, 445-463; (c) Domsic, J. F.; Avvaru, B. S.; Kim, C. U.; Gruner, S. M.; Agbandje-McKenna, M.; Silverman, D. N.; McKenna, R., Entrapment of carbon dioxide in the active site of carbonic anhydrase II. J. Biol. Chem., 2008, 283, 30766-30771.

[14] (a) Supuran C. T., Diuretics: from classical carbonic anhydrase inhibitors to novel applications of the sulfonamides. Curr. Pharm. Des. 2008, 14, 641-648; (b) Supuran, C. T.; Di Fiore, A.; De Simone G., Carbonic anhydrase inhibitors as emerging drugs for the treatment of obesity. Expert Opin. Emerg. Drugs 2008, 13, 383-392; (c) De Simone, G.; Di Fiore, A.; Supuran C. T., Are carbonic anydrase inhibitors suitable for obtaining antiobesity drugs?. Curr. Pharm. Des. 2008, 14, 655–660; (d) Mincione, F.; Scozzafava, A.; Supuran, C. T. Antiglaucoma

62

Carbonic Anhydrase Inhibitors as Ophthalomologic Drugs. In Drug Design of Zinc-Enzyme Inhibitors: Functional, Structural, and Disease Applications; Supuran, C. T., Winum, J. Y., Eds.; Wiley: Hoboken (NJ), 2009; 139–154; (e) Krungkrai, J.;Supuran C. T., The alpha-carbonic anhydrase from the malaria parasite and its inhibition. Curr.Pharm. Des. 2008, 14, 631-640.

[15] Mincione, F. et al. The development of topically acting carbonic anhydrase inhibitors as antiglaucoma agents. Curr. Top. Med. Chem., 2007, 7, 849–854. [16] Sugrue, M. F. Pharmacological and ocular hypotensive properties of topical carbonic anhydrase inhibitors. Prog. Retin. Eye Res., 2000, 19, 87–112. Effective, intraocular pressure-lowering aromatic/ eterocyclic sulfonamides containing cationic or anionic moieties : is the tail more important than the ring . J. Med.

Chem., 1999,42,2641-2650.

[17] Scozzafava, A. et al. Carbonic anhydrase inhibitors. Part 74. Synthesis of water-soluble, topically effective, intraocular pressure-lowering aromatic/heterocyclic sulfonamides containing cationic or anionic moieties: is the tail more important than the ring? J. Med. Chem.,1999, 42, 2641–2650.

[18] Temperini, C.; Innocenti, A.; Mastrolorenzo, A.; Scozzafava, A.; Supuran C. T., Carbonicanhydraseinhibitors. Interaction of the antiepileptic drug sulthiame with twelve mammalian isoforms: kinetic and X-ray crystallographic studies. Bioorg. Med. Chem. Lett. 2007, 17, 4866-4872.

[19] Steele, R. M.; Batugo, M. R.; Benedini, F.; Biondi, S.; Borghi, V.; Carzaniga, L.; Impagnietello, F.; Miglietta, D.; Chong, W. K. M.; Rajapakse, R.; Cecchi, A.; Temperini, C.; Supuran C. T., Nitric oxide-donating carbonic anhydrase inhibitors for the treatment of open-angle glaucoma. Bioorg. Med. Chem. Lett. 2009, 19,

63

6565-6570.

[20] Gao, B. B. et al. Extracellular carbonic anhydrase mediates hemorrhagic retinal and cerebral vascular permeability through prekallikrein activation. Nature Med., 2007, 13, 181–188.

[21] Maren, T. H. The development of topical carbonic anhydrase inhibitors. J. Glaucoma, 1995, 4, 49–62.

[22] Innocenti, A. et al. Carbonic anhydrase inhibitors. Inhibition of the membrane-bound human and bovine isozymes IV with sulfonamides. Bioorg.

Med. Chem. Lett., 2005, 15, 1149–1154.

[23] Liao, S. Y. et al. Expression of cell surface transmembrane carbonic anhydrase genes CA9 and CA12 in the human eye: overexpression of CA12 (CA XII) in glaucoma. J. Med. Genet., 2003, 40, 257–261.

[24] Thiry, A.; Supuran, C.T.; Masereel, B.; Dogné, J.M., Recent developments of carbonic anidrase inhibitors as potential anticancer drugs. J. Med. Chem. 2008, 51, 3051-3056.

[25] Brahimi-Horn, M. C. &Pouyssegur, J. Oxygen, a source of life and stress. FEBS Lett., 2007, 581, 3582–3591.

[26] Thiry, A. et al. Targeting tumor-associated carbonic anhydrase IX in cancer therapy. Trends Pharmacol. Sci., 2006, 27, 566–573.

[27] Nishimori, I. et al. Carbonic anhydrase inhibitors. DNA cloning, characterization and inhibition studies of the human secretory isoform VI, a new target for sulfonamide and sulfamate inhibitors. J. Med. Chem., 2007, 50, 381– 388.

64

associated isozyme IX with aromatic and heterocyclic sulfonamides. Bioorg.

Med.Chem. Lett., 2003, 13, 1005–1009.

[29] Teicher, B. A.; Liu, S. D.; Liu, J. T.; Holden, S. A.; Herman, T. S. A carbonic anhydrase inhibitor as a potential modulator of cancer therapies. Anticancer Res. 1993, 13, 1549–1556.

[30] Abbate, F. et al. Carbonic anhydrase inhibitors: E7070, a sulfonamide anticancer agent, potently inhibits cytosolic isozymes I and II, and transmembrane, tumor-associated isozyme IX. Bioorg. Med. Chem. Lett., 2004, 14, 217–223.

[31] Wilkinson, B. L.; Bornaghi, L. F.; Houston, T. A.; Innocenti, A.; Supuran, C. T.; Poulsen, S. A., A novel class of carbonic anhydrase inhibitors: glycoconjugate benzene sulfonamides prepared by “clicktailing”.J. Med. Chem. 2006, 49, 6539– 6548.

[32] De Simone, G.; Vitale, R. M.; Di Fiore, A.; Pedone, C.; Scozzafava, A.; Montero, J. L.; Winum, J. Y.; Supuran, C. T. Carbonic anhydrase inhibitors: hypoxia-activatable sulfonamides incorporating disulfide bonds that target the tumor-associated isoform IX. J. Med. Chem. 2006, 49, 5544–5551.

[33] Köhler, K. et al. Saccharin inhibits carbonic anhydrases: possible explanation for its unpleasant metallic aftertaste. Angew. Chem. Int. Ed. Engl., 2007, 46, 7697–7699.

[34]. Ahlskog, J. K.; Schliemann, C.; Mårlind, J.; Qureshi, U.; Ammar, A.; Pedleym, R. B.; Neri, D. Br., Human monoclonal antibodies targeting carbonic anhydrase IX for the molecular imaging of hypoxic regions in solid tumours. J. Cancer 2009, 101, 645-657.

65

[35] Supuran, C. T. Carbonic anhydrase inhibitors in the treatment and prophylaxis of obesity. Expert Opin. Ther. Pat., 2003, 13, 1545–1550.

[36] Casini, A.; Antel, J.; Abbate, F.; Scozzafava, A.; David, S.; Waldeck, H.; Scha¨fer, S.; Supuran, C. T., Carbonic anhydrase inhibitors: SAR and X-ray crystallographic study for the interaction of sugar sulfamates/sulfamides with isozymes I, II and IV. Bioorg. Med. Chem. Lett., 2003, 13, 841-845.

[37] Picard, F. et al. Topiramate reduces energy and fat gains in lean (Fa/?) and obese (fa/fa) Zucker rats. Obesity Res., 2000, 8, 656–663.

[38] Gadde, K. M. et al. Zonisamide for weight loss in obese adults: a randomized controlled trial. JAMA, 2003, 289, 1820–1825.

[39] Smith, K. S., Jakubzich, C. ; Whittam, T. S.; Ferry, J. G. Carbonic anhydrase is an ancient enzyme widespread in proxaryotes. Proc. Natal. Acid. Sci. U.S.A. 1999,96, 15184-15189.

[40] Zimmerman , S. A.; Ferry, J. G.; Supuran, C. T. Inhibition of the Archeal β- Class (Cab) and γ-Class (Cam) Carbonic Anydrases. Curr. Top. Chem. 2007,7,901-908.

[41] Tructure and metal Exchange in the cadmium carbonic anydrase of marine diatoms . Nature 2008,452, 56-61.

[42] Alterio, V.; Langella, E.; Viparelli, F.; Vullo, D.; Ascione , G.; Dathan, N. A.; Morel, F. M. M.; Supuran , C. T. ; De Simone , G:; Monti, S. M. Structural and inhibation insights into carbonic anhydrase CdCA 1 from the marine diatom Thalassiosira Weissflogii. Biochimie 2012,94, 1232- 1241.

[43] Alterio, V.; Di Fiore, A.; D’ Ambrosio, K.; Supuran, C. T.; De Simone, G. Multiple Binding modes of inhibotors to carbonic anhydrases: how to design

66

specific drugs targeting 15 different isoforms. Chem. Rev. 2012, 112, 4421-4468. [44] Supuran C. T., Carbonic anhydrases: novel therapeutic applications for inhibitors and activators. Nat. Rev. Drug Disc., 2008, 7, 168-181.

[45]. Ahlskog, J. K.; Schliemann, C.; Mårlind, J.; Qureshi, U.; Ammar, A.; Pedleym, R. B.; Neri, D. Br., Human monoclonal antibodies targeting carbonic anhydrase IX for the molecular imaging of hypoxic regions in solid tumours. J. Cancer 2009, 101, 645-657.

[46] Neri, D.; Supuran, C. T. Interfering with pH regulation in tumours as a therapeutic strategy. Nature Rev. Drug Discovery2011,10, 767-777.

[47] Supuran, C. T. Carbonic anhydrase inhibitors. Bioorg. Med. Chem. Lett. 2010,20,3467-3474.

[48] Pastorekova, S; Parkkila, S; Pastorek, J; Supuran, C. T. Carbonic anhydrases: current state of the art, therapeutic applications and future prospects. J. Enzyme Inhib. Med. Chem. 2004, 19, 199-229.

[49] Supuran, C. T. Structure-based drug discovery of carbonic anhydrase inhibitors. J. Enzyme Inhib. Med. Chem. 2012.

[50] Cottier, F.; Raymond, M.; Kurzai, O.; bolsa, M.; Leewattanapasuk, W.; JJimenez- Lopez, C.; Lorenz, M. C.; Sanglard, D.; Vachova, L.; Pavelka, N.; Pavolka, Z.; Muhlschlegel, F. A. The bZIP transcription factor Rcalp is a central regulator of a novel CO2 sensing pathway in yeast. PLOS Phathogens2012, 8, e10002485.

[51] Mogensen, E. G,; Janbon, G.: Chaloupka, J.; Steegborn, C,; Fu, M. S.; Moyrand, F.; Klengel, T,; Pearson, D. S.; Geeves, M. A.; Buck, J.; Levin, L. R.; Muhlschlegel, F. A. Fungal adenylyl cyclase integrates CO2 sensing cAMP

67

signaling and virulence. Curr. Biol, 2005, 15, 2021-2026.

[52] Supuran, C. T. Bacterial carbonic anydrases as drug targets: towards novel antibiotics? Front. Pharmacol. 2011, 2, 34.

[53] Marini, A.M.; Maresca, A.; Aggarwal, M.; Orlandini, E.; Nencetti, S.; Da Settimo, F.; Salerno, S.; Simorini, F.; La Motta, C.; Taliani, S.; Nuti, E.; Scozzafava, A.; McKenna, R.; Rossello, A.; Supuran C.T., Tricyclic Sulfonamides IncorporatineBenzothiopyrano[4,3-c]pyrazole and Pyridothiopyrano[4,3-c]pyrazole Effectively Inhibit α- and β-Carbonic Anhydrase: X-ray Crystallography and Solution Investigations on 15 Isoforms. J.

Med. Chem, 2012, 55, 9619–9629.

[54] Weber, A.; Casini, A.; Heine, A.; Kuhn, D.; Supuran, C. T.; Scozzafava, A.; Klebe, G. Unexpected nano molar inhibition of carbonic anhydrase by COX-2 selective celecoxib: New pharmacological opportunites due to related binding site recognition. J. Med. Chem. 2004,47, 550-557

[55] Di Fiore, A.; Pedone, C.; D’Ambrosio, K.; Scozzafava, A.; De Simone , G.; Supuran, C. T. Carbonic anhydrases inhibitors: Valdecoxib binds to a different active site region of the human isoform II as compared to the structurally related, cyclooxygenase II ‘selective’ inhibitor celecoxib. Bioorg. Med. Chem. 2007, 7,885-891.

[56] Dogné, J. M.; Thiry, A.; Pratico, D.; Masereel, B.; Supuran, C.T. Dual carbonic anhydrase-cyclooxygenase-2 inhibitors. Curr. Top. Med. Chem. 2007,15, 7229-7236.

68

[57] Degani, I.; Fochi, R.; Spunta, G. Heteroaromaticcations. VI. Synthesis Of ThiachromyliumPerchlorateDerivatives, Bollettino Scientifico Della Facolta Di Chimica Industriale Di Bologna, 1966, 24, 75-91.

[58] Ferrarini, P.L.; Mori, C.; Badawneh, M.; Calderone, V.; Greco, R.; Manera, C.; Martinelli, A.; Nieri, P.; Saccomanni, G. Eur. J.Med. Chem.,2000, 35, 815. [59] Ferrarini, P.L.; Mori, C.; Badawneh, M.; Calderone, V.; Greco, R.; Manera, C.; Martinelli, A.; Nieri, P.; Saccomanni, G. Eur. J.Med. Chem.,2000, 35, 815. [60] Menozzi, G.; Mosti, L.; Schenone, S.; Cafaggi, S. J. HeterocyclicChem.,1982, 19, 937.

[61] Da Settimo, A.; Primofiore, G.; Da Settimo, F.; Simorini, F. Drug Design

and Discovery, 1994, 11, 307.

[62] Kostakis, I. K.; Magiatis, P. ; Pouli, N.; J. Med. Chem., 2002, 45, 2599. [63] Dalla Via, L.; Marini, A.M.; Salerno, S.; La Motta, C.; Condello, M.; Arancia, G.; Agostinelli, E.; Toninello, A. Synthesis and biological activity of 1,4- dihydrobenzothiopyrano[4,3-c]pyrazole derivatives, novel pro-apoptotic mitochondrial targeted agents. Bioorg. Med. Chem.2009, 17, 326–336

[64] Primofiore, G.; Marini, A. M.; Da Settimo, F.; Salerno, S.; Bertini, D.; Dalla Via, L.; Marciani Magno, S. Synthesis of Novel 1,4- Dihydropyrido[3',2':5,6]thiopyrano[4,3-c]-pyrazoles and 5H- Pyrido[3',2':5,6]thiopyrano[4,3-d]pyrimidines as Potential Antiproliferative Agents. J. Heterocyclic Chem.2003, 40, 783-788.

69

[65] Primofiore, G.; Marini, A. M.; Salerno, S.; Da Settimo, F.; Bertini, D.; Dalla Via, L. Synthesis and Antiproliferative Evaluation of New Aryl Substituted Pyrido[3',2':5,6]thiopyrano[4,3-c]pyrazoles. J. Heterocyclic Chem.2005, 42, 1357.

RINGRAZIAMENTI

Eccomi giunta al termine di questo mio percorso universitario, sognato da tempo e finalmente arrivato. In questo giorno, desidero ringraziare chi mi ha aiutato e sostenuto nella realizzazione di questo mio progetto. Innanzititto , ringrazio la mia famiglia per avermi permesso di trasformare il mio obiettivo in realtà. Un ringraziamento speciale alla mia relatrice di tesi , la Professoressa Salerno, sia per la disponibilità e professionalità che ha dimostrato nell’aiutarmi nella stesura della mia tesi di laurea e nel lavoro di laboratorio, sia per la capacità di farci sentire a nostro agio e di rendere l’atmosfera lavorativa molto piacevole. Ringrazio anche la Professoressa Marini , per la collaborazione nello svolgimento della mia tesi e il team di laboratorio, Marco e Betty per l’aiuto e per la simpatia. Molto importante in questo mio percorso, è stato il tirocinio in Farmacia, che ha rappresentato per me una bella esperienza e questo grazie alla professionalità, simapatia e pazienza del gruppo di farmaciste/i: Simonetta , Lorena, Federica G., Roby, Cristina, Federica T., Marianna, Andrea e Luca della Farmacia Comunale Fiorillo; grazie ai quali ho cominciato a muovere i primi passi in quello che in un futuro sarà il mio lavoro. Un ringraziamento anche agli amici Marianna , Pomè e il Boc ,con cui ho iniziato il mio percorso universitario e con i quali ho stretto amicizia praticamente dal primo giorno, persone simpaticissime , disponibili e con le quali ho trascorso i momenti piu belli , dai pranzi a mensa alle giornate trascorse in laboratorio. Un ringraziamento a Francesca , amica da sempre , partecipe di tutti i momenti più importanti della mia vita, un’amica speciale, un’amicizia di quelle vere che dureranno per sempre e sono contenta di averla

vicina anche in questo giorno cosi importante. Un ringraziamento anche a tutte gli altrri amici oggi qui presenti: Brunella, con la quale ho passato, non solo momenti di studio insieme ma anche di svago e divertimento; una persona disponibile e sempre pronta ad aiutarmi. Debora , che ha cominciato con me il primo anno di università, con cui ho legato fin da subito, perchè è impossibile non volerle bene. Alessio, che pur conoscendo da meno tempo, è stato presente in questo mio percorso , aiutandoci a vicenda nei momenti pre –esame. Laura e Paolo con i quali ho condiviso le ansie e le gioie dell’ultimo esame , ringraziando soprattutto Paolo per la disponibilità e scusandomi per l’invasione in casa di questi ultimi mesi e Alessandro che ha sempre fatto il tifo per me. Infine , ma non certo per importanza, i miei amici più pazzi , che ho potuto conoscere proprio grazie a questa mia tesi. Abbiamo passato insieme tanti momenti di svago e spensieratezza tra le innumerevoli pause pranzo, aiutandoci a vicenda nel momento del bisogno, nelle pratiche di laboratorio . Senza di loro non sarebbe stata sicuramente la solita cosa : il simpaticisso Paolo complice di molti momenti divertenti , perchè in sua presenza non esiste la noia ; la livornese Claudia , una persona simpaticissiama, disponibile e diventata per me un’amica con cui nonostante la distanza, continuerò a rimanere sicuramente in contatto ; ed infine Giulia , arrivata per ultima ma con cui ho molto legato, concludendo cosi questo favoloso gruppo di laboratorio. Insomma, ringrazio tutti per essere stati presenti in questo mio percorso e per esserlo anche oggi, per darmi forza e coraggio in questo fantastico giorno.