Capitolo 6
RISULTATI
Per avere una visione rapida e immediata dei risultati ottenuti la maggior parte dei dati, analizzati separatamente, è stata raggruppata nelle seguenti tabelle riassuntive, delle quali la prima (tab. 6) è riferita ai campioni fogliari, la seconda (tab. 7) ai frutti.
Tab. 6 – Riassunto dei valori ottenuti con le determinazioni effettuate sui campioni di foglie di pomodoro.
FRUTTI
1° prelievo 2° prelievo
Unità Controllo Trattato Controllo Trattato
lipofilico µmol.TEAC/g s.s. 5,64 a 4,62 a 4,11 a 4,08 a Potere
antiossidante idrofilico µmol.TEAC/g s.s. 18,14 a 13,95 a 14,32 a 17,58 a totale µmol/g s.s. 16,73 a 13,1 a 16,81 a 17,15 a Ascorbato ridotto µmol/g s.s. 13,5 a 12,36 a 12,69 a 12,55 a
licopene mg/g s.s. 0,92 a 0,9 a 1,06 a 0,64 a
Tab. 7 - Riassunto dei valori ottenuti con le determinazioni effettuate sui campioni di frutti di pomodoro.
FOGLIE
1° prelievo 2° prelievo
Unità Controllo Trattato Controllo Trattato TBARS µmol/g s.s. 0,24 a 0,41 b 0,09 a 0.09 a
Asc. tot µmol/g s.s. 17,60 a 18.95 a 15,86 a 13.58 a
AsA µmol/g s.s. 10.82 a 8,82 b 7,70 a 5,37 b AsA/AsA tot % 61,47 a 46,5 a 48,55 a 39.63 b G tot µmol/g s.s. 3,40 a 1,61 a 2,61 a 1,96 a GSSG µmol/g s.s. 0,43 a 0,18 b 1,01 a 0,65 b GSH µmol/g s.s. 2,97 a 1,43 b 1,59 a 1,31 b GSH/G tot % 87,35 a 88,82 a 60,92 a 66,84 a
APX U/mg prot 0,31 a 0,09 b 0,68 a 0,26 b GR U/mg prot. 0,46 a 0,25 b 0,68 a 0,49 b
6.1 - FOGLIE
6.1.1 – TBARS (Fig. 20)
Le TBARS hanno mostrato valori significativamente maggiori nei campioni raccolti al primo prelievo, rispetto a quelli del secondo.
Nell’ambito dei singoli prelievi tra controllo e trattato si riscontra una differenza significativa unicamente alla prima raccolta, con una concentrazione di TBARS quasi doppia nel trattato (0,41 µmol/g s.s.) rispetto al controllo (0,24 µmol/g s.s.). Le analisi relative al secondo prelievo hanno rilevato, invece, la stessa quantità di TBARS nei controlli e nei trattati (0,09 µmol/g s.s.).
Fig 20 - Concentrazioni delle TBARS, in µmol/g s.s., nelle foglie delle piante di pomodoro controllo e trattate del primo e del secondo prelievo.
6.1.2 – Ascorbato (Fig. 21)
In fig. 21 sono riportati i valori di ascorbato totale (Asc. tot, AsA+DHA), ascorbato ridotto (AsA rid, AsA), rapporto tra AsA ridotto e AsA ossidato (AsA/DHA), mentre in tab. 6 è riportato anche il rapporto AsA rid/AsA tot, espresso come percentuale.
La concentrazione di ascorbato totale rimane pressoché invariata in ambedue i prelievi, con valori oscillanti tra 17,6 e 19 µmol/g s.s. nel primo prelievo e tra 13,6 e 15,9 µmol/g s.s. nel secondo.
La forma ridotta risulta, invece, diminuita significativamente nei campioni trattati rispetto ai controlli di ciascun prelievo, mentre non mostra variazioni tra i due prelievi.
Di conseguenza anche la percentuale di AsA ridotto su AsA totale risulta minore nei trattati, rispettivamente 47,5, contro 62.47 (controllo) per il primo prelievo e 39,8 contro 49,23 (controllo) nel secondo (tab. 6).
Il rapporto AsA/DHA non ha mostrato grandi variazioni sia tra controllo e trattato, che tra i prelievi successivi.
Fig 21 - Concentrazioni di ascorbato totale (AsA + DHA), ascorbato ridotto (AsA), espresse in µmol/g s.s., e del rapporto di ascorbato ridotto sull’ossidato (AsA/DHA) nelle foglie delle piante di pomodoro controllo e trattate, ai due prelievi.
6.1.3 - Glutatione (Fig. 22)
Per quanto riguarda il glutatione sono state considerate separatamente le diverse forme: il glutatione totale (G tot), il glutatione ridotto (GSH) e il rapporto del glutatione ridotto sull’ossidato (GSH/GSSG). Sono stati anche determinati il glutatione ossidato (GSSG) e il rapporto tra GSH e glutatione totale (espresso come percentuale): tali dati sono riportati, invece, in tab. 6.
Nei campioni raccolti a giugno (prima raccolta) il G totale diminuisce significativamente con il trattamento, passando da 3,4 µmol/g s.s. (controllo) a 1,6 µmol/g s.s. (trattato). Al contrario, nei campioni della seconda raccolta (luglio), per quanto esista variabilità tra controllo e trattato con valori in quest’ultimo minori, la differenza non risulta statisticamente significativa.
Una sensibile diminuzione si ha anche a livello del GSSG tra controllo e trattato, sia per il primo prelievo (0,43 - 0,18µmol/g s.s.) che per il secondo (1,01 - 0,65 µmol/g s.s.). Comunque il GSSG risulta aumentare fortemente nel tempo, passando
da 0,43 µmol/g s.s. e 0,18 µmol/g s.s. rispettivamente per il controllo e il trattato del primo prelievo a 1,0 µmol/g s.s. e 0,65 µmol/g s.s. nel secondo (tab. 6).
Il rapporto GSH/GSSG relativo al primo prelievo è superiore rispetto a quello del secondo, senza però mostrare sensibili variazioni tra controllo e trattato (7,0 µmol/g s.s. – 8,1 µmol/g s.s. primo prelievo; 1,6 µmol/g s.s. – 2,0 µmol/g s.s. secondo prelievo).
Il rapporto GSH/G tot non mostra significative differenze tra controllo e trattato all’interno dello stesso prelievo, pur risultando maggiore per i campioni della prima raccolta (tab. 6).
Fig 22 - Concentrazioni di glutatione totale (GSH + GSSG), glutatione ridotto (GSH), espresse in µmol/g s.s., e rapporto del glutatione ridotto sull’ossidato (GSH/GSSG) nelle foglie di piante di pomodoro controllo e trattate del primo e del secondo prelievo.
6.1.4 - Ascorbato perossidasi (Fig. 23)
Anche l’attività specifica di questo enzima risulta significativamente minore a seguito del trattamento in confronto ai rispettivi controlli, ma aumenta in relazione al tempo di imposizione dello stress. Nei campioni della seconda raccolta si ha, infatti, un’attività maggiore, già a livello del controllo (0,68 U/mg prot.), rispetto ai campioni raccolti precedentemente (0,31 U/mg prot.).
Fig 23 - Attività specifica (U/mg prot.) dell’ascobato perossidasi (APX) nelle foglie di piante di pomodoro controllo e trattate sia del primo che del secondo prelievo.
6.1.5 - Glutatione riduttasi (Fig. 24)
L’attività specifica della GR, espressa in U/mg di proteine, è risultata significativamente più alta nei controlli rispetto ai trattati, sia per i campioni raccolti a giugno che per quelli raccolti a luglio.
Fig 24 - Attività specifica (U/mg prot.) della glutatione riduttasi (GR) nelle foglie delle piante di pomodoro controlo e trattate del primo e del secondo prelievo.
Infatti nel primo prelievo sono stati trovati valori di 0,46 U/mg prot. e 0,25 U/mg prot., rispettivamente per le foglie controllo e quelle trattate, mentre per il secondo i valori sono stati di 0,68 U/mg prot. e 0,49 U/mg prot.
Come si può notare dai dati sopra riportati l’attività specifica di questo enzima risulta aumentare con la crescita della pianta raggiungendo valori quasi doppi al momento del secondo prelievo con differenza quindi altamente significativa, indipendentemente dal trattamento.
6.2 - FRUTTI
6.2.1 - Potere antiossidante dell’estratto idrofilico (Fig. 25)
Il potere antiossidante dell’estratto idrofilico, i cui valori si mantengono tra 14 e 18 µmol TEAC/g s.s., non presenta variazioni statisticamente significative nè tra controllo e trattato, nè tra primo e secondo prelievo.
Fig 25 - Potere antiossidante degli estratti idrofilici, espresso in µmol TEAC/g s.s., di frutti delle piante di pomodoro controllo e trattate sia del primo che del secondo prelievo.
6.2.2 - Potere antiossidante dell’estratto lipofilico (Fig. 26)
Il potere antiossidante dell’estratto lipofilico mostra valori compresi tra 4,1 e 5,6 µmol TEAC/g s.s. In particolare non si notano variazioni significative tra controllo e trattato di ciascun prelievo. Nel primo prelievo, infatti, i valori passano da 5,6 µmol TEAC/ g s.s. per il controllo a 4,6 µmol TEAC/ g s.s. per il trattato, senza
tuttavia differenze significative. Analoga situazione si rileva al secondo prelievo per il quale i valori si aggirano intorno a 4 µmol TEAC/ g s.s.
Fig 26 - Potere antiossidante dell’estratto lipofilico, espresso in µmol TEAC/g s.s., di frutti delle piante di pomodoro controllo e trattate del primo e del secondo prelievo.
6.2.3 – Ascorbato (Fig. 27)
Anche nei frutti sono stati determinati i valori dell’ascorbato totale (AsA + DHA), dell’ascorbato ridotto (AsA), calcolando, quindi, il rapporto tra ridotto e ossidato (AsA/DHA).
Per quanto riguarda l’ascorbato totale e l’ascorbato ridotto non è stata evidenziata alcuna differenza significativa in alcuno dei casi analizzati. La concentrazione di ascorbato totale non si discosta molto dalle 16 µmol/g s.s., mentre il contenuto di AsA si mantiene su valori di 12,5-13 µmol/g s.s., indipendentemente dal trattamento e dal prelievo.
Al contrario, una notevole differenza è stata riscontrata nel rapporto AsA/DHA tra il controllo e il trattato della prima raccolta, essendo quest’ultimo circa il quadruplo del controllo (4,18 – 16,70). Questa differenza non si ha invece nei campioni raccolti successivamente, nei quali non esiste alcuna variazione significativa (3,1-2,73).
Fig 27 - Concentrazioni di ascorbato totale (AsA + DHA) e ascorbato ridotto (AsA), espresse in µmol/g s.s., e rapporto tra ascorbato ridotto e ossidato (AsA/DHA), di frutti di piante di pomodoro controllo e trattate alla prima e alla seconda raccolta.
6.2.4 – Fenoli (Fig. 28)
Le concentrazioni dei fenoli totali, determinati sull’estratto idrofilico ed espressi in mg GAE/g s.s., si aggirano intorno a 0,5 mg GAE/g s.s. nel primo prelievo e 0,60 e 0,49 nel secondo.
Fig 28 - Contenuto di fenoli totali nei frutti di piante di pomodoro controllo e trattate del primo e del secondo prelievo.
6.2.5 – Tocoferoli (Fig. 29)
Con questa determinazione sono state rilevate separatamente le concentrazioni delle principali forme di tocoferoli: α-, δ-, γ-tocoferolo.
Le analisi hanno mostrato che la forma maggiormente presente è indubbiamente l’α-tocoferolo con concentrazioni comprese tra 20 e 30 µg/g s.s. Si ha anche un buon contenuto di γ-tocoferolo (> di 10 µg/g s.s.), mentre del δ-tocoferolo se ne trovano solo tracce in quanto la sua concentrazione non raggiunge mai nemmeno 1 µg.
In generale non si sono osservate variazioni rimarchevoli tra controllo e trattato in riferimento a nessuna delle varie forme. Lo stesso si può dire in relazione ai diversi prelievi.
Fig 29 - Concentrazioni di α-, δ-, γ-tocoferolo, espresse in µg/g s.s., nei frutti di piante di pomodoro controllo e trattate del primo e del secondo prelievo.
6.2.6 – Licopene (Fig. 30)
I valori di licopene riscontrati nei frutti delle piante controllo pari a 0,92 e 1,06 mg/g s.s., risultano costanti senza risentire dell’età della pianta.
I contenuti di licopene dei frutti trattati, pur differenti tra primo e secondo prelievo (0,90 e 0,64 mg/g s.s.), non lo sono significativamente.
Fig 30 - Concentrazione del licopene (mg/g s.s.) nei frutti di piante di pomodoro controllo e trattate della prima e della seconda raccolta.
