C onc e n tr a z ione A A (% de l te m po 0 )

50 75 100

0 30 60 90 120

Tempo di incubazione (min)

C onc e n tr a z ione A A (% de l te m po 0 )

0 25 50 75 100

0 30 60 90 120

Tempo di incubazione (min)

C onc e n tr a z ione A A (% de l te m po 0 )

**

* *

* ***

( ○ ) Tf + Gly-Gly ( □ ) Tf + Gly-Gly + GSH (

) Tf + Gly-Gly + GSH + GGT

( ○ ) Ft + Gly-Gly + GSH (

) Ft + Gly-Gly + GSH + GGT

A B

Figura 4.3 Effetto della olo-transferrina (Tf) e della ferritina (Ft) sull’ossidazione dell’AA mediata dalla GGT. Le incubazioni (volume finale 2 ml) sono state effettuate in TRIS-HCl 100 mM, pH 7,4 a 37°C e contenevano AA (0,5 mM), GSH (0,5 mM), Gly-Gly (20 mM) e GGT purificata (100 mU/ml) dove indicato. Prima di essere usate, la olo-transferrina e la ferritina sono state purificate mediante passaggio attraverso una colonna di Chelex-100 allo scopo di rimuovere il Fe ³⁺ legato in modo aspecifico. Le reazioni sono state fatte partire aggiungendo (A) olotransferrina (5 µM) o (B) ferritina (1 µM).

I risultati sono la media ± d.s. di tre determinazioni indipendenti. I dati sono stati analizzati mediante il test di analisi della varianza a due vie. (*) p < 0,05 confrontato con “Tf + Gly-Gly + GSH”; (**) p < 0,05 confrontato con “GSH + Gly-Gly + Ft”;

(***) p < 0,001 confrontato con “GSH + Gly-Gly + Ft”.

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