Indice
Ringraziamenti………. i Abbreviazioni………pg 1 Abstract………...pg 6 Aim………..pg 7 Introduzione
1. Fibrinogeno………pg 8 1.1 Sintesi del fibrinogeno
1.2 Distribuzione e metabolismo del fibrinogeno 1.3 Struttura della molecola del fibrinogeno
1.3.1 Struttura della molecola alla microscopia elettronica 1.3.2 Analisi cristallografica della molecola del fibrinogeno 1.4 Formazione del coagulo
1.4.1 Azione della trombina sul fibrinogeno 1.4.2 Fibrinopeptidi
1.4.3 Assemblamento delle molecole di fibrina 1.4.4 Il fenomeno del cross-linking
1.5 Siti attivi di legame sul fibrinogeno e fibrina
2. Disfibrinogenemie………pg 21 2.1 Disfibrinogenemie congenite
2.2 Disfibrinogenemie acquisite
2.3 Test laboratoristici per lo studio del fibrinogeno 2.3.1 Tempo di trombina
2.3.2 Tempo di reptilase
2.3.3 Misurazione dei livelli di fibrinogeno nel plasma (metodo di Clauss e metodo immunologico)
2.3.4 TT 1:1 mixing study
3. Gammopatie monoclonali………pg 26 3.1 Immunoglobuline
3.1.1 Struttura delle Immunoglobuline 3.1.2 Sintesi delle Immunoglobuline
3.2 Classificazione e diagnosi delle gammopatie monoclonali
3.2.1 Inquadramento nosologico delle gammopatie monoclonali 3.2.2 Iter diagnostico delle gammopatie monoclonali
3.3 Gestione clinica delle gammopatie monoclonali (MGUS e SMM)
Materiali e metodi
1. Esami coagulativi………pg 36 1.1 Dosaggio del Fibrinogeno secondo Clauss
1.2 Tempo di trombina
1.3 Dosaggi del fibrinogeno del paziente P.L. in un mixing test 1:1 con aggiunta di pool di plasma normale a tempi diversi e temperature diverse.
1.4 Prove di mixing dopo purificazione del Fg
2. Studio morfologico del midollo………pg 38 2.1 Aspirato midollare
2.2 Biopsia osteomidollare
2.3 Studio citofluorimetrico del midollo
3. Studio biologia molecolare con tecnica PCR………pg 40 4. Elettroforesi delle proteine e immunofissazione……….pg 42 5. Dosaggio delle catene leggere libere………pg 43 6. Caratteristiche paziente P.L. e gruppo di controllo………..pg 44
6.1 Caratteristiche del paziente P.L.
6.2 Caratteristiche del gruppo di controllo
Risultati
1. Esami coagulativi………...pg 47 1.1 Dosaggio del Fibrinogeno secondo Clauss e Tempo di trombina TT
1.2 Dosaggi del fibrinogeno del paziente P.L. in un mixing test 1:1 con aggiunta di pool di plasma normale (PPN) a tempi diversi e temperature diverse
1.3 Prove di mixing dopo purificazione del Fg
1.3.1 Prove di mixing su Fg purificato PPN (Fg 292) e Fg purificato del pz P.L. su prelievo del 6/4 (Fg non dosabile) a diverse diluizioni 1.3.2 Prove di mix su plasma del pz P.L. del 6/4 (Fg inc) con fibrinogeno purificato PPN (Fg = 292 mg/dl)
1.3.3 Prove di mixing tra Fg purificato PPN e Fg purificato dei 4 campioni di controllo patologico
2. Studio morfologico del midollo………..pg 53 2.1 Aspirato midollare
2.2 Biopsia osteomidollare
2.3 Studio citofluorimetrico del midollo e biologia molecolare con PCR
3. Elettroforesi delle proteine e immunofissazione………pg 60 3.1 Immunofissazione proteine pz P.L. su siero, urine, plasma in date diverse
3.2 Immunofissazione proteine dei campioni di controllo con TT allungato su siero e plasma
4. Dosaggio delle catene leggere libere………..pg 68 4.1 Dosaggio FLC pz PL
4.2 Dosaggio FLC controlli con MM
Conclusioni………pg 71 Bibliografia………pg 74
