S. aucuparia L. lapų ir žiedų flavonoidų ir fenolkarboksi rūgščių kokybinės sudėties

Pritaikius ESC metodą buvo atlikta S. aucuparia L. augalinėse žaliavose esančių fenolinių junginių kokybinė analizė, kurios metu paprastojo šermukšnio lapų ir žiedų ėminiuose buvo identifikuotos trys fenolinės rūgštys (chlorogeno rūgštis, neochlorogeno rūgštis, kavos rūgštis) ir keturi flavonoidai (rutinas, hiperozidas, astragalinas, izokvercitrinas).

ESC analizės metu buvo tirti dvejose augimvietėse – Vilkaviškio raj. Opšrūtų kaimo sodyboje ir Kauno mieste Kleboniškio miško šermukšnių cenopopuliacijoje – augančių paprastųjų šermukšnių žiedų ėminiai. Fenolinių junginių analizė atlikta bangos ilgiui esant 350 nm. Chromatografinis šermukšnio žiedų 50 proc. (v/v) etanolinio ekstrakto skirstymas optimizuotu ESC metodu pateiktas 6 paveiksle. ESC analizės metu taip pat buvo atlikta dvejose augimvietėse – Vilkaviškio raj. Opšrūtų kaimo sodyboje ir Vilkaviškio raj. Baltrakio kaimo Gižagirės miško šermukšnių cenopopuliacijoje – augančių paprastųjų šermukšnio lapų ėminių kokybinė analizė. Chromatografinis šermukšnio lapų 50 proc. (v/v) etanolinio ekstrakto skirstymas optimizuotu ESC metodu pateiktas 7 paveiksle.

AU 0,00 0,02 0,04 0,06 0,08 0,10 0,12 0,14 Minutes 2,00 4,00 6,00 8,00 10,00 12,00 14,00 16,00 18,00 20,00 22,00 24,00 26,00 28,00 30,00 32,00 34,00 36,00 38,00 40,00 42,00 44,00 46,00 48,00 50,00

6 pav. Sorbus aucuparia L. žiedų etanolinio ekstrakto ESC chromatograma. 1 – Neochlorogeno rūgštis; 2 – Chlorogeno rūgštis; 3 –Kavos rūgštis; 4 – Rutinas; 5 – Hiperozidas;

6 – Izokvercitrinas; 7 – Astragalinas.

7 pav. Sorbus aucuparia L. lapų etanolinio ekstrakto HPLC chromatograma. 1 – Neochlorogeno r.; 2 – Clorogeno r.; 3 – Kavos r.; 4 – Rutinas; 5 – Hiperozidas; 6 – Izokvercitrinas;

7 –Astragalinas. AU 0,00 0,02 0,04 0,06 0,08 0,10 0,12 0,14 Minutes 2,00 4,00 6,00 8,00 10,00 12,00 14,00 16,00 18,00 20,00 22,00 24,00 26,00 28,00 30,00 32,00 34,00 36,00 38,00 40,00 42,00 44,00 46,00 48,00 50,00 1 2 3 4 5 6 7 1 2 3 4 5 7 6

3.2.2. S. aucuparia L. žiedų flavonoidų ir fenolkarboksi rūgščių kiekybinės sudėties

įvairavimo vegetacijos periodo metu tyrimas

ESC analizės metu buvo nustatyta, kaip kinta chlorogeno rūgšties, neochlorogeno rūgšties, kavos rūgšties, rutino, hiperozido, astragalino ir hiperozido kiekiai Vilkaviškio raj. Opšrūtų kaimo sodyboje augančių S. aucuparia L. žieduose augalo žydėjimo metu.

Butonizacijos metu paprastojo šermukšnio žieduose buvo 15,88 ± 0,96 mg/g chlorogeno rūgšties (8 paveikslas). Augalo žydėjimo pradžioje chlorogeno rūgšties kiekis padidėjo iki 20,71 ± 0,24 mg/g (8 paveikslas). Masinio žydėjimo metu fenolkarboksi rūgšties kiekis paprastojo šermukšnio žieduose buvo 3,32 proc. mažesnis. Vilkaviškio raj. Opšrūtų kaimo sodyboje augančių S. aucuparia L. žieduose augalo žydėjimo pabaigoje chlorogeno rūgšties sumažėjo iki 18,33 ± 0,78 mg/g (8 paveikslas). Neochlorogeno rūgšties ir kavos rūgšties kiekiai augalinėje žaliavoje žieduose mažėjo augalo žydėjimo metu. Butonizacijos metu paprastojo šermukšnio žieduose buvo 7,21 ± 0,18 mg/g neochlorogeno rūgšties, kurios kiekis žydėjimo pabaigoje sumažėjo iki 5,77 ± 0,07 mg/g (8 paveikslas). S. aucuparia L. žieduose kavos rūgšties kiekis augalo vegetacijos periodo metu nuo butonizacijos iki žydėjimo pabaigos sumažėjo nuo 0,52 ± 0,08 mg/g iki 0,28 ± 0,07 mg/g (8 paveikslas).

8 pav. Fenolinių rūgščių ir flavonoidų kiekio įvairavimas Vilkaviškio raj. Opšrūtų kaime augančių šermukšnių žiedų ėminiuose augalo vegetacijos periodo metu

Flavonoidų kiekis S.aucuparia L. žieduose augalo žydėjimo metu taip pat kito. Nustatyta, kad žydėjimo pradžioje hiperozido buvo 2,43 ± 0,06 mg/g (8 paveikslas). Žydėjimo metu flavonoido kiekis Vilkaviškio raj. Opšrūtų kaimo sodyboje augančių šermukšnių žieduose mažėjo. Masinio žydėjimo metu hiperozido sumažėjo iki 2,16 ± 0,12 mg/g, o žydėjimo pabaigoje buvo nustatyta 1,20 ± 0,04 mg/g hiperozido (8 paveikslas). Flavonoido izokvercitrino kiekis šermukšnio žieduose masinio žydėjimo metu buvo didžiausias. Butonizacijos metu nustatytas izokvercitrino kiekis (0,44 ± 0,06 mg/g) šermukšnio žydėjimo metu padidėjo iki 1,54 ± 0,08 mg/g (8 paveikslas). Vėliau izokvercitrino kiekis žieduose mažėjo. Paprastojo šermukšnio žydėjimo pabaigoje nustatyta 1,21 ± 0,02 mg/g flavonoido izokvercitrino (8 paveikslas). Rutino kiekis S. aucuparia L. žieduose augalo vegetacijos periodo metu nuo butonizacijos iki žydėjimo pradžios didėjo nuo 0,13 ± 0,02 mg/g iki 0,15 ± 0,03 mg/g (8 paveikslas). Nustatyta, kad vėliau rutino kiekis Vilkaviškio raj. Opšrūtų kaime augančių šermukšnių žieduose mažėjo. Nuo augalo žydėjimo pradžios iki pabaigos flavonoido rutino kiekis augalinėje žaliavoje žieduose sumažėjo iki 0,09 ± 0,01 mg/g (8 paveikslas). Paprastojo šermukšnio masinio žydėjimo metu augalinėje žaliavoje buvo nustatytas didžiausias astragalino kiekis (1,03 mg/g ± 0,08 mg/g), kurio vėliau sumažėjo iki 0,73 ± 0,06 mg/g (8 paveikslas).

Atlikus Kauno mieste Kleboniškio miško šermukšnių cenopopuliacijoje augančių S.

aucuparia L. žiedų ESC analizę buvo patvirtinta, kad augalinėje žaliavoje žieduose daugiausia yra

chlorogeno rūgšties, kurios kiekis vegetacijos tarpsnyje nuo augalo žydėjimo pradžios iki žydėjimo pabaigos didėjo nuo 11,02 ± 0,08 mg/g iki 14,18 ± 0,23 mg/g (9 paveikslas). Neochlorogeno rūgšties kiekis S. aucuparia L. žiedų ėminiuose greitai didėjo augalo žydėjimo pradžioje, lėčiau – žydėjimo pabaigoje. Nustatyta, kad paprastojo šermukšnio žieduose neochlorogeno kiekis padidėjo nuo 2,66 ± 0,19 mg/g iki 4,72 ± 0,31 mg/g (9 paveikslas). Kavos rūgšties kiekis Kauno mieste Kleboniškio miške augančių šermukšnių žieduose žydėjimo pradžioje didėjo nuo 0,17 ± 0,06 mg/g iki 0,32 ± 0,02 mg/g, tačiau vėliau pradėjo mažėti; paprastojo šermukšnio žydėjimo pabaigoje augalo žieduose buvo 0,29 ± 0,06 mg/g kavos rūgšties (9 paveikslas).

9 pav. Fenolinių rūgščių ir flavonoidų kiekio įvairavimas Kauno mieste Kleboniškio miške augančių šermukšnių žieduose

Flavonoidų kiekiai Kauno mieste, Kleboniškio miške augančių šermukšnių žieduose augalo žydėjimo metu kito nežymiai. Rutino S. aucuparia L. žieduose nuo žydėjimo pradžios iki žydėjimo pabaigos smažėjo nuo 0,82 ± 0,03 mg/g iki 0,72 ± 0,03 mg/g, hiperozido kiekis sumažėjo nuo 0,75 ± 0,01 mg/g iki 0,66 ± 0,05 mg/g (9 paveikslas). Flavonoido izokvercitrino kiekis paprastojo šermukšnio žieduose masinio žydėjimo metu buvo 2,95 ± 0,45 mg/g, o iki žydėjimo pabaigos sumažėjo iki 2,89 ± 0,03 mg/g (9 paveikslas). Astragalino kiekis paprastojo šermukšnio žydėjimo pradžioje taip pat didėjo, o vėliau pradėjo mažėti. Nustatyta, kad nuo žydėjimo pradžios iki masinio žydėjimo flavonoido kiekis padidėjo nuo 0,42 ± 0,03 mg/g iki 0,51 ± 0,02 mg/g, o žydėjimo pabaigoje sumažėjo iki 0,48 ± 0,02 mg/g (9 paveikslas).

Atlikus flavonoidų ir fenolkarboksi rūgščių kiekybinės sudėties įvairavimo S. aucuparia L. žieduose tyrimus buvo nustatyta, kad žieduose daugiausia yra chlorogeno rūgšties, mažiau – neochlorogeno rūgšties. Flavonoidų ir kavos rūgšties paprastojo šermukšnio žieduose yra nedaug. ESC analizės metu nustatyta, kad labiausiai augalo žydėjimo metu kinta chlorogeno rūgšties kiekis. Kadangi paprastojo šermukšnio augalinėje žaliavoje žieduose viso augalo žydėjimo metu chlorogeno rūgšties ir neochlorogeno rūgšties kiekiai buvo gausiausi, tyrimų metu gauti rezultatai buvo palyginti su kitų tyrėjų atliktų tyrimų su S. aucuparia L. augaline žaliava duomenimis. Pastebėta, kad priklausomai nuo to, kur buvo surinkti žiedų ėminiai (Vilkaviškio raj. Opšrūtų kaimo sodyboje ar Kauno mieste Kleboniškio miške), chlorogeno rūgšties kiekis augalinės žaliavos ekstraktuose kito nuo 11,02 mg/g iki 20,71 mg/g, o neochlorogeno rūgšties kiekis – nuo 0,28 mg/g iki 7,71 mg/g. Kitų tyrėjų

duomenimis paprastojo šermukšnio žieduose gali būti 17,8 – 41,7 mg/g chlorogeno rūgšties ir 1,9 – 19,8 mg/g neochlorogeno rūgšties [2, 51, 55]. Kiekybinės fenolinių rūgščių sudėties įvairavimo augalo vegetacijos periodo metu tyrimų metu nustatyta, kad chlorogeno rūgšties ir neochlorogeno rūgšties kiekiai augalinėje žaliavoje žieduose yra mažesni, tačiau rezultatai gali būti naudojami vertinant, kada augalinėse žaliavose fenolinių junginių kiekis yra didžiausias ir kada ekonomiškiausia rinkti augalines žaliavas.

3.2.3. S. aucuparia L. lapų flavonoidų ir fenolkarboksi rūgščių kiekybinės sudėties