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Polimorfismo rs6971 del TSPO 18 6

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Academic year: 2021

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I

Indice

INTRODUZIONE 1

1. Il Traslocatore Proteico (TSPO) 2

1.1 Struttura molecolare 3

1.2 Localizzazione subcellulare 4

1.3 Localizzazione tissutale 6

1.4 Il gene del TSPO 7

2. Il dominio carbossil-terminale del TSPO contiene una sequenza consenso di riconoscimento/interazione

del colesterolo 9

3. La proteina StAR 13

4. TSPO e steroidogenesi 15

5. Polimorfismo rs6971 del TSPO 18

6. Scopo della tesi 19

MATERIALI E METODI 21

1. Metodiche per la genotipizzazione del polimorfismo

Ala147Thr del gene del TSPO 22

1.1 Estrazione del DNA da saliva 22

1.2 Determinazione del DNA genomico

tramite spettrofotometria 26

1.3 Polymerase chain reaction 27

1.4 Individuazione del polimorfismo Ala147Thr

1.5 tramite analisi RFLP 30

(2)

II

2. Metodiche per la valutazione dell’espressione

dell’enzima CYP11A1 in linfomonociti umani 32 2.1 Preparazione dei linfomonociti 32

2.2 Western blot 34

3. Determinazione dei livelli di pregnenolone prodotti

dai linfomonociti mediante test ELISA 40

RISULTATI E DISUSSIONE 45

BIBLIOGRAFIA 57

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