6.2 Risultati dell’analisi immunoistochimica.
OVERALL SURVIVAL
Vivi 13 (86,7%) 11 (84,6%) 4 (33,4%) 0,004 Deceduti 2 (13,3%) 2 (15,4%) 8 (66,6%) CARCINOMI, n (%)
7.0 - Discussione
Sia PTEN che le E-caderine, come è già stato detto nei capitoli precedenti rivestono un ruolo oncosoppressivo molto importante.
Come per i carcinomi complessi, anche negli adenomi l’espressione delle due proteine è statisticamente significativa e correlata allo sviluppo di tumori benigni o scarsamente aggressivi (Asproni et al. 2015).
Come è già noto in letteratura (Ressel et al. 2009), in questo studio PTEN risulta legato a caratteristiche istopatologiche e cliniche comunemente associate ad una prognosi favorevole, come l’assenza di invasione linfatica, istotipo complesso e quindi anche ad una sopravvivenza maggiore.
Per quanto riguarda invece il ruolo delle E-caderine esistono delle discrepanze nella letteratura scientifica. Alcuni autori ritengono che questa sia legata all’invasione linfatica, ad un più intenso tasso di proliferazione cellulare e ad un tasso di mortalità più alto (Gama et al 2008, Nowak et al 2007, Restucci et al 2007, Torres et al 2005); mentre altri ritengono che la correlazione tra l’espressione di questa proteina, il tasso di proliferazione cellulare e la sopravvivenza dei soggetti non sia verificabile statisticamente (Brunetti et al 2003, 2005, De Matos et al 2007, Nowak et al 2008); probabilmente questo potrebbe essere dovuto a un diverso sistema di classificazione dei casi positivi dei diversi autori; infatti la maggior parte di essi, ad eccezione di Gama e colleghi (2008) e di Brunetti e colleghi (2005), utilizzano un sistema di classificazione semiquantitativo che considera sia la localizzazione delle proteine che la loro percentuale di espressione.
Nel capitolo precedente, in particolare nella tabella 8, è stato possibile evidenziare la correlazione statistica tra la ridotta espressione di queste proteine e lo sviluppo di tumori semplici e quindi più aggressivi.
Il modo in cui queste due proteine interagiscano tra loro non è del tutto chiaro, però, come proposto da Fournier et al (2009), le E-caderine mediano l’accumulo a livello citoplasmatico di PTEN causando l’arresto della morfogenesi acinare nelle cellule epiteliali mammarie. Inoltre l’adesione cellulare mediata da queste proteine previene la proteolisi di PTEN e quindi ne promuovono l’accumulo nel cancro al seno (Li et al, 2007).
Altri report suggeriscono invece che PTEN, inibendo la via PI3K/AKT/mTOR, sia essenziale per evitare il passaggio da E ad N-caderine, e stabilizzare quindi le giunzioni intercellulari, evento molto comune nel caso di melanomi e cancro alla prostata (Kotelevets et al, 2001; Hao et al, 2012). L’ espressione delle N-caderine è fortemente correlata con la capacità invasiva del tumore (Rieger-Christ et al, 2004) e la sua fosforilazione promuove il disassemblamento delle giunzioni cellulari.
Quiao e colleghi nel 2008 offrono una visione d’insieme, proponendo un meccanismo circolare dove l’attivazione di AKT regola la trascrizione e la stabilizzazione di SNAIL, una proteina coinvolta nella EMT; questa può inibire l’espressione dei geni delle E-caderine e regolare altre proteine come la metalloproteina 14 della matrice, la vinculina e le N-caderine. Nel complex adherens PTEN si trova legato ad una proteina, chiamata MAGI-2, che ne previene la proteolisi; alterazioni di questo complesso, come ad esempio la modificazione delle E-caderine o delle vinculine, causano la distruzione della connessione tra MAGI-2 e PTEN, portando al rilascio di quest’ultimo nel citoplasma e alla sua degradazione.
Il fatto che dai risultati non ci siano evidenze di campioni PTEN-/E-cad+, che tutti i campioni E-cad- siano anche PTEN- e che invece esista un gruppo PTEN+/E-cad- ci porterebbe a pensare che l’influenza che PTEN ha sull’espressione delle E-caderine sia preponderante rispetto all’importanza che le molecole di adesione hanno sull’enzima (Asproni et al. 2015).
Inoltre l’enzima è espresso nel 70% dei carcinomi; questi dati sono comprabili a quelli riportati in letteratura, dove un ridotto livello di questa proteina è associato comunemente allo sviluppo di carcinomi piuttosto che di adenomi (Kanae et al, 2006; Qiu et al, 2008; Ressel et al, 2009; Asproni et al, 2015).
Non esiste alcuna differenza statisticamente significativa tra il gruppo PTEN+/E- cad+ e PTEN+/E-cad-, infatti entrambi sono caratterizzati da uno stesso numero di campioni WDC e dallo stesso quantitativo di soggetti senza invasione dei vasi linfatici. Si può notare, però, come nel gruppo PTEN+/E-cad+ il numero dei casi si distribuisca in modo leggermente diverso rispetto al secondo suggerendo la tendenza dei tumori con questo fenotipo ad essere correlati alla formazione di tumori complessi e ad un indice mitotico sotto la media.
Infatti per quanto riguarda invece la morfologia dei tumori, risulta che 6 soggetti hanno un carcinoma di tipo semplice (2 in meno rispetto al gruppo PTEN+/E-cad-) e 10 di tipo complesso (il doppio rispetto al gruppo PTEN+/E-cad-). I soggetti con indice mitotico superiore alla media sono 5, due in meno rispetto al gruppo positivo solo per l’enzima (7 soggetti) e i casi con indice mitotico sotto la media nel gruppo positivo ad entrambi i marker si tratta di 10 soggetti mentre nel gruppo positivo solo per PTEN sono 6.
Questa distribuzione eterogenea dei casi potrebbe essere dovuta al fatto che l’anticorpo anti PTEN utilizzato per l’analisi IHC si lega a tutte le forme dell’enzima, anche quelle fosforilate che possono localizzarsi in diversi distretti cellulari.
Recenti studi evidenziano come la fosforilazione di PTEN ne indebolisca l’attività ed essere quindi collegata a cambiamenti maligni (Roy e Dittmer 2011; Yang et al, 2013) o alla riduzione dei suoi effetti biologici (Torres et al, 2005).
Comunque le forme fosforilate di PTEN sono numerose e non completamente caratterizzate, per cui è necessario condurre altre indagini scientifiche per confermare questa ipotesi.
Inoltre il valore cut-off scelto per le E-caderine è più alto rispetto agli studi che hanno utilizzato una valutazione semiquantitativa (che consideravano il 75% della colorazione come valore massimo), questo risulta ovviamente in una più bassa percentuale di casi ritenuti positivi per le E-caderine.
8.0 - Conclusioni
Questo studio conferma il forte coinvolgimento della via PTEN/AKT nel comportamento dei tumori, la correlazione tra l’assenza dei due marker, l’espressione di una morfologia tumorale complessa e una ridotta sopravvivenza. In più documenta anche come PTEN sia correlato ad un indice mitotico inferiore alla media, ad una maggior sopravvivenza e all’espressione delle E-caderine; esso infatti è la proteina regolatrice più importante di questa via e la sua riduzione è associata al peggioramento della patologia; il ruolo decisivo di PTEN, infatti è di limitare la progressione tumorale, come ampiamente dimostrato in medicina umana (Bose et al, 2002; Perren et al, 1999; Tsutsui et al, 2005).
Le E-caderine sono invece correlate alla crescita di adenomi e, nel caso dei carcinomi ad un istotipo complesso.
La valutazione di questi marker possiede anche un’importanza prognostica, in quanto la contemporanea mancata espressione di questi è correlata alle caratteristiche clinico-istopatologiche di malignità, in particolare ad un istotipo semplice ed a una ridotta sopravvivenza.
9.0- Bibliografia
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