1.2. Meccanismi di silenziamento di un gene mediati da RNAi ...5

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Indice

1. RNAi: PRINCIPI E MECCANISMI ...2

1.1. Introduzione ...2

1.2. Meccanismi di silenziamento di un gene mediati da RNAi ...5

1.2.1. Silenziamento di un gene a livello post-trascrizionale tramite siRNA ...7

1.2.2. La via dei microRNA...10

1.2.3. Silenziamento di un gene a livello trascrizionale ad opera di siRNA ...13

1.3. Progettazione di potenti inneschi di RNAi ...14

1.3.1. Veicolazione di siRNA ...14

1.3.2. shRNA espressi ...17

2. PROBLEMATICHE RELATIVE ALL’USO DI RNA

...19

2.1. Problematiche relative ad effetti collaterali dannosi e loro eliminazione ...19

2.1.1. Effetti al di fuori del bersaglio dipendenti dalla sequenza di base ...19

2.1.2. Evitare la risposta dell’interferone ...20

2.1.3. Prevenzione della saturazione delle vie di silenziamento endogene ...23

2.2. Problematiche relative alla veicolazione in vivo...25

2.2.1. Veicolazione con agenti non virali di agenti che inducono RNAi...25

2.2.1.1. Modificazioni chimiche volte ad aumentare la stabilità di siRNA ...26

2.2.1.2. Veicolazione sistemica non selettiva di siRNA ...27

2.2.1.3. Veicolazione sistemica selettiva di siRNA ...32

2.2.2. Veicolazione mediante virus di agenti che inducono RNAi ...36

3. APPLICAZIONI TERAPEUTICHE ...42

Specifiche applicazioni terapeutiche di RNAi...44

3.1. Malattie genetiche e neurodegenerative ...44

3.2. Malattie virali...47

3.3. Malattie oculari: RNAi e il trattamento della AMD ...54

3.4. Cancro ...55

CONCLUSIONI E SVILUPPI FUTURI ...57

BIBLIOGRAFIA ...61