L’analisi metagenomica ha evidenziato che 7 specie batteriche (Lactobacillus casei, L. paracasei, L. rhamnosus, L. zeae, L. thailendensis, L. camelliae e Pediococcus stilesii) risultano maggiormente concentrate durante il trattamento con il farmaco, rispetto a tutti gli altri periodi dello studio (p<0.01).
[ In Appendice la tabella rappresentativa delle analisi microbiologiche effettuate per
l’identificazione del microbiota intestinale, estesa a Phylum, Classe, Ordine, Famiglia, Genere e Specie ]
87 ord = fu : livello della concentrazione batterica nel periodo di Follow up;
ord = farmaco : livello della concentrazione batterica nel periodo di Trattamento con il farmaco; ord = wo : livello della concentrazione batterica nel periodo di Wash out;
ord = placebo : livello della concentrazione batterica nel periodo di Trattamento con il placebo; ord = ri : livello della concentrazione batterica nel periodo di Run in.
Figura 10. La distribuzione di L. casei nei pazienti trattati col farmaco e col placebo è risultata significativamente differente. Le concentrazioni sono state sottoposte a trasformazione logaritmica.
TASSONOMIA
Lactobacillus casei: Phylum Firmicutes
Classe Bacilli
Ordine Lactobacillales
Famiglia Lactobacillaceae
Genere Lactobacillus
88 ord = fu : livello della concentrazione batterica nel periodo di Follow up;
ord = farmaco : livello della concentrazione batterica nel periodo di Trattamento con il farmaco; ord = wo : livello della concentrazione batterica nel periodo di Wash out;
ord = placebo : livello della concentrazione batterica nel periodo di Trattamento con il placebo; ord = ri : livello della concentrazione batterica nel periodo di Run in.
Figura 11. La distribuzione di L. paracasei nei pazienti trattati col farmaco e col placebo è risultata significativamente differente. Le concentrazioni sono state sottoposte a trasformazione logaritmica.
TASSONOMIA
Lactobacillus paracasei: Phylum Firmicutes
Classe Bacilli
Ordine Lactobacillales
Famiglia Lactobacillaceae
Genere Lactobacillus
89 ord = fu : livello della concentrazione batterica nel periodo di Follow up;
ord = farmaco : livello della concentrazione batterica nel periodo di Trattamento con il farmaco; ord = wo : livello della concentrazione batterica nel periodo di Wash out;
ord = placebo : livello della concentrazione batterica nel periodo di Trattamento con il placebo; ord = ri : livello della concentrazione batterica nel periodo di Run in.
Figura 12. La distribuzione di L. rhamnosus nei pazienti trattati col farmaco e col placebo è risultata significativamente differente. Le concentrazioni sono state sottoposte a trasformazione logaritmica.
TASSONOMIA
Lactobacillus rhamnosus: Phylum Firmicutes
Classe Bacilli
Ordine Lactobacillales
Famiglia Lactobacillaceae
Genere Lactobacillus
90 ord = fu : livello della concentrazione batterica nel periodo di Follow up;
ord = farmaco : livello della concentrazione batterica nel periodo di Trattamento con il farmaco; ord = wo : livello della concentrazione batterica nel periodo di Wash out;
ord = placebo : livello della concentrazione batterica nel periodo di Trattamento con il placebo; ord = ri : livello della concentrazione batterica nel periodo di Run in.
Figura 13. La distribuzione di L. thailandensis nei pazienti trattati col farmaco e col placebo è risultata significativamente differente. Le concentrazioni sono state sottoposte a trasformazione logaritmica.
TASSONOMIA
Lactobacillus thailandensis: Phylum Firmicutes
Classe Bacilli
Ordine Lactobacillales
Famiglia Lactobacillaceae
Genere Lactobacillus
91 ord = fu : livello della concentrazione batterica nel periodo di Follow up;
ord = farmaco : livello della concentrazione batterica nel periodo di Trattamento con il farmaco; ord = wo : livello della concentrazione batterica nel periodo di Wash out;
ord = placebo : livello della concentrazione batterica nel periodo di Trattamento con il placebo; ord = ri : livello della concentrazione batterica nel periodo di Run in.
Figura 14. La distribuzione di P. stilesii nei pazienti trattati col farmaco e col placebo è risultata significativamente differente. Le concentrazioni sono state sottoposte a trasformazione logaritmica.
TASSONOMIA
Pediococcus stilesii: Phylum Firmicutes
Classe Bacilli
Ordine Lactobacillales
Famiglia Lactobacillaceae
Genere Pediococcus
92 ord = fu : livello della concentrazione batterica nel periodo di Follow up;
ord = farmaco : livello della concentrazione batterica nel periodo di Trattamento con il farmaco; ord = wo : livello della concentrazione batterica nel periodo di Wash out;
ord = placebo : livello della concentrazione batterica nel periodo di Trattamento con il placebo; ord = ri : livello della concentrazione batterica nel periodo di Run in.
Figura 15. La distribuzione di L. zeae nei pazienti trattati col farmaco e col placebo è risultata significativamente differente. Le concentrazioni sono state sottoposte a trasformazione logaritmica.
TASSONOMIA
Lactobacillus zeae: Phylum Firmicutes
Classe Bacilli
Ordine Lactobacillales
Famiglia Lactobacillaceae
Genere Lactobacillus
93 ord = fu : livello della concentrazione batterica nel periodo di Follow up;
ord = farmaco : livello della concentrazione batterica nel periodo di Trattamento con il farmaco; ord = wo : livello della concentrazione batterica nel periodo di Wash out;
ord = placebo : livello della concentrazione batterica nel periodo di Trattamento con il placebo; ord = ri : livello della concentrazione batterica nel periodo di Run in.
Figura 16. La distribuzione di L. camelliae nei pazienti trattati col farmaco e col placebo è risultata significativamente differente. Le concentrazioni sono state sottoposte a trasformazione logaritmica.
TASSONOMIA
Lactobacillus camelliae: Phylum Firmicutes
Classe Bacilli
Ordine Lactobacillales
Famiglia Lactobacillaceae
Genere Lactobacillus
94 Sono state identificate due specie batteriche (Candidatus Amoebophilus asiaticus e Blautia
obeum) la cui concentrazione appare essere predittiva rispettivamente delle caratteristiche
delle feci valutate con la Bristol Stool Chart (Bristol T) e del dolore addominale valutato con la Numerical Rating Scale (NRS).
In particolare, i soggetti con maggiori concentrazioni di Candidatus Amoebophilus asiaticus hanno più elevati valori di Bristol T, e negli stessi soggetti variazioni di concentrazione da una valutazione alla successiva della stessa specie batterica correla con variazioni dell’indice Bristol T.
95 Figura 17. La correlazione tra la concentrazione di Candidatus Amoebophilus asiaticus e consistenza fecale espressa dalla Bristol Stool Chart è risultata significativa. Le concentrazioni sono state sottoposte a trasformazione logaritmica.
TASSONOMIA
Candidatus Amoebophilus asiaticus: Phylum Bacteroidetes
Classe Cytophagia
Ordine Cytophagales
Famiglia Amoebophilaceae
Genere Candidatus Amoebophilus
96 Figura 18. I cambiamenti della concentrazione di Candidatus Amoebophilus asiaticus sono risultati predittivi delle modificazioni della Bristol Stool Chart nel singolo paziente. Le concentrazioni sono state sottoposte a trasformazione logaritmica.
97 Figura 19. La correlazione tra la concentrazione di Blautia obeum e i valori della Numerical Rating Scale è risultata significativa. Le concentrazioni sono state sottoposte a trasformazione logaritmica.
TASSONOMIA
Blautia obeum: Phylum Firmicutes
Classe Clostridia
Ordine Clostridiales
Famiglia Lachnospiraceae
Genere Blautia
98 Dalle analisi metagenomiche emerge una correlazione tra alcune variabili psicometriche e il microbiota intestinale. In particolare le concentrazioni del batterio Bifidobacterium ruminantium sono proporzionali ai valori ottenuti nella scala Psychological General Well- Being Index (PGWI), che valutava la qualità della vita.
Figura 20. La correlazione tra la concentrazione di Bifidobacterium ruminantium e i risultati dello Psychological General Well Being Index è risultata significativa. Le concentrazioni sono state sottoposte a trasformazione logaritmica.
99 Figura 21. I cambiamenti della concentrazione di Bifidobacterium ruminantium sono risultati predittivi delle modificazioni dello Psychological General Well Being Index nel singolo paziente. Le concentrazioni sono state sottoposte a trasformazione logaritmica.
TASSONOMIA
Bifidobacterium ruminantium: Phylum Actinobacteria
Classe Actinobacteria
Ordine Bifidobacteriales
Famiglia Bifidobacteriaceae
Genere Bifidobacterium
100 VALUTAZIONE DELLA SINTOMATOLOGIA IBS
Il trattamento con il farmaco non risulta modificare significativamente le caratteristiche cliniche dell’IBS. Infatti i valori medi del punteggio ottenuto dalla auto-valutazione giornaliera del dolore addominale (NRS), delle caratteristiche delle feci (Bristol Stool Chart), del numero delle evacuazioni giornaliere e dalla auto-valutazione settimanale del grado di sollievo della sintomatologia addominale rispetto al proprio basale (Symtom Relief Scale) non sono significativamente diverse tra il periodo di run in, il periodo di trattamento con
placebo e il periodo di trattamento con il farmaco (vedi tabella 4).
RUN IN PLACEBO LCDG
BRISTOL STOOL CHART 3,86 ± 1,07 3,98 ± 0,88 4,02 ± 1,08
NUMERO EVACUAZIONI 1,67 ± 1,17 1,55 ± 0,84 1,46 ± 0,65
NUMERICAL RATING SCALE 2,77 ± 1,43 2,45 ± 1,62 2,38 ± 1,71
SYMPTOM RELIEF SCALE 3,42 ± 0,78 3,37 ± 1,01
Tabella 4. I valori medi della Bristol Stool Chart, del numero delle evacuazioni, della Numerical Rating Scale e della Symptom Relief Scale non mostrano differenze significative tra il perido di run in, il trattamento con placebo e quello con Lactobacillus casei DG (LCDG).
Anche analizzando le medie dei risultati delle stesse variabili considerate nella prima e nella quarta settimana di trattamento, sia con il placebo che con il farmaco, non si evidenziavano significative differenze né tra la prima e la quarta settimana di trattamento, né rispetto al periodo di run in (vedi tabella 5).
101 RUN IN PLACEBO 1° settimana PLACEBO 4° settimana LCDG 1°settimana LCDG 4° settimana BRISTOL STOOL CHART 3,86 ± 1,07 3,88 ± 1,16 4,10 ± 1,25 3,81 ± 0,94 3,97 ± 1,03
NUMERO EVACUAZIONI 1,67 ± 1,17 1,33 ± 0,64 1,37± 0,63 1,41 ± 0,72 1,52 ± 0,73