Alterazione dello stato replicativo in loci del cromosoma 13q frequentemente deleti nel Mieloma Multliplo

(1)

1

Mieloma multiplo

1. 1

Descrizione 1

1. 2

Sviluppo delle plasma cellule normali 2

1. 3 Le cellule B del centro follicolare sono le cellule di origine 3

2

Rilevanza patogenetica delle anomalie cromosomiche 4

2. 1 Modello genetico di mielomagenesi 5

2. 2 Traslocazioni nel locus delle IgH 6

3 Monosomia 13/ delezione 13q (-13/ 13q-)

3. 1 Incidenza biologica 9

3. 2 Regione minima deleta in 13q14 11

4 Asincronismo replicativo

4. 1 Meccanismi epigenetici di modificazione del DNA 14 4. 2 Controllo temporale della replicazione ed espressione genica 16

4. 3 Asincronismo replicativo 17

5 Scopo della tesi 20

6 Materiali e metodi

6. 1 Materiale utilizzato 22

6. 2 Analisi microscopica e statistica dei dati 24 6. 3 Ibridazione In Situ Fluorescente (FISH) 24

6. 3.1 Protocollo FISH 26

6. 4 Demetilazione del DNA ed iperacetilazione degli istoni 27

6. 5 Allestimento dei preparati cromosomici 28

7 Risultati e discussione

7. 1 Asincronismo replicativo dei singoli loci 29

7. 1.1 Variazione del tempo di replicazione 32

(2)

7. 1.2 FISH dual-color (RB1e 13q34) 34 7. 2 Effetto dei trattamenti con 5-aza-2'- deoxycitidina e

tricostatina A su asincronosmo e tempo di replicazione 37 7. 2.1 Effetto dei trattamenti con 5-aza-2'- deoxycitidina e

tricostatina A: analisi con FISH dual-color (RB1 e 13q34) 40

8 Conclusioni 45

9 Rifferimenti bibliografici 48