I
RIASSUNTO
Il tumore al polmone rappresenta la causa di morte più comune per cancro, soprattutto tra gli individui di sesso maschile. Si registrano annualmente nel mondo circa 900.000 nuovi casi tra gli uomini e circa 330.000 tra le donne, con un tasso di mortalità del 90% entro 5 anni.
Nonostante il fumo di tabacco sia considerato il principale fattore eziologico di questa patologia, soltanto il 15% dei fumatori la sviluppa entro i 75 anni di età. E' allora possibile ipotizzare che contribuiscano alla cancerogenesi del polmone quei geni che svolgono un ruolo chiave in processi cellulari determinanti, come il controllo del ciclo cellulare e il metabolismo degli xenobiotici.
In questo lavoro di tesi abbiamo preso in considerazione un polimorfismo nel gene Glutatatione S-transferasi T1 (GSTT1), uno nel gene Glutatione S-transferasi M1 (GSTM1) e un terzo nel gene TP53. I geni GSTT1 e GSTM1 appartengono alla famiglia delle glutatione S-transferasi e codificano per enzimi di Fase II, coinvolti nei processi di detossificazione dei metaboliti del tabacco. Il prodotto del gene TP53, invece, è una proteina che agisce da soppressore tumorale, inibendo la proliferazione cellulare e controllando il processo di apoptosi.
Tra i vari polimorfismi di TP53 abbiamo rivolto la nostra attenzione su p53PIN3 che corrisponde ad un'inserzione/duplicazione di 16pb nell'introne 3, mentre i polimorfismi di GSTT1 e GSTM1 consistono in una delezione in una parte codificante del gene con conseguente assenza di attività enzimatica.
Attraverso uno studio caso-controllo comprendente 763 individui di origine norvegese (379 casi e 384 controlli) è stata esaminata l'associazione tra le varianti genotipiche di questi tre geni e il rischio di cancro al polmone. La popolazione dei controlli è appaiata per frequenza per abitudine al fumo, sesso e età con quella dei casi.
II
La genotipizzazione è stata effettuata tramite PCR multiplex e successiva corsa elettroforetica.
Dai dati, ricavati da un'analisi di regressione logistica multivariata, sembra che il gene TP53 sia associato ad un aumento del rischio di sviluppare la patologia polmonare, ma l’associazione non appare significativa. Abbiamo calcolato un Odds ratio (OR) grezzo di 1.76 (95% CI 0.72-4.32) e un OR aggiustato per età, genere e fumo di 1.39 (95% CI 0.37-5.29).
Per i geni GSTT1 e GSTM1 non è invece stata trovata alcuna associazione. Per il gene GSTT1 è stato calcolato un OR grezzo di 1.00 (95% CI 0.67-1.50) e un OR aggiustato per età, genere e fumo di 1.11 (95% CI 0.61-2.04). Per il gene GSTM1 l’OR grezzo calcolato è di 0.89 (95% CI 0.64-1.23), mentre l’OR aggiustato per età, genere e fumo è di 0.97 (95% CI 0.59-1.60).
III
ABSTRACT
Lung cancer is the major cause of death from cancer, particularly amongst men. It now accounts for an estimated 900000 new cases each year among men and 330000 among women, with an approximately 90% of mortality in 5 years.
While it is apparent that lung cancer is predominantly caused by exposure to tobacco products, only 15% of lifelong smokers will develop a lung cancer by the age of 75. Because of this, it’s possible that lung carcinogenesis is due also to genes involved in important cellular processes such as cell cycle control and metabolism of xenobiotics. In this study we examined GSTT1, GSTM1 and TP53 polymorphisms. GSTT1 and GSTM1 genes belong to the Glutathione-S- transferase family and produce Phase II enzymes, involved in tobacco metabolites detoxification. The TP53 gene product is the P53 protein, a tumour suppressor that inhibits cell proliferation and controls the apoptosis process.
Among TP53 polymorphisms we focused on p53PIN3, a 16 bp insertion within intron 3, while GSTT1 and GSTM1 polymorphisms consist in homozygous gene deletion with consequent lack of enzyme expression. The association of the 3 polymorphisms and lung cancer risk has been studied in a case-control study including 763 individuals of Norwegian origin (379 cases and 384 controls). All the controls were matched with cases for smoking habit, sex, and age. The genotyping was carried out by multiplex PCR and electrophoresis. The multivariate logistic analysis shows a no-significant association between p53PIN3 and lung cancer risk. We calculated an unadjusted Odds ratio (OR) of 1.76 (95% CI 0.72-4.32) and an OR adjusted for age, sex and cumulative smoking dose (pack-years) of 1.39 (95% CI 0.37-5.29).
We didn’t find any association between GSTT1 and GSTM1 polymorphisms and lung cancer risk. For GSTT1 gene has been calculated an unadjusted OR of 1.00 (95% CI
IV
0.67-1.50) and an OR adjusted for age, sex and pack-years of 1.11 (95% CI 0.61-2.04). For GSTM1 gene we calculated an unadjusted OR of 0.89 (95% CI 0.64-1.23), while the OR adjusted for age, sex and pack-years is 0.97 (95% CI 0.59-1.60).
V
INDICE
Capitolo 1
Introduzione……….1
1.1) Il tumore al polmone………..1
1.2) Istologia del tumore al polmone………1
1.3) Epidemiologia del tumore al polmone………..3
1.4) Agenti cancerogeni……….6
1.5) Rischio di tumore al polmone in base al sesso…………...12
1.6) Suscettibilità genetica per il cancro al polmone…………12
1.7) Geni selezionati……….13
1.8) Geni metabolici……….14
1.9) Geni del ciclo cellulare……….17
1.10) Effetto delle combinazioni genotipiche………..20
Capitolo 2
Scopo della tesi………...22
Capitolo 3
Materiali e metodi……….23
3.1) Popolazione in studio………23
VI
