Novembre / 2016 Report Circuito AQUA MA 7-16 Schema microbiologia alimentare

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IZSVe – Centro Servizi alla Produzione Report definitivo del 27/12/2016

CSP MOD 022 (CSP IOP 024-025) – rev06 – report AQUA MA – 05/16 Pag. 1 / 42

Novembre / 2016

Report Circuito AQUA MA 7-16 Schema microbiologia alimentare

Centro servizi alla produzione

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Sul sito web www.izsvenezie.it o in Aquaweb sono pubblicate le “Modalità consultazione Report AQUA MA”.

Responsabile Circuito interlaboratorio AQUA Microbiologia alimentare Dr.ssa Maria Grimaldi Tel. 049 8084306

e-mail mgrimaldi@izsvenezie.it Responsabile tecnico

Dr.ssa Romina Trevisan Tel. 049 8084152-306 e-mail rtrevisan@izsvenezie.it

Responsabile statistico

Dr.ssa Marzia Mancin Tel. 049 8084431 e-mail mmancin@izsvenezie.it

Istituto Zooprofilattico Sperimentale delle Venezie Centro Servizi alla Produzione

V.le dell’Università 10 – 35020 LEGNARO (PD) www.izsvenezie.it

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Report definitivo

Conta di Batteri anaerobi solfito-riduttori Matrice alimentare carne liofilizzata Conta di Clostridium perfringens Matrice alimentare carne liofilizzata Ricerca di Salmonella spp. (2 campioni) Matrice alimentare latte liofilizzato Ricerca di Salmonella spp. Matrice alimentare carne liofilizzata

1. Caratteristiche, composizione e controllo dei campioni Campione A

Matrice alimentare carne liofilizzata

Clostridium perfringens ATCC 13124

Enterobacter cloacae ATCC 13047

Pseudomonas fluorescens ATCC 13525

Campione B

Matrice alimentare latte liofilizzato

Staphylococcus aureus ATCC 25923

Salmonella agbeni CNRS 463/S03

Listeria monocytogenes ATCC 19111

Campione C

Matrice alimentare carne liofilizzata

Escherichia coli ATCC 25922

Citrobacter freundii ATCC 8090

Listeria innocua ATCC 33090

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Campione D

Matrice alimentare latte liofilizzato

Clostridium perfringens ATCC 13124

Le prove di omogeneità e stabilità sono state eseguite con le seguenti metodiche:

Conta di Batteri anaerobi solfito-riduttori ISO 15213:2003 Conta di Clostridium perfringens ISO 7937:2004

Ricerca di Salmonella spp. ISO/6579:2002/Cor 1:2004

Omogeneità verificata per la deviazione standard target σ_t= 0.25

Il campione A risulta omogeneo per σ_t=0.25 per la conta di Batteri anaerobi solfito riduttori in quanto la stima del valore della varianza campionaria s²_sam=0.01957 risulta inferiore al valore di accettabilità c=0.030 ottenuto dalla combinazione della varianza analitica s²_an=0.0191 e σ_t.

Il campione A risulta omogeneo per σ_t=0.25 per la conta di Clostridium perfringens in quanto la stima del valore della varianza campionaria s²_sam=0.0076 risulta inferiore al valore di accettabilità c=0.037 ottenuto dalla combinazione della varianza analitica s²_an=0.02656 e σ_t.

I campioni B, C e D per la ricerca di Salmonella spp. risultano omogenei in quanto concordi con i risultati attesi.

Stabilità verificata per la deviazione standard target:

σ_t = 0.44 per la conta di batteri anaerobi solfito riduttori σ_t = 0.25 per la conta di Clostridium perfringens

Il campione A risulta stabile per σt =0.44 per la conta di Batteri anaerobi solfito riduttori in quanto la differenza assoluta della media dei valori osservati al primo e terzo giorno pari a 0.1316 risulta inferiore al valore di accettabilità pari a 0.3 σt.

Il campione A risulta stabile per σt =0.25 per la conta di Clostridium perfringens in quanto la differenza assoluta della media dei valori osservati al primo e terzo giorno pari a 0.038 risulta inferiore al valore di accettabilità pari a 0.3 σt.

I campioni B, C e D per la ricerca di Salmonella spp. risultano stabili in quanto concordi con i risultati attesi.

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I valori di omogeneità e stabilità sono calcolati secondo la ISO 13528:2015 e “The international harmonized protocol for the proficiency testing of analytical chemistry laboratories (IUPAC technical report, 2006)”.

2. Risospensione dei campioni

Campione A (Conta di Batteri anaerobi solfito riduttori e conta di Clostridium perfringens).

1. Risospendere il campione liofilizzato con 2 ml di diluente usato abitualmente in laboratorio.

2. Lasciare il campione a temperatura ambiente per 15-20 minuti.

3. Mescolare accuratamente il campione sul vortex.

4. Prelevare 1 ml ed aggiungerlo a 100 ml dello stesso diluente (totale 101 ml): la sospensione così ottenuta rappresenta la diluizione 1:10 (10^-1).

5. Mescolare accuratamente il campione e procedere subito con le determinazioni.

6. Seminare le diluizioni: 10^-1, 10^-2, 10^-3, 10^-4.

Per la conta di Batteri anaerobi solfito riduttori considerare le forme vegetative, non è necessario quindi il trattamento termico.

Campione B, Campione C, Campione D (Ricerca di Salmonella spp).

1. Risospendere i campioni liofilizzati con 2 ml di diluente usato abitualmente in laboratorio.

2. Lasciare i campioni a temperatura ambiente per 15-20 minuti.

3. Mescolare accuratamente i campioni sul vortex.

4. Prelevare 0.5 ml di ogni campione ed aggiungerli rispettivamente a 100 ml dello stesso diluente (totale 100.5 ml): le sospensioni ottenute rappresentano i campioni di alimento tal quale (latte/carne), da cui partire per le determinazioni.

5. Mescolare accuratamente i campioni e procedere subito con le determinazioni.

6. Prelevare 25 ml di ogni campione ed aggiungerli al pre-arricchimento.

Data inizio analisi dal 21/11/16 al 23/11/16.

3. Determinazioni e valori attesi

I valori attesi, anticipati nel report parziale, sono dati dalla mediana dei risultati ottenuti dalle prove di stabilità eseguite dall’organizzatore del circuito AQUA MA.

CampioneA

Determinazione Valore atteso

Conta di Batteri anaerobi solfito-riduttori 16.000 UFC/g

Conta di Clostridium perfringens 17.500 UFC/g

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CampioneB

Determinazione Risultato atteso

Ricerca di Salmonella spp. Presenza (1-5 UFC/ml)

Campione C

Ricerca di Salmonella spp. Assenza

Campione D

4. Determinazioni e valori assegnati

I valori assegnati sono ottenuti dal consenso dei partecipanti, pertanto possono discostarsi dai valori attesi.

CampioneA

Determinazione Valore assegnato

Conta di Batteri anaerobi solfito-riduttori 15.693 UFC/g

Conta di Clostridium perfringens 10.568 UFC/g

CampioneB

Determinazione Risultato

Ricerca di Salmonella spp. Presenza

Campione C

Campione D

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5. Interpretazione dei risultati 5.1 Analisi quantitative in piastra Calcolo dello z-score

I risultati delle analisi quantitative in piastra, dei valori nominali, vengono valutati mediante calcolo dello z-score come segue:

-2  z-score  +2 risultati accettabili -3 < z-score < -2 e 2 < z-score < 3 risultati discutibili z- score ≤ -3 e z-score ≥+3 risultati non accettabili

dove z è calcolato come:

t

Xm

z X



ˆ ) ( 



con

X risultato riportato dal laboratorio partecipante (valore nominale);

Xm

valore assegnato espresso come :

• media robusta (x^*) dei risultati nominali dei partecipanti calcolata usando l’algoritmo A previsto dalla ISO 13528 se la distribuzione dei risultati è unimodale, approssimativamente simmetrica e la deviazione standard robusta dei risultati non è significativamente più grande della deviazione standard target;

• moda della funzione kernel dei risultati nominali nel caso di distribuzioni bimodali o multimodali o asimmetriche o con deviazione standard robusta significativamente più grande della deviazione standard target nel caso in cui informazioni da parte dei partecipanti ne permettano la corretta scelta. Nel caso in cui tali informazioni non fossero disponibili, si valuterà l’ipotesi di identificare la moda corretta tenendo conto dei risultati ottenuti in fase di verifica della stabilità da parte dell’organizzatore.

σ_t deviazione standard target.

L’elaborazione e l’interpretazione dei risultati per ogni esito inviato sono analoghe a quelle effettuate per i valori nominali, tenendo presente che, anche nel calcolo dello z-score per singolo esito inviato, il valore assegnato è quello ottenuto dall’analisi dei dati nominali.

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Incertezza di misura del valore assegnato

L’incertezza di misura del valore assegnato u_x è data:

 da

n u_x s

*

25 .

1 se il valore assegnato è espresso come media robusta dei risultati, dove s^* indica la deviazione standard robusta dei risultati dei partecipanti calcolata usando l’Algoritmo A e n il numero di osservazioni, in accordo con la ISO 13528:2015 e “The international harmonized protocol for the proficiency testing of analytical chemistry laboratories (IUPAC technical report, 2006)”;

 dall’errore standard della moda della funzione kernel dei risultati, calcolato con tecniche bootstrap, se il valore assegnato è espresso come moda.

Infine, se i valori dell’incertezza:

• Se u²_x 0.1



_t² l’incertezza è trascurabile e viene calcolato lo z-score.

• Se 0.1



_t² u_x² 0.5



_t² lo z-score viene dato solo come informazione e non deve essere considerato una valutazione di performance del partecipante;

• Se u²_x 0.5



_t² lo z-score non viene calcolato;

Per i Batteri anaerobi solfito-riduttori il valore limite per l’incertezza è 0.1



_t² 0.00625, mentre per Clostridium perfringens il valore limite per l’incertezza è 0.1



_t² 0.0194.

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Conta di Batteri anaerobi solfito riduttori (UFC/g) per laboratorio Statistica descrittiva sui dati nominali logaritmici:

variabile n min max mean p50 sd cv

Log(UFC/g) 29 2.38 4.58 3.962 4.146 0.5434 0.1371

Box-plot dei dati Distribuzione dei dati e funzione kernel di densità senza outliers

Il valore mediano calcolato sui dati nominali è pari a 4.15, leggermente superiore al valore assegnato robusto calcolato secondo l’algoritmo A pari a 4.04. La deviazione standard pari a 0.54 diminuisce a 0.42 se calcolata con l’algoritmo.

L’ipotesi di unimodalità dei dati è supportata dalla verifica della condizione per cui la deviazione standard robusta dei risultati non è significativamente più grande della deviazione standard target (s^* 1.2



_t), condizione che in questo caso risulta verificata. Tolto un valore outlier (identificato con il test di Grubbs, corrispondente al valore di logUFC/g =2.38), la distribuzione è unimodale ma non simmetrica (p-value=0.006).

Anche la funzione kernel di densità con parametro di lisciamento h0.75



_t 0.33 è unimodale ma non simmetrica.

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Si procede quindi con la stima della moda e del relativo errore standard per il calcolo dell’incertezza di misura con il metodo bootstrap applicato alla funzione kernel di densità per il calcolo del valore assegnato.

Bootstrap della funzione Kernel di densità

Moda =4.1957 Se= 0.074943

Il valore assegnato è dato quindi dalla moda della funzione kernel di densità pari a 4.20 e la sua incertezza di misura u_x 0.075 soddisfa la condizione di trascurabilità (u_x²=0.0056<<0.0194) per cui viene fornito lo z-score per la valutazione della performance dei partecipanti.

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Conta di Batteri anaerobi solfito riduttori (UFC/g) per ogni esito inviato Statistica descrittiva su tutti i dati logaritmici:

Log(UFC/g) 118 2.3802 4.5911 4.0767 4.1761 0.4149 0.1018

Box-plot dei dati Distribuzione dei dati e funzione kernel di densità

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Conta di Clostridium perfringens (UFC/g) per laboratorio Statistica descrittiva sui dati nominali logaritmici:

Log(UFC/g) 24 3.0792 4.5563 3.975 4.0207 0.3820 0.0961

Il valore mediano calcolato sui dati nominali è pari a 4.02, leggermente superiore al valore assegnato robusto calcolato secondo l’algoritmo A paria a 3.99. La deviazione standard pari a 0.38 aumenta a 0.39 se calcolata con l’algoritmo.

L’ipotesi di unimodalità dei dati è supportata dalla verifica della condizione per cui la deviazione standard robusta dei risultati non è significativamente più grande della deviazione standard target (s^* 1.2



_t), condizione che in questo caso non risulta verificata. La distribuzione dei dati, che non presenta outliers, è unimodale e simmetrica (p-value=0.20).

La funzione kernel di densità con parametro di lisciamento h0.75



_t 0.1875 è unimodale, ma non simmetrica.

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Si procede quindi con la stima della moda e del relativo errore standard per il calcolo dell’incertezza di misura con il metodo bootstrap applicato alla funzione kernel di densità per il calcolo del valore assegnato.

Bootstrap della funzione Kernel di densità

Moda =4.024 Se= 0.13336

Il valore assegnato è dato quindi dalla moda della funzione kernel di densità pari a 4.02 e la sua incertezza di misura u_x 0.133 non soddisfa la condizione di trascurabilità (u_x²=0.0178>0.0063 ma u_x²< 0.0312, si è nella condizione 0.1



_t² u_x² 0.5



_t²) per cui lo z-score non viene fornito per la valutazione della performance dei partecipanti, ma solo come indicazione.

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Conta di Clostridium perfringens (UFC/g) per ogni esito inviato

Statistica descrittiva su tutti i dati logaritmici:

Log(UFC/g) 105 3.0414 4.5911 4.0161 4.0414 0.3485 0.0868

5.2 Analisi qualitative

La valutazione della performance dei partecipanti alle prove qualitative è effettuata tramite l’analisi grafica della percentuale dei risultati nominali e di tutti i risultati pervenuti di presenza e assenza del microrganismo. Ogni laboratorio valuta la propria performance dal confronto dei suoi risultati con l’esito atteso.

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6. Termini ed abbreviazioni

Termini Abbreviazioni

Deviazione standard dei dati DS o sd Deviazione standard target DS_t o σ_t

Valore assegnato VA

Numero di osservazioni n

Valore minimo min

Valore massimo max

Valore medio mean

Valore mediano p50

Coefficiente di variazione cv

7. Note

1) I laboratori sono resi anonimi e identificati solo tramite codici alfa-numerici (Informativa ex art. 13 del D.Lgs. n. 196/30.6.2003 e s.m. e i. “Codice in materia di protezione dei dati personali”:

- i dati acquisiti sono utilizzati dall’Istituto per il Circuito Interlaboratorio AQUA e la gestione delle attività correlate;

- le attività comportanti il trattamento dei dati conferiti sono svolte per conseguire finalità a carattere istituzionale;

- il trattamento dei dati è effettuato sia con strumenti informatici che cartacei da parte dei servizi dell’Istituto;

- il titolare del trattamento è l’Istituto Zooprofilattico Sperimentale delle Venezie in persona del Direttore Generale con sede in Legnaro (PD) – Viale dell’Università, 10 e il Responsabile della Struttura Complessa SCS8 – Centro Servizi alla Produzione è il dr.

Renzo Mioni;

- l’interessato potrà esercitare i diritti di cui all’art. 7 del D.Lgs. n. 196/2003 rivolgendosi all’Istituto Zooprofilattico Sperimentale delle Venezie con sede in Legnaro (PD) – Viale dell’Università, 10).

2) Tutti gli operatori dell’Organizzazione del circuito interlaboratorio AQUA MA sono tenuti alla riservatezza sia relativamente alla identità dei partecipanti, sia alle informazioni intercorse.

3) In base alla ISO/IEC 17043:2010 (p. 4.5), le metodiche quantitative utilizzate dai partecipanti sono state comparate per valutare la loro equivalenza tecnica. Non si è potuto elaborare separatamente i risultati delle metodiche non equivalenti a causa della scarsa numerosità. Se ne riporta comunque una breve analisi descrittiva.

4) Hanno eseguito le prove:

Conta di Batteri anaerobi solfito riduttori 32 laboratori partecipanti Conta di Clostridium perfringens 25 laboratori partecipanti Ricerca di Salmonella spp. 43 laboratori partecipanti

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Analisi quantitative in piastra Calcolo dello z-score per laboratorio

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CONTA DI BATTERI ANAEROBI SOLFITO RIDUTTORI PER LABORATORIO

DSt _log10= 0,44 VA = 15.693 2.069 119.042

DS _log10 = 0,38 VA_log10 = 4,20 3,32 5,08

codice laboratorio Metodo Analista UFC/g Log UFC/g z-score

L000320 ISO 15213:2003 1 4900 3,69 -1,15

L000323 NF V 08-061 2009 (46°C) EL 2700

L000324 ISO 15213:2003 GP 17000 4,23 0,08

L000325 ISO 15213:2003 LAB 29000 4,46 0,61

L000330 ISO 15213:2003 FC 15000 4,18 -0,04

L000331 ISO 15213:2003 KR 25000 4,40 0,46

L000332 ISO 15213:2003 E 8600 3,93 -0,59

L000336 ISO 15213:2003 4 38000 4,58 0,87

L000337 ISO 15213:2003 FL 14000 4,15 -0,11

L000340 ISO 15213:2003 FA 27000 4,43 0,54

L000342 ISO 15213:2003 EL 12000 4,08 -0,26

L000343 ISO 15213:2003 A 28000 4,45 0,57

L000344 ISO 15213:2003 XX 25000 4,40 0,46

L000348 ISO 15213:2003 A 17000 4,23 0,08

L000350 ISO 15213:2003 G-C 22000 4,34 0,33

L000352 ISO 15213:2003 SS 4500 3,65 -1,23

L000357 ISO 15213:2003 A 19000 4,28 0,19

L000358 ISO 15213:2003 LM 10000 4,00 -0,44

L000360 ISO 15213:2003 1 15000 4,18 -0,04

L000362 ISO 15213:2003 mg 3900 3,59 -1,37

L000366 ISO 15213:2003 2GC 6500 3,81 -0,87

L000375 ISO 15213:2003 1 15000 4,18 -0,04

L000479 ISO 15213:2003 01 4400 3,64 -1,26

L000481 ISO 15213:2003 GL 240 2,38 -4,13

L000486 ISO 15213:2003 1A 34000 4,53 0,76

L000498 ISO 7937:2004 me 0

L000558 BURL marzo 1997 IZ 460 2,66 -3,48

L000576 ISO 15213:2003 Operatore A 1700 3,23 -2,19

L000674 ISO 15213:2003 MM 1300 3,11 -2,46

L000676 ISO 15213:2003 EL 9700 3,99 -0,47

L000678 ISO 15213:2003 SA 13000 4,11 -0,19

L000681 NF V 08-061:2009 (46°C) RC 9900

CAMPIONE A

VA±2DSt

VAlog10±2DStlog10

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I metodi evidenziati sono stati considerati tecnicamente equivalenti alla norma ISO 15213:2003.

Nota relativa alla non equivalenza dei metodi (ISO/IEC 17043:2010 p. 4.5)

I metodi evidenziati sono stati considerati tecnicamente non equivalenti alla norma ISO 15213:2003.

Nota relativa al metodo

Si segnala che la norma ISO 7937:2004 è la norma per la numerazione di Clostridium perfringens.

Si sottolinea l'importanza di specificare correttamente il metodo utilizzato, con un numero di riferimento.

Si osserva che diversi laboratori comunicano l'utilizzo della metodica ISO 15213:2003 ma specificano l'utilizzo di terreni diversi da quello previsto dalla norma stessa.

Nota relativa all'equivalenza dei metodi (ISO/IEC 17043:2010 p. 4.5)

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CONTA DI BATTERI ANAEROBI SOLFITO RIDUTTORI PER LABORATORIO

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CONTA DI CLOSTRIDIUM PERFRINGENS PER LABORATORIO

NOTA: lo z-score non viene fornito per la valutazione della performance dei partecipanti, ma solo come indicazione (vedi pag. 13).

DSt log10 = 0,25 VA = 10.568 3.342 33.420

DS log10 = 0,29 VAlog10 = 4,02 3,52 4,52

codice laboratorio Metodo Analista UFC/g Log UFC/g z-score

L000320 ISO 7937:2004 L 2700 3,43 -2,37

L000323 ISO 7937:2004 LM 5500 3,74 -1,13

L000324 UNI EN ISO 7937:2005 SC 19000 4,28 1,02

L000330 ISO 7937:2004 B 11000 4,04 0,07

L000331 ISO 7937:2004 KR 19000 4,28 1,02

L000332 ISO 7937:2004 E 8600 3,93 -0,36

L000336 ISO 7937:2004 4 36000 4,56 2,13

L000337 ISO 7937:2004 IC 9100 3,96 -0,26

L000342 ISO 7937:2004 CDB 11000 4,04 0,07

L000343 ISO 7937:2004 A 25000 4,40 1,50

L000348 ISO 7937:2004 C 21000 4,32 1,19

L000351 ISO 7937:2004 SL 11000 4,04 0,07

L000352 ISO 7937:2004 MJ 3500 3,54 -1,92

L000357 ISO 7937:2004 A 15000 4,18 0,61

L000360 ISO 7937:2004 1 12000 4,08 0,22

L000366 ISO 7937:2004 1EB 4900 3,69 -1,34

L000375 ISO 7937:2004 1 26000 4,41 1,56

L000479 UNI EN ISO 7937:2005 01 1900 3,28 -2,98

L000486 UNI EN ISO 7937:2005 1A 34000 4,53 2,03

L000498 ISO 7937:2004 me 0

L000558 ISO 7937:2004 IZ 5900 3,77 -1,01

L000573 BS EN ISO 7937:2004 Fm 6909 3,84 -0,74

L000674 UNI EN ISO 7937:2005 MM 1200 3,08 -3,78

L000676 UNI EN ISO 7937:2005 EL 10000 4,00 -0,10

L000678 ISO 7937:2004 SA 9400 3,97 -0,20

CAMPIONE A

VA±2DSt

VA_log10±2DSt_log10

Nota relativa al risultato

Si ricorda che la ISO 7218 prevede che i risultati di Microbiologia alimentare vengano espressi arrotondati alle due cifre significative.

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CONTA DI CLOSTRIDIUM PERFRINGENS PER LABORATORIO

(22)

Analisi quantitative in piastra

Calcolo dello z-score per ogni esito inviato

(23)

CONTA DI BATTERI ANAEROBI SOLFITO RIDUTTORI

VA = 15.693 DSt_log10 = 0,44 VA±2DSt = 2.069 119.042

VAlog10 = 4,20 VAlog10±2DStlog10 = 3,32 5,08

codice laboratorio metodo codice analista n.repliche UFC/ml Nominale Log UFC/g z-score

1 4900 X 3,69 -1,15

2 5300 3,72 -1,07

1 7600 3,88 -0,72

2 4600 3,66 -1,21

1 1500

2 2100

1 2200

2 2700 X

1 3100

2 3600

SC 1 15000 4,18 -0,04

GP 1 17000 X 4,23 0,08

1 26000 4,41 0,50

2 28000 4,45 0,57

1 29000 4,46 0,61

2 33000 4,52 0,73

LAB 1 29000 X 4,46 0,61

A 1 15000 4,18 -0,04

ARIP 1 17000 4,23 0,08

B 1 20000 4,30 0,24

D 1 21000 4,32 0,29

FC 1 15000 X 4,18 -0,04

RL 1 13000 4,11 -0,19

1 25000 X 4,40 0,46

2 25000 4,40 0,46

1 31000 4,49 0,67

2 25000 4,40 0,46

3 25000 4,40 0,46

4 25000 4,40 0,46

5 24000 4,38 0,42

1 6200 3,79 -0,92

2 8600 X 3,93 -0,59

1 1 36000 4,56 0,82

2 1 35000 4,54 0,79

3 1 39000 4,59 0,90

4 1 38000 X 4,58 0,87

1 17000 4,23 0,08

2 12000 4,08 -0,26

3 14000 X 4,15 -0,11

4 13000 4,11 -0,19

5 16000 4,20 0,02

1 16000 4,20 0,02

2 15000 4,18 -0,04

Campione A

L000320 ISO 15213:2003

1 L

L000323 NF V 08-061 2009

CV EL LM L000324 ISO 15213:2003

L000325 ISO 15213:2003

GDM MR

L000330 ISO 15213:2003

L000331 ISO 15213:2003

KR

CF

L000332 ISO 15213:2003 E

L000336 ISO 15213:2003

L000337 ISO 15213:2003

FL

IC

(24)

VA = 15.693 DSt_log10 = 0,44 VA±2DSt = 2.069 119.042

LU 1 28000 4,45 0,57

FA 1 27000 X 4,43 0,54

1 11000 4,04 -0,35

2 12000 X 4,08 -0,26

3 12000 4,08 -0,26

1 11000 4,04 -0,35

2 8800 3,94 -0,57

3 13000 4,11 -0,19

4 13000 4,11 -0,19

1 35000 4,54 0,79

2 31000 4,49 0,67

3 28000 X 4,45 0,57

1 27000 4,43 0,54

2 25000 4,40 0,46

3 25000 4,40 0,46

1 27000 4,43 0,54

2 27000 4,43 0,54

3 22000 4,34 0,33

1 25000 4,40 0,46

2 30000 4,48 0,64

3 29000 4,46 0,61

1 25000 X 4,40 0,46

2 35000 4,54 0,79

1 17000 X 4,23 0,08

2 17000 4,23 0,08

1 20000 4,30 0,24

2 19000 4,28 0,19

G-C 1 22000 X 4,34 0,33

G-L 1 15000 4,18 -0,04

1 4500 X 3,65 -1,23

2 5700 3,76 -1,00

1 3400 3,53 -1,51

2 2500 3,40 -1,81

1 3500 3,54 -1,48

2 3700 3,57 -1,43

1 19000 X 4,28 0,19

2 26000 4,41 0,50

1 10000 X 4,00 -0,44

2 11000 4,04 -0,35

1 12000 4,08 -0,26

2 11000 4,04 -0,35

1 11000 4,04 -0,35

2 10000 4,00 -0,44

1 9800 3,99 -0,46

2 10000 4,00 -0,44

Campione A

L000340 ISO 15213:2003

L000342 ISO 15213:2003

EL

SB

L000343 ISO 15213:2003

A

B

C

D

L000344 ISO 15213:2003 XX

L000348 ISO 15213:2003

A C L000350 ISO 15213:2003

L000352 ISO 15213:2003

SS DA MJ

L000357 ISO 15213:2003 A

L000358 ISO 15213:2003

LM ER FV MCP

(25)

VA = 15.693 DSt_log10 = 0,44 VA±2DSt = 2.069 119.042

1 15000 X 4,18 -0,04

2 15000 4,18 -0,04

1 19000 4,28 0,19

2 18000 4,26 0,14

mg 1 3900 X 3,59 -1,37

svl 1 3500 3,54 -1,48

svr 1 6300 3,80 -0,90

rv 1 5100 3,71 -1,11

1EB 1 6300 3,80 -0,90

2GC 1 6500 X 3,81 -0,87

3SR 1 7600 3,88 -0,72

1 1 15000 X 4,18 -0,04

2 1 15000 4,18 -0,04

01 1 4400 X 3,64 -1,26

02 1 4500 3,65 -1,23

L000481 ISO 15213:2003 GL 1 240 X 2,38 -4,13

1 34000 X 4,53 0,76

2 31000 4,49 0,67

1 37000 4,57 0,85

2 36000 4,56 0,82

L000498 ISO 7937:2004 me 1 0 X

L000558 BURL marzo 1997 IZ 1 460 X 2,66 -3,48

1 1200 3,08 -2,54

2 1700 X 3,23 -2,19

1 1300 3,11 -2,46

2 1400 3,15 -2,39

MM 1 1300 X 3,11 -2,46

MC 1 1200 3,08 -2,54

EL 1 9700 X 3,99 -0,47

SP 1 9900 4,00 -0,45

MM 1 10000 4,00 -0,44

EA 1 8900 3,95 -0,56

ET 1 9800 3,99 -0,46

LP 1 9400 3,97 -0,51

SA 1 13000 X 4,11 -0,19

VI 1 9000 3,95 -0,55

BO 1 12000 4,08 -0,26

RC 1 9900 X

LB 1 9700

Campione A

L000360 ISO 15213:2003

1 2

L000362 ISO 15213:2003

L000366 ISO 15213:2003

L000375 ISO 15213:2003 L000479 ISO 15213:2003

L000486 ISO 15213:2003

1A 2M

L000576 ISO 15213:2003

Operatore A Operatore B

L000681 NF V 08-061:2009 L000674 ISO 15213:2003

L000676 ISO 15213:2003

L000678 ISO 15213:2003

(26)

Nota relativa all'equivalenza dei metodi (ISO/IEC 17043:2010 p. 4.5)

I metodi evidenziati sono stati considerati tecnicamente equivalenti alla norma ISO 15213:2003.

Nota relativa alla non equivalenza dei metodi (ISO/IEC 17043:2010 p. 4.5)

I metodi evidenziati sono stati considerati tecnicamente non equivalenti alla norma ISO 15213:2003.

Nota relativa al metodo

Si segnala che la norma ISO 7937:2004 è la norma per la numerazione di Clostridium perfringens.

Si sottolinea l'importanza di specificare correttamente il metodo utilizzato, con un numero di riferimento.

Si osserva che diversi laboratori comunicano l'utilizzo della metodica ISO 15213:2003 ma specificano l'utilizzo di terreni diversi da quello previsto dalla norma stessa.

ELABORAZIONE METODI NON EQUIVALENTI

I laboratori L000323 e L000681 hanno utilizzato il metodo NF V08-061:2009 (incubazione a 46°C) per la conta dei Batteri anaerobi solfito riduttori, valutato non equivalente alla norma ISO 15213:2003. Si riporta quindi una breve analisi descrittiva:

Statistica descrittiva sui dati logaritmici dei valori ottenuti con il metodo NF V08-061:2009 (incubazione a 46°C):

Lab. n min max mean p50 sd cv

L000323 6 3.1761 3.5563 3.3866 3.3869 0.1358 0.0401

L000681 2 3.99 4.00 3.9912 3.9912 0.00627 0.00157

(27)

(28)

CONTA DI CLOSTRIDIUM PERFRINGENS

NOTA: lo z-score non viene fornito per la valutazione della performance dei partecipanti, ma solo come indicazione (vedi pag. 13).

VA = 10.568 DSt_log10 = 0,25 VA±2DSt = 3.342 33.420

VA_log10 = 4,02 VA_log10±2DSt_log10 = 3,52 4,52

codice laboratorio metodo codice analista n.repliche UFC/g Nominale Log UFC/g z-score

1 2500 3,40 -2,50

2 2200 3,34 -2,73

1 3000 3,48 -2,19

2 2700 X 3,43 -2,37

1 5600 3,75 -1,10

2 3500 3,54 -1,92

1 7300 3,86 -0,64

2 7600 3,88 -0,57

1 4500 3,65 -1,48

2 5500 X 3,74 -1,13

SC 1 19000 X 4,28 1,02

GP 1 18000 4,26 0,93

A 1 13000 4,11 0,36

ARIP 1 10000 4,00 -0,10

B 1 11000 X 4,04 0,07

D 1 9200 3,96 -0,24

1 19000 X 4,28 1,02

2 18000 4,26 0,93

1 28000 4,45 1,69

2 20000 4,30 1,11

3 22000 4,34 1,27

4 15000 4,18 0,61

5 20000 4,30 1,11

1 7100 3,85 -0,69

2 8600 X 3,93 -0,36

1 1 38000 4,58 2,22

2 1 39000 4,59 2,27

3 1 35000 4,54 2,08

4 1 36000 X 4,56 2,13

1 8900 3,95 -0,30

2 8900 3,95 -0,30

1 8600 3,93 -0,36

2 9100 X 3,96 -0,26

3 11000 4,04 0,07

4 11000 4,04 0,07

5 12000 4,08 0,22

1 10000 4,00 -0,10

2 11000 4,04 0,07

3 10000 4,00 -0,10

4 12000 4,08 0,22

1 11000 4,04 0,07

2 9500 3,98 -0,19

3 11000 X 4,04 0,07

4 9900 4,00 -0,11

Campione A

L000320 ISO 7937:2004

1 L

L000323 ISO 7937:2004

CV EL LM L000324 UNI EN ISO 7937:2005

L000330 ISO 7937:2004

L000331 ISO 7937:2004

KR

CF

L000332 ISO 7937:2004 E

L000336 ISO 7937:2004

L000337 ISO 7937:2004

FL

IC

L000342 ISO 7937:2004

EL

CDB

(29)

VA = 10.568 DSt_log10 = 0,25 VA±2DSt = 3.342 33.420

1 20000 4,30 1,11

2 25000 X 4,40 1,50

3 23000 4,36 1,35

1 25000 4,40 1,50

2 27000 4,43 1,63

3 21000 4,32 1,19

1 26000 4,41 1,56

2 23000 4,36 1,35

3 22000 4,34 1,27

1 25000 4,40 1,50

2 24000 4,38 1,42

3 23000 4,36 1,35

1 18000 4,26 0,93

2 20000 4,30 1,11

1 21000 X 4,32 1,19

2 19000 4,28 1,02

SL 1 11000 X 4,04 0,07

SB 1 12000 4,08 0,22

1 3500 X 3,54 -1,92

2 3100 3,49 -2,13

1 3500 3,54 -1,92

2 3300 3,52 -2,02

1 2700 3,43 -2,37

2 2300 3,36 -2,65

1 15000 X 4,18 0,61

2 20000 4,30 1,11

1 12000 X 4,08 0,22

2 13000 4,11 0,36

1 14000 4,15 0,49

2 15000 4,18 0,61

1EB 1 4900 X 3,69 -1,34

4NC 1 7500 3,88 -0,60

5SF 1 6700 3,83 -0,79

1 1 26000 X 4,41 1,56

2 1 26000 4,41 1,56

01 1 1900 X 3,28 -2,98

02 1 2200 3,34 -2,73

1 34000 X 4,53 2,03

2 31000 4,49 1,87

1 34000 4,53 2,03

2 33000 4,52 1,98

L000498 ISO 7937:2004 me 1 0 X

L000558 ISO 7937:2004 IZ 1 5900 X 3,77 -1,01

Campione A

L000343 ISO 7937:2004

A

B

C

D

L000348 ISO 7937:2004

A C L000351 ISO 7937:2004

L000352 ISO 7937:2004

MJ SS DA

L000357 ISO 7937:2004 A

L000360 ISO 7937:2004

1 2

L000366 ISO 7937:2004

L000375 ISO 7937:2004 L000479 UNI EN ISO 7937:2005

L000486 UNI EN ISO 7937:2005

1A 2M

(30)

VA = 10.568 DSt_log10 = 0,25 VA±2DSt = 3.342 33.420

1 6909 X 3,84 -0,74

2 5800 3,76 -1,04

1 9181 3,96 -0,24

2 8700 3,94 -0,34

1 5727 3,76 -1,06

2 6200 3,79 -0,93

1 6272 3,80 -0,91

2 5800 3,76 -1,04

MM 1 1200 X 3,08 -3,78

MC 1 1100 3,04 -3,93

EL 1 10000 X 4,00 -0,10

SP 1 12000 4,08 0,22

MM 1 8300 3,92 -0,42

EA 1 11000 4,04 0,07

ET 1 11000 4,04 0,07

LP 1 10000 4,00 -0,10

SA 1 9400 X 3,97 -0,20

VI 1 5600 3,75 -1,10

BO 1 6400 3,81 -0,87

Campione A

L000573 BS EN ISO 7937:2004

Fm DG DA SA L000674 UNI EN ISO 7937:2005

L000676 UNI EN ISO 7937:2005

L000678 ISO 7937:2004

Nota relativa al risultato

Si ricorda che la ISO 7218 prevede che i risultati di Microbiologia alimentare vengano espressi arrotondati alle due cifre significative.

(31)

(32)

Analisi qualitative