Riassunto
Le colture di cellule staminali mesenchimali da sangue di cordone ombelicale vengono ottenute in condizioni di tensione di ossigeno e concentrazione di tioli nel terreno di coltura che potenzialmente causano un potente stress ossidativo.
Lo scopo della presente tesi è stato quello di:
- Verificare, nelle cellule del sangue di cordone ombelicale, la possibilità di associare l’immunofenotipizzazione alla determinazione del contenuto intracellulare di glutatione (GSH).
- Verificare la presenza della gamma-glutamiltranspeptidasi (GGT), un enzima in grado di orientare in senso pro-ossidante o anti-ossidante il catabolismo extracellulare del GSH.
- Fornire informazioni preliminari sull’influenza della tensione di ossigeno sul metabolismo dei tioli a basso peso molecolare in coltura.
I risultati hanno dimostrato che le colture cellulari da sangue di
cordone ombelicale contengono cellule con diversa attività di GGT, e
che tale enzima è presente anche in elementi cellulari che compaiono
nelle fasi precoci delle colture di cellule mesenchimali staminali. Sia il
GSH che la cisteinilglicina (prodotto dell’idrolisi del GSH da parte della GGT) sono presenti nel terreno condizionato dalle colture di cellule da sangue di cordone ombelicale, e la loro concentrazione sembra modificarsi secondo la tensione di ossigeno. La determinazione del GSH su singola cellula attraverso l’uso del reattivo fluorescente CMFDA, associata all’immunofenotipizzazione con anticorpi fluorescenti, potrebbe consentire di studiare nel dettaglio i meccanismi di redox regulation nel corso del differenziamento delle cellule staminali del sangue di cordne ombelicale.
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