APPENDICE 1 (Esperimenti preliminari)
In un esperimento preliminare alcuni semenzali di frassino sono stati trattati con EDU per testare la capacità di questa molecola di conferire protezione nei confronti del danno da ozono e per stimare la dose necessaria per raggiungere tale scopo. Semenzali di 2 anni sono stati trapiantati in vasi contenenti 2/3 di compost ed 1/3 di vermiculite fertilizzata con Osmocote; successivamente queste piantine sono state esposte a 150 ppb di O3 (10:00-18:00) in camere di crescita (20±1°C, 85±5% RH, 500 µmol m-2 s-1 PPFD e
fotoperiodo di 14h), fino alla manifestazione di danni visibili da O3, cioè per 16-18 giorni
(AOT40 = 14.1-15.8 ppm h). Un anno dopo, le piante risultate sensibili, sono state trattate con 300 o 450 ppm di EDU, come suggerito per i semenzali di pioppo da Ainsworth et al. (1996) e Bortier et al. (2001), cioè con 4 mg pianta-1 (3 piante per concentrazione di EDU). La formulazione di EDU usata era di 100% polvere bagnabile alla quale poi è stata aggiunta acqua calda distillata per facilitarne la solubilità. Sei piante sono state infuse con 13.3 o 8.9 ml di pura acqua distillata, cioè volumi di infusione corrispondenti a 300 o 450 ppm di EDU (tabella 1).
Dopo l’infusione, i semenzali sono stati trasferiti in una camera di crescita (nelle stesse condizioni viste precedentemente) e fumigati con 150 ppb di O3 per 3 settimane,
fino alla comparsa dei danni visibili (AOT40=18.5 ppm h). La percentuale di superficie danneggiata è stata valutata in accordo ad Innes et al. (2001) sulla fogliolina apicale di ciascuna foglia matura. Al termine, le foglie sono state raccolte ed è stata misurata l’area totale fogliare per mezzo di un misuratore di area fogliare (AM300, ADC, Herts).
Tabella 1. Valutazione dei danni visibili espressi come percentuale di superficie fogliare danneggiata (±SE) dopo l’infusione nel tronco di acqua distillata o EDU (300 o 450 ppm) e fumigazione con ozono (150 ppb, 8 h giorno-1, 21 giorni)
Trattamento Dose di EDU
(mg pianta−1)
Concentrazione
EDU (ppm) Volume infuso (ml pianta
−1 ) Superficie fogliare danneggiata (%) EDU300 4 300 13.3 3 ± 1.7 ab EDU450 4 450 8.9 2 ± 1.2 b WAT300 0 0 13.3 13 ± 2.3 a WAT450 0 0 8.9 12 ± 2.9 a
