1.1 Il sistema nervoso centrale (SNC)……... 1

INDICE

Riassunto……….……….. I Abstract……….. IV

1. INTRODUZIONE ... 1

1.1 Il sistema nervoso centrale (SNC)……... 1

1.2 Il rombencefalo... 2

1.2.1 Regionalizzazione antero-posteriore... 2

1.2.2 La segmentazione del rombencefalo……..…... 3

1.2 Il “rhombic lip”……...……...……..…… 12

1.3 Il sistema cerebellare...………...…. 14

1.3.1 Il sistema precerebellare………...………... 17

a) IL NUCLEO PONTINO…...……….. 19

b) IL NUCLEO DELL’OLIVA INFERIORE………... 20

1.4 Tecniche di “FATE MAPPING”nei mammiferi…... 20

1.4.1 Ricombinazione omologa: knockout, knockin………... 21

1.4.2 Topi transgenici………... 23

1.4.3 Transgenesi binaria………... 23

1.4.4 Ricombinasi Cre e linee transgeniche... 24

a) R26R...……….. 26

b) Hoxa2

………... 26

c) Wnt1Cre………... 27

1.5 Scopo della tesi………. 29

2 MATERIALI E METODI... 30

2.1 Genotipaggio... 30

2.2 Colorazione cromogenica per la ? -galattosidasi... 31

2.3 Taglio dei preparati... 32

2.4 Immunoistochimica su sezione... 32

2.5 Ibridazione “in situ”... 33

2.5.1 Ibridazione in situ “whole mount”... 35

2.5.2 Ibridazione in situ su sezione……….. 39

2.6 Immagini………. 41

3 RISULTATI……….… 42

3.1 Sviluppo del nucleo dell’oliva inferiore ……… 42

3.1.1 STADIO 12.5 dpc……….. 43

3.1.2 STADIO 13.5 dpc……….. 44

3.1.3 STADIO 14.5 dpc……….. 45

3.1.4 STADIO 17.0 dpc……….. 45

3.2 Analisi del destino differenziativo dei precursori del “rhombic lip”……… 46

3.2.1 STADIO 12.5 dpc……….. 49

3.2.2 STADI 13.5 e 14.5 dpc………. 53

4 DISCUSSIONE……….. 62

4.1 Sviluppo del nucleo dell’oliva inferiore……….. 62

4.2 Origine dei precursori del nucleo dell’oliva inferiore………… 63

4.3 Il nucleo dell’oliva inferiore deriva da una popolazione

eterogenea di precursori…………..……… 66

5 CONCLUSIONI………. 67

6 PROSPETTIVE FUTURE………..……….. 68 Bibliografia

Ringraziamenti