DETERMINAZIONE DEGLI ESCHERICHIA COLI β GLUCORONIDASI POSITIVI CON IL
METODO ISO 16.649-1 / 2001
Il metodo permette di contare il numero delle colonie di Escherichia coli cresciute su una membrana posta sul terreno colturale agarizzato addizionato con sostanze cromogene.
Il metodo risulta particolarmente idoneo all’analisi di acque superficiali dolci o marine e di acque reflue.
Terreno di coltura utilizzato: Tryptone Bile X-Glucoronide Agar (TBX) Principio del metodo.
Un’aliquota del campione o una sua diluizione è filtrata attraverso la membrana di esteri di cellulosa con pori pari a 0,45 µm di diametro.
Si pone la membrana sulla superficie del substrato di isolamento. Dopo un periodo di incubazione di 18-24 ore a 44°C si procede alla lettura dei risultati.
Il composto cromogenico X-Gluc, incorporato nel terreno, viene idrolizzato dall’enzima β- glucoronidasi dell’ Escherichia coli, che produce colonie di colore blu-verde.
Gli Enterobatteri β negativi coltivano con colonie incolori.
TBX agar
E. coli: colonie blu-verdi.
I risultati sono espressi come Unità Formanti Colonie (UFC) per 100 mL di campione.
Si considerano le piastre contenenti un numero di colonie comprese tra 30 e 300.
