Tyrimo metu vertinome prenataliniu laikotarpiu atliktų biocheminių kraujo serumo žymenų – PAPPA, laisvą β-HCG, uE3, HCG, AFP rezultatus. Tyrimai buvo suskirstyti į pirmo (PAPPA, laisvas β-HCG) ir antro (uE3, HCG, AFP) trimestro tyrimus.
Vertinant tyrimų rezultatus pagal amžių, tiriamosios buvo suskirstytos į keturias amžiaus grupes (iki 30 m., 30–34 m., 35–37 m. ir virš 37 m.) ir analizuotos pagal nėštumų ir gimdymų skaičių.
Atlikus tyrimų analizę, pastebėta, kad iki 30 metų amžiaus grupėje rasti didžiausi PAPPA, uE3 ir AFP koncentracijų vidurkiai, o 30–34 metų grupėje – didesnis laisvo β-HCG koncentracijos vidurkis lyginant su kitomis amžiaus grupėmis. HCG didesnė koncentracija būdinga 35–37 metų nėščioms moterims. PAPPA koncentracija buvo mažesnė vyresnėms pacientėms, o uE3 mažesnės koncentracijos buvo susijusios su mažesnėmis AFP ir didesnėmis HCG koncentracijomis vyresnėms nei 30 m. pacientėms. Panašius PAPPA ir laisvo β-HCG rezultatus savo darbe aptarė Driscoll ir kiti autoriai, tyrę nėščiąsias ir aptikę, kad esant didesnei Dauno sindromo rizikai, PAPPA koncentracija kraujo serume būna sumažėjusi, o laisvo β-HCG koncentracija – padidėjusi (42). Savo darbe autorius rekomenduoja pirmojo trimestro metu iki 14 savaitės, t.y. kuo anksčiau, tirti nėščiąsias neinvazinio tyrimo būdu vertinant riziką galimai chromosomų aneuploidijai. Šis autorius neatsižvelgė į pacienčių amžių. Mūsų antro trimestro rezultatai yra artimi Spencer
36 aprašytiems rezultatams, t.y. HCG Dauno sindromo atveju padidėja, o Edvardso – sumažėja, bei uE3 ir AFP koncentracijos abiejų sindromu metu būna žemesnis (37). Autorius atlikdamas analizę, rėmėsi ir ultragarsinio tyrimo rezultatais. Mes ultragarsinio tyrimo rezultatų ir kitų rizikos kriterijų neanalizavome, bet biocheminių kraujo žymenų rezultatus gavome panašius. Dauguma autorių analizuojančių prenatalinės diagnostikos rezultatus neišskiria amžiaus grupių.
Lyginant tyrimų koncentracijų vidurkius pagal nėštumų skaičių, didesnės reikšmės rastos 1-o nėštumo metu (laisvas β-HCG, uE3, HCG).
Mūsų tyrime išsiskyrė 30–34 m. amžiaus septintą kartą nėščių moterų tyrimų rezultatai. Mažesnė PAPPA koncentracija ženkliai skyrėsi nuo rekomenduojamų normos ribų bei stebėta didesnė laisvo β-HCG koncentracija, kuri taip pat viršijo rekomenduojamas normų ribas. Tokius tyrimų rezultatus aptiko Tišlarić-Medenjak ir kiti autoriai, atlikę pirmojo trimestro duomenų analizę dėl Dauno sindromo. Vertinant 3118 nėščias moteris, buvo atsižvelta į pacienčių amžių, svorį, ir rūkymą bei ultragarsinio tyrimo rezultatus. Autoriai sudarė grupes pagal nėštumo savaitę. Atlikę analizę, rado, kad pirmo trimestro metu PAPPA koncentracija sumažėja, o laisvo β-HCG padidėja, esant Dauno sindromui. Mūsų tyrime 7 katrą nėščių moterų PAPPA ir laisvo β-HCG koncentracijos pakitimai buvo panašūs į Tišlarić-Medenjak ir kitų autorių tyrimo rezultatus. Straipsnyje teigiama, kad geriau vertinti kombinuotą tyrimą dėl Dauno sindromo (43).
Gimdymų skaičius buvo analizuotas, dėl didelio negimdžiusiųjų moterų skaičiaus amžiaus grupėse. 30–34 metų amžiaus grupėje negimdžiusių pacienčių buvo 41 proc., o virš 35 metų sudarė apie 28 proc. Analizuojant tyrimų vidurkius pagal gimdymų skaičių, daugiausia padidėjusių vidurkių rasta tarp negimdžiusių ir penktą kartą gimdysiančių moterų. Atsižvelgiant į gimdymų skaičių, tyrimai tarpusavyje susiję, bet išskirtinių atvejų, tokių kaip septinto nėštumo metu, nestebėta..
Šio darbo trūkūmą galima įžvelgti, tai, kad nebuvo vertintas ultragarsinio tyrimo rezultatas – sprando raukšlės peršviečiamumas, kuris reikalingas atliekant kombinuotą pirmo trimestro tyrimą, vertinant vaisiaus raidos anomalijas.
Prenatalinės diagnostikos tyrimai rekomenduojami nuo 35 metų nėščioms moterims, bet atliekant analizę stebėtas didelis skaičius pacienčių, kurios jaunesnės nei 35 metų, todėl galima teigti, kad nors tyrimas nepriklauso, bet jaunesnio amžiaus nėščiosios svarbi jų vaisiaus sveikata.
37
IŠVADOS
1. Įgimtų vaisiaus raidos anomalijų prenatalinės diagnostikos I-o trimestro metu aptiktos didesnės laisvo β-HCG bei II-o trimestro metu – didesnės HCG koncentracijos, kurios tarpusavyje tiesiogiai siejosi. II-o trimestro metu mažesnės E3 koncentracijos siejosi su mažesnėmis AFP ir didesnėmis HCG koncentracijomis.
2. Įgimtų vaisiaus raidos anomalijų rizikos vertinimui naudojamų biocheminių rodiklių vertės iki 30 m. nėščiosioms yra geriausios lyginant su vyresnėmis moterimis, kurioms mažesnė uE3 koncentracija siejasi su didesne HCG ir mažesne AFP koncentracija.
3. Prenatalinės diagnostikos biocheminių kraujo žymenų didžiausi pakitimai nustatyti moterims septinto nėštumo metu, ypač 30–34 m. ir virš 37 metų nėščiosioms.
PRANEŠIMAI IR PUBLIKACIJOS MAGISTRO DARBO TEMA
Remiantis magistro darbo metu atlikta tyrimų duomenų analize parengtos tezės ir stendinis pranešimas „Biochemistry prenatal diagnosis analysis assessing risk of congenital fetal development disorders“ 13-ąjame Baltijos šalių laboratorinės medicinos kongrese (BALM 2016) 2016 m, gegužės 12–14 d. (2 priedas).38
LITERATŪROS SĄRAŠAS
1. Lietuvos Respublikos sveikatos apsaugos ministro 2005 m, birželio 23 d, įsakymas Nr, V-522 „Dėl žmogaus genetikos paslaugų, apmokamų iš Privalomojo sveikatos draudimo fondo biudžeto, sąrašo ir jų bazinių kainų patvirtinimo“, [peržiūrėta 2016 kovo 23] prieiga per internetą: https://www.e-tar.lt/portal/lt/legalAct/TAR.F0FD05086341
2. Danielius Serapinas, Prenatalinės diagnostikos medicininiai ir etiniai aspektai, Sveikatos mokslai (Vilnius), 2012;22(3)
3. 11. Erturk B, Karaca E, Aykut A, Durmaz B, Guler A, Buke B et al, Prenatal Evaluation of MicroRNA Expressions in Pregnancies with Down Syndrome, Biomed Res Int. 2016;2016(5312674):5
4. Piechan JL, Hines KA, Koller DL, Stone K, Quaid K, Torres-Martinez W, et al, NIPT and Informed Consent: an Assessment of Patient Understanding of a Negative NIPT Result, J Genet Couns. 2016; 1059(7700):1-11
5. Tørring N, Petersen O B, Becher N, Vogel I, Uldbjerg N, the Danish Fetal Medicine Study Group,the Danish Clinical Genetics Study Group, First trimester screening for other trisomies than trisomy 21, 18, and 13, Prenat Diagn 2015;35(6):612–619
6. Warsof S. L., Larion S., Abuhamad A. Z. Overview of the impact of noninvasive prenatal testing on diagnostic procedures. Pren diag 2015;35(10):972–979
7. Vitkus A, Baltrušaitis K, Valančiūtė A, Vitkus A, Žukienė J; „ Žmogaus histologija“; Kaunas, 2003, „KMU spaudos ir leidybos centras“.
8. Qi S-T, Liang L-F, Xian Y-X, Liu J-Q and Wang W. Arrested human embryos are more likely to have abnormal chromosomes than developing embryos from women of advanced maternal age. Journal of Ovarian Research2014 7:65 1-8
9. Lewis AJ, Austin E, Galbally M. Prenatal maternal mental health and fetal growth restriction: a systematic review. J Dev Orig Health Dis. 2016;17:1-13
10. Miliku K, Vinkhuyzen A, Blanken L ME, McGrath J J, Eyles D W, Burne T H, et al. Maternal vitamin D concentrations during pregnancy, fetal growth patterns, and risks of adverse birth outcomes. Am J Clin Nutr ajcn123752 2016 doi: 10.3945
11. Melamed N, Okby R, Freeman H, Rosen H, Nevo O, Barrett . Fetal growth pattern in twin pregnancies. Am J Obstet Gynecol 2016;214(1):301
12. Babic I., Ferretti E., Jimenez-Rivera C., Gruslin A., Moretti F. Prenatal diagnosis of intrahepatic portosystemic shunt in intrauterine growth restricted fetus with transient fetal anemia and cardiomegaly: A case report. J Case Rep Images Gynecol Obstet 2016;2:39–43
39 13. Kneitel A W., Treadwell M C., O'Brien L M. Effects of maternal sleep apnea on fetal growth.
Am J Obstet Gynecol 2016;214(1):250
14. Jiang F, Ren J, Chen F, Zhou Y, Xie J, Dan S, et al, Noninvasive Fetal Trisomy (NIFTY) test: an advanced noninvasive prenatal diagnosis methodology for fetal autosomal and sex chromosomal aneuploidies, Jiang et al. BMC Medical Genomics 2012;5(57):1-11
15. HahnEmail S, Jackson L G and Zimmermann B G, Prenatal diagnosis of fetal aneuploidies: post-genomic developments, Genome Medicine 2010;2(50):1-5
16. Papageorgiou E A and Patsalis P C, Non-invasive prenatal diagnosis of aneuploidies: new technologies and clinical applications, Papageorgiou and Patsalis Genome Medicine 2012;4(46):1-12
17. Aburawi E H and Souid A, Lymphocyte respiration in children with Trisomy 21, Aburawi and Souid BMC Pediatrics 2012;12(193):1-6
18. Kovaleva N V, Germ-line transmission of trisomy 21: Data from 80 families suggest an implication of grandmaternal age and a high frequency of female-specific trisomy rescue, Molecular Cytogenetics 2010;3(7):1-8
19. Chen C, Wang L, Chern S, Kuo Y, Chen Y, Pan C, et al, First-trimester diagnosis of recurrent omphalocele associated with fetal trisomy 18 but without parental mosaicism, Taiwanese Journal of Obstetrics and Gynecology 2015;54(2):194–195
20. Asim A, Kumar A, Muthuswamy S, Jain S and Agarwal .Down syndrome: an insight of the disease. Journal of Biomedical Science 2015;22(41):1-9
21. Maxwell S, Bower C, O'Leary P, Impact of prenatal screening and diagnostic testing on trends in Down syndrome births and terminations in Western Australia 1980 to 2013, Prenat Diagn 2015;35(13):1324-1330
22. Donner C, Daelemans C, Ceysens G. Prenatal screening: the example of Down's syndrome screening. Rev Med Brux 2015;36(4):207-11
23. QiEmail Q, Zhou X, Jiang Y, Hao N, Zhou J and Zhang L. A rare de novo duplication of chromosome 21q22,12 → q22,3 with other concomitant deletion and duplication of small fragments in 21q associated with Down syndrome: Prenatal diagnosis, molecular cytogenetic characterization, Molecular Cytogenetics 2013;6(11):1-7
24. Schwartz E, and Vellody K, Prenatal Risk Assessment and Diagnosis of Down Syndrome: Strategies for Communicating Well with Patients, AMA Journal of Ethics 2016;18(4):359-364 25. Portocarrero1 M E L, Garvelink1 M M, Becerra Perez1 M M, Giguère A, Robitaille1 H,
40 syndrome: an environmental sca. BMC Medical Informatics and Decision Making 2015;15(76):1-10
26. David A, Krantz, MAcorrespondenceemail, Terrence W, Hallahan, PhD, Kuanglin He, PhD, John E, Sherwin, PhD, Mark I, Evans, MD, First-trimester screening in triplets, Am J Obstet Gynecol 2011;205(4):364.
27. Palomaki, G, E,, Eklund, E, E,, Neveux, L, M,, and Lambert Messerlian, G, M, Evaluating first trimester maternal serum screening combinations for Down syndrome suitable for use with reflexive secondary screening via sequencing of cell free DNA: high detection with low rates of invasive procedures, Prenat Diagn, 2015; 35: 789–796, doi: 10,1002/pd,4609
28. Kou KO, Poon CF, Kwok SL, Chan KY, Tang MH, Kan AS, Leung KY, Effect of non-invasive prenatal testing as a contingent approach on the indications for non-invasive prenatal diagnosis and prenatal detection rate of Down's syndrome, Hong Kong Med J. 2016;22:1-8 29. Cereda A and Carey J C, The trisomy 18 syndrome, Orphanet Journal of Rare Diseases
2012;7(81):1-14
30. Houlihan O A and O’Donoghue K, The natural history of pregnancies with a diagnosis of Trisomy 18 or Trisomy 13; a retrospective case series, Houlihan and O’Donoghue. BMC Pregnancy and Childbirth 2013;13(209):1-9
31. Spencer K, Screening for Down syndrome, Scand J Clin Lab Invest Suppl. 2014;244:41-7 32. Donalson K, Turner S, Morrison L, Liitti P, Nilsson C, Cuckle H, Maternal serum placental
growth factor and α-fetoprotein testing in first trimester screening for Down syndrome, Prenat Diagn 2013;33(5):457–461
33. Cowans N J, , Kisanga M C, Spencer K, Maternal serum placental growth factor in second trimester trisomy 21 pregnancies, Prenat Diagno 2012;32:117-121
34. Danielius Serapinas, Genetiniai tyrimai ir paveldimumas, Lietuvos bendrosios praktikos gydytojas ( Vilnius), 2012; 16(7): 453
35. Ren F, Hu Y, Zhou H, Zhu W, Jia L, Xu J, et al, Second trimester maternal serum triple screening marker levels in normal twin and singleton pregnancies, Biomed Rep. 2016;4(4): 475–478
36. Gambhir P. Basic principles of prenatal screening for aneuploidies, Molecular Cytogenetics 2014;7((Suppl 1)I15):1
37. Spencer K. 2007. Aneuploidy screening in the first trimester. Am J Med Genet Part C Semin Med Genet 2007;145C:18–32
38. .Nicolaides K H. Screening for fetal aneuploidies at 11 to 13 weeks. Prenat Diagn 2011; 31: 7– 15.
41 39. Hui L., Muggli EE, Halliday JL. Population-based trends in prenatal screening and diagnosis for aneuploidy: a retrospective analysis of 38 years of state-wide. Australian and New Zealand Journal of Obstetrics and Gynaecology, 2015;55(5):507
40. McLennan A, Palma-Dias R, da Silva Costa F, Meagher S,. Nisbet D L, Scott F. Noninvasive prenatal testing in routine clinical practice – An audit of NIPT and combined first-trimester screening in an unselected Australian population. Aust N Z J Obstet Gynaecol. 2016;56(1):22-28
41. Jaques AM, Collins VR, Haynes K, Sheffield LJ, Francis I, Forbes R, Halliday JL. Using record linkage and manual follow-up to evaluate the Victorian maternal serum screening quadruple test for Down's syndrome, trisomy 18 and neural tube defects. J Med Screen. 2006;13(1):8-13
42. Deborah A. Driscoll, Susan J. Gross. First trimester diagnosis and screening for fetal aneuploidy. Genet Med. 2008 January; 10(1): 73–75.
43. Tišlarić-Medenja D, Zec I, Šimundić A M, Sabolović-Rudman S, Kos M and Bukovec Ž Megla. The impact of temporal variability of biochemical markers PAPP-A and free β-hCG on the specificity of the first-trimester Down syndrome screening: a Croatian retrospective study. BMC Research Notes2010;3(194):1-7
42
PRIEDAI
1 priedas
4. LIETUVOS SVEIKATOS MOKSLŲ UNIVERSITETAS
BIOETIKOS CENTRAS
Kodas 302536989, A. Mickevičiaus g. 9, LT-44307 Kaunas, tel. (8 37) 327233, viet..tel.: 5121, www.lsmuni.lt., el.p.: sochumkatedra@lsmuni.lt
Medicinos akademijos (MA) 2015-11-11 Nr.BEC-LMB(M)-86
Studijų programa-LABORATORINĖS
MEDICINOS BIOLOGIJA II k. magistr. Irmai Bladžienei DĖL PRITARIMO TYRIMUI
LSMU Bioetikos centras, įvertinęs (MA) studijų programos - LABORATORINĖS
MEDICINOS BIOLOGIJA II k. magistr. Irmos Bladžienės (mokslinio darbo vadovė: dr. Viltė Marija Gintauskienė, LSMUL KK Laboratorinės medicinos klinika) mokslinio-tiriamojo darbo temos: ,,Biocheminių kraujo žymenų tyrimai ir jų interpretacija paveldimų ligų ar įgimtų raidos anomalijų diagnostikai prenataliniu laikotarpiu" tiriamojo darbo anotaciją, kurie leidžia spręsti, jog planuojamame tyrime neturėtų būti pažeistos tiriamojo teisės, todėl šiam tyrimui pritariama.
43 2 priedas BIOCHEMISTRY PRENATAL DIAGNOSIS ANALYSIS ASSESSING RISK OF CONGENITAL
FETAL DEVELOPMENT DISORDERS Irma Bladžienė, Ph,D, Viltė Marija Gintauskienė
e-mail: irmavainaviciute@gmail,com Lithuanian university of health science,
Introduction. Biochemical analysis of serum is an important non-invasive test for detecting patients with an increased risk of congenital malformations. Modern serum analysis helps to identify pregnant women, which are at risk of neural tube defects, 21 and 18 chromosome trisomy (Down and Edwards syndromes).
Objective. To evaluate the results of biochemical blood marker‘s changes in prenatal diagnostics. Methods. Analyze 1117 pregnant women‘s (mean age 33±5 years), tested in Lithuanian university of health science, medicine laboratory in 2014–2015, results of biochemical blood tests intended for prenatal screening. First trimester markers (n=927) (double test): plasma protein A (PAPP-A) and free β-chorionic gonadotropin (β-hCG) to analyse in 11–13 weeks and/or second trimester markers (n=384) (triple test): alpha-fetoprotein (AFP), chorionic gonadotropin (hCG), unconjugated estriol (uE3) to analyse in 14–20 weeks of pregnancy. Researches were carried out with „Delfin 6000 Xpress“ analyzer using immunometric method „Wallace Oy DELFIA Xpress“ (Finland) reagent kits. Data statistical analysis was performed with the IBM SPSS 20 program. Patients were divided into 4 age groups (under 30, 30–34, 35–37 and over 37 years). Differences between groups were analyzed by ANOVA statistical method. Data are statistically significant at p <0,05.
Results. In the first trimester up to 30 years pregnant women were found lower β-hCG, and in the second trimester – a higher concentration of AFP, compared with 30–34 years group and increased uE3 concentrations compared to all the older age groups. The higher concetrations of β-hCG and the lower concentrations of uE3 were found in the blood of first time pregnant women's aged 30-34 years. Conclusions. 30–34 years old pregnant women observed major biochemical research abnormalities, especially in the first pregnancy, and up to 30 years – risk of congenital abnormalities in fetal development of biochemical blood markers are lowest.