39 un incremento dei livelli di espressione di questa proteina che hanno raggiunto valori simili a quelli trovati nei topi WT.
4.2. Espressione del fosfatidil inositol 3-chinasi (PI3K)
Finalmente, per verificare se l’espressione di PI3K nel fegato di questi topi possa modificarsi a seguito dell’eliminazione della pleiotrofina o per la somministrazione di una dieta ricca di grassi, il suo contenuto nel surnatante dell’omogenato epatico è stato valutato mediante WB.
Figura 20. Espressione del PI3K. Espressione di PI3K valutata mediante WB
Come viene mostrato nella Figura 20, l’eliminazione della PTN non ha avuto nessun effetto sull’espressione di PI3K. Così come, i livelli di questa proteina non sono moficati a seguito della somministrazione di una dieta ricca di grassi in nessuno dei due modelli murina, WT e PTN-KO. PI3K WT LF WT HF PTN LF PTN HF 0 5 10 15 u .a .
40 L’analisi dell’espressione delle due proteine della cascata di segnalazione dell’insulina ha permesso solo di individuare una minore espressione del recettore dell’insulina nei topi PTN-KO a 6 mesi di età rispetto a topi WT. Il fatto che non abbiamo riscontrato differenze nelle fasi iniziali della segnalazione per effetto dell’eliminazione della pleiotrofina o della somministrazione di una dieta ricca di grassi non ci permette di escludere che gli animali presentino un’alterata risposta epatica all’insulina epatica giacchè la trasduzione del segnale potrebbe essere alterato in punti a valle nella cascata di segnalazione
In questo senso, potrebbe essere importante continuare il presente lavoro analizzando l’espressione di altre proteine implicate nelle tappe a valle della trasduzione del segnale dell’insulina. Così come, sarebbe necessario valutare il grado di fosforilazione del recettore dell’insulina, dei substrati del recettore dell’insulina e di altre chinasi implicate nella trasduzione del segnale.
41 CONCLUSIONI
1. Nei topi PTN-KO il peso del fegato è sensibilmente ridotto rispetto ai topi WT mettendo in evidenza il ruolo mitogenico della pleiotrofina nello sviluppo di questo tessuto.
2. L’eliminazione della pleiotrofina induce un aumento dell’attività della malato deidrogenasi e dell’espressione della glicerolo chinasi epatiche che potrebbero essere reponsabili di un aumento della gluconeogenesi epatica in questi animali.
3. La somministrazione di una dieta ricca di grassi produce un aumento del peso del fegato nei topi WT. Questo cambiamento potrebbe essere dovuto da un maggiore deposito di lipidi negli epatociti.
4. La somministrazione di una dieta ricca di grassi potrebbe far aumentare l’attività gluconeogenica epatica tanto nei topi WT come nei PTN-KO. Nei topi WT la sintesi di glucosio potrebbe aumentare a partire da lattato e dal glicerolo come conseguenza di un aumento dell’attività/espressione della lattato deidrogenasi e dell’espressione della glicerolo chinasi. Mentre nei topi PTN-KO trattati con una dieta ricca di grassi, l’attività della lattato deidrogenasi non aumenta mentre l’espressione della glicerolo chinasi epatica subisce un ulteriore incremento significativo.
5. Nei topi WT, l’analisi dell’espressione del recettore dell’insulina e della PI3K non permette di concludere che la somministrazione di una dieta ricca di grassi o la delezione della pleiotrofina siano responsabili dell’induzione della resistenza epatica all’insulina. C’è da notare che nei topi PTN-KO l’espressione del recettore dell’insulina nel fegato è significativamente ridotta. Comunque sono necessarie ulteriori analisi dell’espressione e dell’attività delle varie chinasi a valle del recettore dell’insulina per chiarire un possibile ruolo di un’alterazione di questa cascata di segnalazione nel promuovere la resistenza epatica all’insulina.
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