I
Indice
INTRODUZIONE 1
1. Il Traslocatore Proteico (TSPO) 2
1.1 Struttura molecolare 3
1.2 Localizzazione subcellulare 4
1.3 Localizzazione tissutale 6
1.4 Il gene del TSPO 7
2. Il dominio carbossil-terminale del TSPO contiene una sequenza consenso di riconoscimento/interazione
del colesterolo 9
3. La proteina StAR 13
4. TSPO e steroidogenesi 15
5. Polimorfismo rs6971 del TSPO 18
6. Scopo della tesi 19
MATERIALI E METODI 21
1. Metodiche per la genotipizzazione del polimorfismo
Ala147Thr del gene del TSPO 22
1.1 Estrazione del DNA da saliva 22
1.2 Determinazione del DNA genomico
tramite spettrofotometria 26
1.3 Polymerase chain reaction 27
1.4 Individuazione del polimorfismo Ala147Thr
1.5 tramite analisi RFLP 30
II
2. Metodiche per la valutazione dell’espressione
dell’enzima CYP11A1 in linfomonociti umani 32 2.1 Preparazione dei linfomonociti 32
2.2 Western blot 34
3. Determinazione dei livelli di pregnenolone prodotti
dai linfomonociti mediante test ELISA 40
RISULTATI E DISUSSIONE 45
BIBLIOGRAFIA 57