RIASSUNTO pag. 1

Indice

I

INDICE

RIASSUNTO pag. 1

ABSTRACT pag. 4

ELENCO DELLE ABBREVIAZIONI pag. 6

INTRODUZIONE pag. 9

1. LE AZIONI DELLA ALC SUI PROCESSI NEURODEGENERATIVI pag. 13 1.1. ALC E MORBO DI P ARKINSON pag. 14 1.2. ALC E SCLEROSI AMIOTROFICA LATERALE pag. 15 1.3. ALC E MORBO DI A LZHEIMER pag. 16

2. ALC E METABOLISMO DEL GLUCOSIO pag. 18

3. ALC NELLE PATOLOGIE PSICHIATRICHE pag. 19 4. ALC E SINDROME DI FATICA CRONICA pag. 20 5. EFFETTI DELLA ALC SULL ’ INVECCHIAMENTO pag. 20 6. EFFETTI DELLA ALC SUI PROCESSI DI APPRENDIMENTO E

DI MEMORIA pag. 22

6.1. EFFETTI DELLA ALC SULLA LONG TERM POTENTIATION

(LTP) E SUI RECETTORI DEL GLUTAMMATO pag. 22 6.2. APPRENDIMENTO NEGLI INVERTEBRATI pag. 24 7. PROPRIETÀ NEUROMODULATORIE DELLA ALC pag. 26

8. ALC E ANALGESIA pag. 28

9. ALC E REGOLAZIONE DELL ’ ESPRESSIONE GENICA pag. 29

SCOPO DELLA TESI pag. 31

MATERIALI E METODI pag. 33

1. TRATTAMENTO DEGLI ANIMALI pag. 33

Indice

II

2. ESTRAZIONE DELL ’ RNA pag. 33

3. ISOLAMENTO DELL ’ M RNA POLI A

pag. 35 4. CONTROLLO DELLA QUALITÀ DELL ’ M RNA POLI A

pag. 37 5. COSTRUZIONE DELLE BANCHE SOTTRATTIVE SOPPRESSIVE pag. 37 6. SCREENING PRIMARIO DELLE BANCHE DI C DNA pag. 41

6.1. AMPLIFICAZIONE DELLE SEQUENZE DIFFERENZIALI pag. 41 6.2 SPOT BLOT DEL PRODOTTO DI PCR pag. 42 6.3. MARCATURA DELLE SONDE pag. 43

6.4. IBRIDAZIONE SU FILTRO pag. 44

7. PREPARAZIONE DEL DNA PLASMIDICO SU PICCOLA SCALA

( MINIPREP ) pag. 47

8. ANALISI DELLE SEQUENZE pag. 48

9. ANALISI DI ESPRESSIONE pag. 49

9.1.. ELETTROFORESI DI RNA IN CONDIZIONI DENATURANTI ,

NORTHERN BLOTTING E IBRIDAZIONE pag. 49 9.2. RT-PCR RELATIVA pag. 52 RISULTATI E DISCUSSIONE pag. 55

ANALISI DELLE SEQUENZE pag. 59

CLONE 3BC9 pag. 59

CLONE 1BE11 pag. 70

CLONE 3BC5 pag. 76

CLONE 3BE3 pag. 84

CONCLUSIONI pag. 91

BIBLIOGRAFIA pag. 92