Riassunto
Parole chiave: Vitrificazione, Equino, Embrione, Embryo transfer, Criopreservazione
Lo scopo del presente studio è stato quello di valutare gli effetti della vitrificazione sulla morfologia degli embrioni equini e sul tasso di gravidanza dopo il loro trasferimento. Sono stati impiegati 20 embrioni recuperati 6 giorni dopo l’ovulazione di cavalle sottoposte ad inseminazione artificiale con seme fresco. Gli embrioni sono stati valutati morfologicamente e vitrificati in paillettes da 0,25 ml utilizzando l’Equine Vitrification Kit® (Bioniche Animal Health, USA). Gli embrioni sono stati trasferiti secondo due protocolli: a) dopo essere stati scongelati, deposti in una capsula Petri, valutati morfologicamente e caricati in una nuova paillette (Gruppo 1; settembre-ottobre 2008); b) direttamente dopo lo scongelamento (Gruppo 2; agosto-settembre 2009). I tassi di gravidanza a 14 e 25 giorni sono stati confrontati con quelli ottenuti dopo trasferimento di embrioni freschi del programma di Embryo transfer commerciale (Gruppo 3; febbraio-agosto 2009). Tre dei 9 embrioni del Gruppo 1 non hanno subito modificazioni di sorta dopo la vitrificazione/scongelamento, 1/9 ha presentato la capsula non integra e 5/9 la presenza di un numero variabile di cellule estruse. Le percentuali di gravidanza del Gruppo 1 non sono risultate significativamente differenti da quelle del Gruppo 2 sia a 14 (1/9; 11,1% vs 4/11 36,4%) (P=0,3) che a 25 giorni (1/9; 11,1% vs 3/11; 27,3%) (P=0,6). Le percentuali di gravidanza del Gruppo 1 sono risultate significativamente differenti rispetto a quelle riscontrate nel Gruppo 3 sia a 14 (1/9 vs 29/43; P=0,003) che a 25 giorni (1/9 vs 29/43; P=0,003). Le percentuali di gravidanza del Gruppo 3 (29/43; 67,4%) sono risultate tendenzialmente più alte al giorno 14 rispetto a quelle del Gruppo 2 (4/11; 36,4%) (P=0,08) ma significativamente più alte al giorno 25 (29/43; 67,4% vs 3/11; 27,3%) (P=0,02) (Fisher Exact Test).
Abstract
Keyword: Vitrification, Equine, Embryo, Embryo transfer, Criopreservation
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The aim of this study was to evaluate the effects of vitrification on the morphology of 6 days equine embryos and pregnancy rate in recipients. Twenty embryos were recovered in mares breeding with artificial insemination 6 days after ovulation. The embryos were evaluated morphologically and vitrified in 0.25 ml straws using the vitrification Equine Kit ® (Bioniche Animal Health, USA). The embryos were transferred using two protocols: a) after thawing,
placement in a Petri dish, morphologically assessment and loading into a new straw (Group 1, September-October 2008), b) directly after thawing (Group 2, August-September 2009). Pregnancy rates at 14 and 25 days were compared with those obtained after transfer of fresh embryos in a commercial Embryo transfer program (Group 3, Februry-August 2009). In Group 1, 3/9 embryos have not been changed morphologically after vitrification and thawing, 1/9 showed the capsule non intact and 5/9 showed the presence of a variable number of extruded cells. Pregnancy rate in Group 1 were not significantly different from those of Group 2 at day 14 (1/9, 11.1% vs 4/11, 36.4%) (P=0.3) and 25 (1/9, 11.1% vs 3/11; 27.3% (P=0.6). Pregnancy rate in Group 1 were significantly different from those of Group 3 at day 14 (1/9 vs 29/43, P=0.003) and 25 (1/9 vs 29/43, P=0.003). Pregnancy rate of Group 3 (29/43, 67.4%) were tendentially higher on day 14 compared to Group 2 (4/11, 36.4%) (P=0.08) but significantly higher at day 25 (29/43, 67.4% vs 3/11, 27.3%) (P=0.02) (Fisher Exact Test).
