programmi dettagliati

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Lezione 1

 Studi in vivo ed in vitro

 Colture cellulari in sospensione e in adesione  Colture primarie e colture secondarie

 Cappa a flusso laminare

 Composizione di un terreno per colture di cellule animali  Distacco delle cellule in adesione

 Conta cellulare  Criopreservazione  Scongelamento cellulare

 Contaminazione delle colture cellulari  Micoplasmi

 Effetti della contaminazione delle colture cellulari 

Lezione 2

 Definizione di soluzione  La solubilità

 Molarità, Molalità, Percentuale in massa, percentuale in volume, normalità  Definizione pH

 Soluzioni tampone  pHametro

 Indicatori di pH Lezione 3

 Purificazione e caratterizzazione delle proteine  Omogenizzazione

 Precipitazione, salting in, salting out

 Effetto del pH sulla solubilità delle proteine  Frazionamento con solventi organici

 Effetto della temperatura

 Cromatografie, ad esclusione molecolare, scambio ionico, affinità  Resa

 Attività specifica Lezione 4

 Dosaggio delle proteine ( metodi spettofotometrici/colorimetrici)  Radiazioni elettromagnetiche (proprietà)

 Interazione delle radiazioni elettromagnetiche con la materia  Assorbimento/ Emissione

 Spettofotometria UV/Visibile  Assorbanza/ Trasmittanza  Legge di Lambert-Beer

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 Spettofotometro ( spettroscopia di assorbimento)  Retta di taratura per la determinazione della [ ] proteica  Cromofori delle proteine nell’UV

 Stima della [ ] delle proteine nell’ UV

 Stima della [ ] delle proteine nel Visibile (colorimetria)  Lowry  Bradford  Biureto  Luminescenza  Fluorescenza  Chemioluminescenza  Bioluminescenza Lezione 5  Tecniche centrifugative  Principi della centrifugazione  Campo centrifugo

 Campo centrifugo relativo

 Velocità di sedimentazione (principi)  Legge di Stokes

 Tempo di sedimentazione  Coefficiente Svedberg

 Centrifugazione preparativa / analitica  Centrifugazione differenziale

 Centrifugazione zonale di velocità  Centrifugazione isopicnica

 Tipi di rotori

 Classificazione centrifughe  Bilanciamento dei campioni