Discussioni
La prevalenza della giardiasi si è rivelata essere pari al 34.04%. una prevalenza così elevata potrebbe essere correlata alla popolazione considerata, composta da cani malati tutti affetti da enteropatia cronica.
Per quanto riguarda le razze incluse nel nostro studio e maggiormente rappresentate abbiamo riscontrato una prevalenza doppia in boxer (3.34%) e pastore tedesco (3.44%) rispetto a chihuahua (1.08%) e meticci (1.62%) di presentare enteropatie croniche.
Mentre considerata la positività per Giardia e la prevalenza di razza rispetto ai cani afferiti nello stesso periodo in ospedale, si ottengono risultati del: 2.5% per il pastore tedesco, 0.2% per i meticci, mentre le prevalenze più alte si riscontrano per il kurzhaar (20%) e il weimaraner (9%).
Nonostante notoriamente gli animali giovani siano più a rischio di mostrare segni clinici di malattia 5, nella nostra popolazione l’età media è risultata essere di 5.3 anni nei soggetti con giardiasi e solo tre cani avevano età inferiore ad un anno. Anche se non è stato possibile effettuare nessun tipo di analisi statistica dei dati abbiamo notato che in questi soggetti non sembra esserci alcuna tendenza ad avere una sintomatologia più grave nonostante la giovane età.
Per quanto riguarda i dati riportati in letteratura in relazione alla popolazione di partenza, nello studio di Epe et al. che ha coinvolto 8685 cani provenienti da diversi paesi europei, è stata osservata una prevalenza della giardiasi del 28.04% nei soggetti sintomatici con diarrea cronica, in totale 2211 cani. 28
Un altro studio, a Londra, ha valutato la prevalenza di Giardia in cani con alterata consistenza delle feci che si è rivelata essere del 10,32%. 48
In entrambi i casi, è stato utilizzato un kit Elisa per la diagnosi, come nel nostro studio ma la nostra prevalenza è superiore rispetto a questi dati riportati in letteratura. Se confrontiamo però questo risultato con quello della popolazione di cani non solo
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enteropatici dell’ospedale, che è risultata essere del 16.94%, possiamo osservare una riduzione notevole della percentuale.
Tra i 30/177 soggetti testati e risultati positivi al test per Giardia, il 26% non presentava sintomi gastroenterici, mentre il 20% mostrava una sintomatologia acuta. Il 53.33% dei cani mostrava invece una sintomatologia cronica e rappresentano i soggetti inclusi nel nostro studio. La più elevata percentuale di soggetti infetti riscontrata in quest’ultimo caso, potrebbe indicare da un lato che le infezioni sostenute da Giardia possano rappresentare un cofattore importante nell’insorgenza dell’enteropatia cronica oppure, dall’altro lato, che i soggetti con enteropatia cronica siano maggiormente predisposti alle infezioni sostenute da Giardia, probabilmente a causa delle minori capacità di difesa locali e generali di questi animali.
La prevalenza della giardiasi inoltre varia molto anche in funzione della tecnica diagnostica utilizzata, proprio perché sono diverse la specificità e la sensibilità dei diversi test.
In Italia, in particolare, uno studio del 2014 in Sardegna, che ha effettuato diagnosi microscopica con l’utilizzo del ZnSO4 ha riportato valori del 26.3% (Pipia et al., 2014) in
una popolazione mista di soggetti, sia di proprietà che di canili, con una prevalenza maggiore in quest’ultimo caso. Un altro lavoro ancora, svolto nel centro Italia sempre su una popolazione mista ha utilizzato una tecnica di centrifugazione in gradiente di saccarosio e la prevalenza è stata dell’8,2% (Paoletti et al., 2015). In Veneto la prevalenza è stata del 58% in uno studio effettuato su cani proveniente dai canili, utilizzando la RT – PCR (Simonato et al., 2015). Uno studio che ha impiegato il kit Elisa IDEXX su 143 campioni fecali raccolti in un’area urbana ha mostrato una prevalenza del 28% (Papini et al.,2013) e lo studio di Epe, sopra citato, ha riportato per l’Italia valori di prevalenza del 17,71 % (Epe et al., 2010).
Infine uno studio in Lombardia ha ottenuto una prevalenza media del 20,67% utilizzando il kit ELISA Rida Quick (cassette, R-Biopharm). 118
I nostri risultati sono in accordo con i dati riportati in letteratura che fanno riferimento all’uso di kit ELISA, anche se più bassi rispetto, ad esempio, ai tassi riportati nello studio in Lombardia (nonostante in entrambi i casi si tratti di soggetti di proprietà e non di soli soggetti enteropatici).
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Per la diagnosi di giardiasi abbiamo utilizzato due diversi kit Elisa, mentre la flottazione è sta eseguita essenzialmente per escludere altre forme di parassitosi oltre alla giardiasi, poiché è considerata poco sensibile e richiederebbe almeno tre campioni presi in cinque giorni diversi, data l’eliminazione intermittente delle cisti. 37
I principali vantaggi dell’ELISA per la diagnosi della giardiasi canina sono la rapidità, il basso costo e l’impiego di procedure semplici senza necessità di strumentazioni speciali.
Dalla letteratura si evince una sensibilità dell'88,9% e una specificità del 95,8% del kit IDEXX, con valore predittivo positivo dell’89,6% e negativo del 95,4%.53
Il kit della Biopharm, RIDA Quick risulta avere una sensibilità del 100% rispetto alla microscopia convenzionale e una specificità del 95,2%. 107
Nel nostro lavoro, in soli 5 casi su 16 i due kit hanno dato lo stesso esito positivo, mentre i restanti 31 soggetti erano negativi ad entrambi. Nel 76.6% dei casi i kit hanno quindi portato allo stesso risultato, sia esso positivo o negativo mostrando tra loro una modesta concordanza (k = 0,32).
Per quanto riguarda la PCR, essa è stata eseguita sulle feci dei soggetti risultati positivi ad uno o entrambi i kit, nei casi in cui il materiale fecale era sufficiente, dunque in 14 casi.
È risultata positiva nel 64.28% dei casi e i risultati non sempre confermano quelli ottenuti con il kit ELISA; infatti la concordanza si è dimostrata nulla nel caso del kit IDEXX (k= 0.065) e scarsa per quello RIDA Quick (k = 0.186).
Quindi potremmo affermare che quando si ottiene un risultato negativo, con uno dei due metodi, non è detto che in realtà il soggetto non abbia un’infezione da Giardia; sarebbe quindi opportuno eseguire contestualmente altre indagini diagnostiche, o la PCR oppure un esame microscopico a fresco, magari utilizzando metodiche in fluorescenza.
Per quanto riguarda la valutazione sintomatologica dei soggetti, che rappresenta l’obiettivo centrale del nostro lavoro, tutti i cani inclusi presentavano una sintomatologia gastroenterica cronica più o meno grave, che abbiamo valutato tramite il CCECAI.
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Le co-parassitosi che si sono rilevate in tre soggetti affetti anche da giardiasi non sembrano contribuire al peggioramento della situazione gastroenterica, almeno nel nostro caso, ma in realtà poco possiamo dire a riguardo dato l’esiguo numero di soggetti co-parassitati.
Dai risultati ottenuti si può osservare come il CCECAI, il Fecal Score Index e la presenza di muco e/o sangue nelle feci, non siano nel nostro studio statisticamente associati alla presenza di Giardia. Anche per quanto riguarda l’inquadramento patogenetico retrospettivo delle enteropatie croniche e la presenza di PLE non sono state riscontrate differenze significative tra i due gruppi, quindi possiamo dire che la giardiasi non sembra essere in relazione al tipo di enteropatia ma si ritrova più o meno ugualmente rappresentata in tutti e tre i tipi.
In letteratura non sono presenti, a nostra conoscenza, studi che indaghino nello specifico l’eventuale correlazione tra la clinica gastroenterica del cane e la presenza di malattia, gli unici lavori che valutano la sintomatologia si limitano a considerare la consistenza fecale e la presenza del segno clinico della diarrea. 48,116
In letteratura numerosi studi hanno analizzato il potenziale ruolo patogeno di Giardia e dai risultati ottenuti nel nostro lavoro su una popolazione di cani enteropatici cronici si evince che la presenza del protozoo non sembra essere associata a specifiche condizioni cliniche gastroenteriche o a sintomatologia grave.
Questo risultato ci induce ad una maggiore cautela nel considerare Giardia come causa unica di enteropatia quando si evidenzia una positività diagnostica ed a prendere in considerazione anche altri fattori patogenetici.
In letteratura l’infezione da Giardia è spesso definita come asintomatica, subclinica, 18 oppure clinicamente evidente con forme acute e croniche, a conferma del fatto che la sua patogenicità può essere espressa maggiormente quando sono presenti altri fattori enteropatogeni, quali batteri, dieta od altri parassiti, o ancora la capacità di difesa dell’ospite e lo stress.
Per quanto riguarda gli assemblaggi, nel nostro studio abbiamo rilevato soltanto assemblaggi di tipo C e D. Importante è il fatto che non siano stati riscontrati assemblaggi zoonotici, A e B, nonostante i cani siano tutti di proprietà; infatti come
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riportano alcuni studi 30 è possibile che in questi animali, che vivono in casa e a stretto
contatto con i proprietari si possa verificare la trasmissione di assemblaggi zoonotici tra cane e uomo.
E’ emersa una maggiore percentuale dell’assemblaggio D (83,33%) rispetto al C (16,67%). In letteratura ci sono diversi studi che riportano prevalenze diverse tra i due assemblaggi, ad esempio per quanto riguarda quelli svolti in Italia, i nostri risultati sono simili ad un lavoro effettuato in Sardegna che ha riportato valori del 36.1% per l’assemblaggio C e di 49% per quello D. Nello studio di Paoletti et al., nel centro Italia invece si è riscontrata una maggiore percentuale dell’assemblaggio C rispetto al D, sia nei cani padronali che in quelli provenienti da canili.
Queste differenze potrebbero riflettere le diverse distribuzioni geografiche del parassita.
Il nostro lavoro presenta alcuni limiti, in primis il ridotto numero di casi ed il fatto che non siano state utilizzate anche tecniche di microscopia diretta.
Sarebbe stato inoltre interessante effettuare la PCR anche sui soggetti risultati negativi ad entrambi i kit ELISA, per poter eseguire un confronto tra tutte e tre le metodiche. Un altro limite è rappresentato dal fatto che non abbiamo eseguito un follow-up in cui rivalutare sia la clinica dei soggetti che la positività a Giardia dopo la terapia.
In conclusione i risultati ottenuti hanno fornito spunti interessanti riguardo la prevalenza maggiore del protozoo nelle enteropatie croniche del cane, nonostante non sia stata evidenziata alcuna relazione statistica con tutte le variabili cliniche prese in considerazione in questo studio.
Sarebbe pertanto auspicabile aumentare la casistica e utilizzare contestualmente più metodiche diagnostiche, per fare maggiormente luce su questo risultato.
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Bibliografia
1. Plutzer, J., Ongerth, J., & Karanis, P. (2010). International Journal of Hygiene andGiardia taxonomy , phylogeny and epidemiology : facts and open questions. International Journal of Hygiene and Environmental Health, 213(5), 321–333.
2. Thompson, R.C.A. and Monis, P.T. (2004) Variation in Giardia: implications for taxonomy and epidemiology. Adv. Parasitol. 58, 69–137
3. Dolezal P., Smid O., Rada P., Zubacova Z., Bursac D., Sutak R., Nebesarova J., Lithgow T., Tachezy J. (2005). Giardia mitosomes and trichomonad hydrogenosomes share a common mode of protein targeting. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 102, 10924–10929. 4. Ankarklev J., Jerlstrom-Hultqvist J., Ringqvist E., Troell K., Svard SG. (2010). Behind the
smile: cell biology and disease mechanisms of Giardia species. Nat. Rev. Microbiol. 8:413–422.
5. Greene C. E., Infectious Diseases of the Dog and Cat, 4th Edition. Elsevier Saunders, 2012.
6. Hetsko ML., McCaffery JM., Svard SG., Meng TC., Que X., Gillin FD. (1998). Cellular and transcriptional changes during excystation of Giardia lamblia in vitro. Exp. Parasitol. 88:172–183.
7. Ward, W. et al., (1997). A primitive enzyme for a primitive cell: the protease required for excystation of Giardia. Cell 89, 437–444.
8. Slavin I., Saura A., Carranza PG., Touz MC., Nores MJ., Lujan HD. (2002). Dephosphorylation of cyst wall proteins by a secreted lysosomal acid phosphatase is essential for excystation of Giardia lamblia. Mol. Biochem. Parasitol. 122:95–98. 9. Kirkpatrick CE., Farrell JP. (1984). Feline giardiasis: observations on natural and
induced infections. Am J Vet Res 45: 2182-2188.
10. Ryan-Gullahorn J. (2000). Giardia and effective cattery management for the veterinarian. Feline Pract 28:8-9.
11. Payne, P. A., & Artzer, M. (2009). The Biology and Control of Giardia spp and Tritrichomonas foetus. Veterinary Clinics of NA: Small Animal Practice, 39(6), 993– 1007.
12. Lauwaet, T., Davids, B. J., Reiner, D. S. & Gillin, F. D. (2007) Encystation of Giardia lamblia: a model for other parasites. Curr. Opin. Microbiol. 10, 554–559.
87 13. Barr SC, Bowman DD. (1994). Giardiasis in dogs and cats. Compend Contin Educ Pract
Vet 16:603-611.
14. Tumova, P., Hofstetrova, K., Nohynkova, E., Hovorka, O. & Kral, J. (2007) Cytogenetic evidence for diversity of two nuclei within a single diplomonad cell of Giardia. Chromosoma 116, 65–78.
15. Ramesh, M.A. et al. (2005) A phylogenomic inventory of meiotic genes; evidence for sex in Giardia and an early eukaryotic origin of meiosis. Curr. Biol. 15, 185–191.
16. Poxleitner, M. K. et al. (2008) Evidence for karyogamy and exchange of genetic material in the binucleate intestinal parasite Giardia intestinalis. Science 319, 1530– 1533.
17. Adam, R.D., (2001). Biology of Giardia lamblia. Clin. Microbiol. Rev. 14, 447–475. 18. Ballweber, L. R., Xiao, L., Bowman, D. D., Kahn, G., & Cama, V. A. (2010). Giardiasis in
dogs and cats: update on epidemiology and public health significance. Trends in Parasitology, 26(4), 180–189.
19. Ryan, U., Cacciò, S. M. (2013). Zoonotic potential of Giardia. International Journal for Parasitology, 43(12–13), 943–956.
20. Traub, R.J. et al. (2004) Epidemiological and molecular evidence supports the zoonotic transmission of Giardia among humans and dogs living in the same community. Parasitology 128, 253–262.
21. Eligio-Garcia, L. et al. (2008) Frequency of Giardia intestinalis assemblages isolated from dogs and humans in a community from Culiacan, Sinaloa, Mexico using beta- giardin restriction gene. Vet. Parasitol. 156, 205–209
22. Esch, K. J., Petersen, C. A. (2013). Transmission and epidemiology of zoonotic protozoal diseases of companion animals. Clinical Microbiology Reviews, 26(1), 58–85.
23. Pallant, L., Barutzki, D., Schaper, R., & Thompson, R. C. A. (2015). The epidemiology of infections with Giardia species and genotypes in well cared for dogs and cats in Germany, 1–14.
24. Blasi, M.F., Carere, M., Pompa, M.G., Rizzuto, E., Funari, E., (2008). Water-related diseases outbreaks reported in Italy. J. Wat. Health 6, 423–432.
25. Rendtorff, R.C. (1978) The experimental transmission of Giardia lamblia among volunteer subjects. In National Symposium on Waterborne Transmission of Giardiasis (Jakubowski, W. and Hoff, J.C., eds), US Environmental Protection Agency, 64–81.
88 26. Bermudez-Cruz RM, Thomas M, Alliot A, et al. (2009) Identification of Giardia genotypes in dogs from kennels and veterinarian clinics in France, in 2009 Scientific Proceedings, 3rd International Giardia and Cryptosporidium Conference. Orvieto, Italy. 27. Gates MC., Nolan TJ. (2009) Endoparasite prevalence and recurrence across different
age groups of dogs and cats. Vet Parasitol; 166:153–158.
28. Epe C, Rehkter G, Schnieder T, Lorentzen L, Kreienbrock L. Veterinary Parasitology Giardia in symptomatic dogs and cats in Europe — Results of a European study. Vet Parasitol. 2010;173(1-2):32-38.
29. Giangaspero A., F. Berrilli, and O. Brandonisio, (2007): Giardia and Cryptosporidium and public health: the epidemiological scenario from the Italian perspective. Parasitol. Res. 101, 1169–1182.
30. Yaoyu F., Xiao L. (2011) Zoonotic potential and molecular epidemiology of Giardia species and giardiasis. Clin Microbiol Rev. 2011;24(1):110-140.
31. Covacin C., Aucoin D. P., Elliot A., & Thompson R. C. A. (2011). Genotypic characterization of Giardia from domestic dogs in the USA. Veterinary Parasitology, 177(1–2), 28–32.
32. Leonhard, S., K. Pfister, P. Beelitz, C. Wielinga, and R. C. Thompson. (2007). The molecular characterization of Giardia from dogs in southern Germany. Vet. Parasitol. 150:33–38.
33. Berrilli F., D. Di Cave, C. De Liberato, A. Franco, P. Scaramozzino, and P. Orecchia. (2004). Genotype characterisation of Giardia duodenalis isolates from domestic and farm animals by SSU-rRNA gene sequencing. Vet. Parasitol. 122:193–199.
34. Claerebout, E., S. Casaert, A. C. Dalemans, N. De Wilde, B. Levecke, J. Vercruysse, and T. Geurden. (2009). Giardia and other intestinal parasites in different dog populations in Northern Belgium. Vet. Parasitol. 161:41–46.
35. Overgaauw, P. A., L. van Zutphen, D. Hoek, F. O. Yaya, J. Roelfsema, E. Pinelli, F. van Knapen, and L. M. Kortbeek. (2009). Zoonotic parasites in fecal samples and fur from dogs and cats in the Netherlands. Vet. Parasitol. 163:115–122.
36. Marangi M, Berrilli F, Otranto D, Giangaspero A. (2010) Genotyping of Giardia duodenalis among children and dogs in a closed socially deprived community from Italy. Zoonoses Public Health.;57(7-8):54-58.
37. Tangtrongsup, S., & Scorza, V. (2010). Update on the Diagnosis and Management of Giardia spp. Infections in Dogs and Cats. TCAM, 25(3), 155–162.
89 38. Robertson LJ, Hanevik K, Escobedo AA, Mørch K, Langeland N. (2010) Giardiasis–why
do the symptoms sometimes never stop?. Trends Parasitol. 26, 75–82.
39. Tysnes KR, Skancke E, Robertson LJ. (2014). Subclinical Giardia in dogs: a veterinary conundrum relevant to human infection. Trends Parasitol.;30(11):520-527.
40. Nash, T. E., Herrington, D. A., Losonsky, G. A. & Levine, M. M. (1987). Experimental human infections with Giardia lamblia. J. Infect. Dis. 156, 974–984.
41. Roxstrom-Lindquist, K., Palm, D., Reiner, D., Ringqvist, E. & Svard, S. G. (2006). Giardia immunity—an update. Trends Parasitol. 22, 26–31.
42. Panaro, M. A. et al. (2007). Caspase-dependent apoptosis of the HCT-8 epithelial cell line induced by the parasite Giardia intestinalis. FEMS Immunol. Med. Microbiol. 51, 302–309.
43. Chin AC, Teoh DA, Scott KG, Meddings JB, Macnaughton WK, Buret AG. (2002). Strain- dependent induction of enterocyte apoptosis by Giardia lamblia disrupts epithelial barrier function in a caspase-3-dependent manner. Infect. Immun. 70:3673–3680. 44. Buret, a G. (2008). Pathophysiology of enteric infections with Giardia duodenalius.
Parasite (Paris, France), 15(3), 261–5.
45. Itoh, N., Muraoka, N., Saeki, H., Aoki, M., Itagaki, T., (2005). Prevalence of Giardia intestinalis infection in dogs of breeding kennels in Japan. J. Vet. Med. Sci. 67: 717– 718.
46. Mochizuki, M., Hashimoto, M. and Ishida, T. (2001). Recent epidemiological status of canine viral enteric infections and Giardia infection in Japan. J. Vet. Med. Sci. 63: 573– 575.
47. Jacobs, S.R., Forrester, C.P., Yang, J., (2001). A survey of the prevalence of Giardia in dogs presented to Canadian veterinary practices. Can. Vet. J. 42, 45–46.
48. Upjohn M, Cobb C, Monger J, Geurden T, Claerebout E, Fox M. (2010). Prevalence, molecular typing and risk factor analysis for Giardia duodenalis infections in dogs in a central London rescue shelter. Vet Parasitol.;172(3-4):341-346.
49. Dryden MW, Payne PA, Smith V. (2006). Accurate diagnosis of Giardia spp. and proper fecal examination procedures. Vet Ther 7:4-14.
50. Companion Animal Parasite Council. (2013)
51. Payne PA, Ridley RK, Dryden MW. (2002). Efficacy of a combination febantel- praziquantel-pyrantel product, with or without vaccination with a commercial Giardia
90 vaccine, for treatment of dogs with naturally occurring giardiasis. J Am Vet Med Assoc 220:330-333.
52. Cirak VY, Bauer C. (2004). Comparison of conventional coproscopical methods and commercially coproantigen ELISA kits for the detection of Giardia and Cryptosporidium infections in dogs and cats. Berl Munch Tierarztl Wochenschr 117:410-413.
53. Papini R., Carreras G., Marangi M., Mancianti F., Giangaspero A. (2013). Use of a commercial enzyme-linked immunosorbent assay for rapid detection of Giardia duodenalis in dog stools in the environment: a Bayesian evaluation. J Vet Diagn Invest. 2013 May;25(3):418-22.
54. Cacciò SM, Ryan U. (2008). Molecular epidemiology of giardiasis. Mol Biochem Parasitol 160:75-80.
55. Miller KM, Sterling CR. (2007). Sensitivity of nested PCR in the detection of low numbers of Giardia lamblia cysts. Appl Environ Microbiol.;73(18):5949-5950.
56. Monis, P.T. et al. (1999). Molecular systematics of the parasitic protozoan Giardia intestinalis. Mol. Biol. Evol. 16, 1135–1144.
57. Lalle M., Jimenez-Cardosa E., Caccio S.M., Pozio E., (2005). Genotyping of Giardia duodenalis from humans and dogs from Mexico using a beta-giardin nested polymerase chain reaction assay. J. Parasitol. 91, 203–205.
58. Tan, L., Wu, S., Abdullahi, A. Y., Yu, X., & Hu, W. (2016). PCR-RFLP method to detect zoonotic and host-specific Giardia duodenalis assemblages in dog fecal samples. Parasitology Research, 2045–2050.
59. A. Scialpi, A. Mengoni. (2008). La PCR e le sue varianti. Quaderno di laboratorio. Firenze University Press.
60. Hawrelak J. (2003). Giardiasis: pathophysiology and management. Alternat Med Rev 8:129-142.
61. Barr SC, Bowman DD, Heller RL. (1994). Efficacy of fenbendazole against giardiasis in dogs. Am J Vet Res 55:988-990.
62. Zajac AM, LaBranche TP, Donoghue AR, et al. (1998). Efficacy of fenbendazole in the treatment of experimental Giardia infection in dogs. Am J Vet Res 59:61-63.
63. Stokol T, Randolph JF, Nachbar S, et al. (1997). Development of bone marrow toxicosis after albendazole administration in a dog and cat. J Am Vet Med Assoc 210:1753-1756.
91 64. Fiechter R., Deplazes P., & Schnyder M. (2012). Veterinary Parasitology Control of Giardia infections with ronidazole and intensive hygiene management in a dog kennel. Veterinary Parasitology, 187(1–2), 93–98.
65. Bowman DD, Liotta JL, Ulrich M, et al. (2009). Treatment of naturally occurring, asymptomatic Giardia sp. in dogs with Drontal Plus flavor tablets. Parasitol Res 105:8125-8134.
66. Montoya A, Dado D, Mateo M, Espinosa C, Miró G (2008). Efficacy of Drontal® flavour Plus (50 mg praziquantel, 144 mg pyrantel embonate, 150 mg febantel per tablet) against Giardia spp. in naturally infected dogs. Parasitol Res 103:1141–1144.
67. Leitch GJ, Visvesvara GS, Wahlquist SP, Harmon CT. (1989). Dietary fiber and giardiasis: dietary fiber reduces rate of intestinal infection by Giardia lamblia in the gerbil. Am J Trop Med Hyg 41:512-520.
68. Travers M.A., Florent I., Kohl L., Grellier P. (2011). Probiotics for the control of parasites: an overview. Journal of Parasitology Research.
69. Benyacoub J, Pérez PF, Rochat F, et al. (2005). Enterococcus faecium SF68 enhances the immune response to Giardia intestinalis in mice. J Nutr 135:1171-1176.
70. Simpson KW, Rishniw M, Bellosa M, et al. (2009). Influence of Enterococcus faecium SF68 probiotic on giardiasis in dogs. J Vet Intern Med 23:476-481.
71. Chon SK, Kim NS. (2005). Evaluation of silymarin in the treatment of asymptomatic Giardia infections in dogs. Parasitol Res 97:445-451.
72. Fiechter, R., Deplazes, P., & Schnyder, M. (2012). Veterinary Parasitology Control of Giardia infections with ronidazole and intensive hygiene management in a dog kennel. Veterinary Parasitology, 187(1–2), 93–98.
73. Villeneuve V, Beugnet F, Bourdoiseau G. (2000). Efficacy of oxfendazole for the treatment of giardiosis in dogs. Experiments in dog breeding kennels. Parasite;7(3):221-226.
74. Risks, H., & Position, L. (2002). Giardiasis, Center for Food Safety and Public Health. 1999 (3242), 1999–2000. Iowa State University, Ames, IA.
75. Monis, P. T., Caccio, S. M., & Thompson, R. C. A. (2009). Variation in Giardia : towards a taxonomic revision of the genus, 93–100.
76. Ettinger S, Feldman E. Textbook of veterinary internal medicine: diseases of the dog and the cat, 8th edition. Elsevier Saunders, 2017.
92 77. Dandrieux JRS. (2016) Inflammatory bowel disease versus chronic enteropathy in dogs:
are they one and the same? J Small Anim Pract.;57(11):589-599.
78. Washabau RJ, Day MJ. Canine And Feline Gastroenterology. Elsevier Saunders, 2013. 79. Popoff MR. (1998) Interactions between bacterial toxins and intestinal cells. Toxicon
36:665–685.
80. Jouët P, Sarna SK, Singaram C, et al (1995). Immunocytes and abnormal gastrointestinal motor activity during ileitis in dogs. Am J Physiol 269:G913-G924. 81. Jouët P, Sarna SK. (1996). Platelet-activating factor (PAF) stimulates giant migrating
contractions during ileal inflammation. J Pharmacol Exp Ther 279:207–213.
82. Mandigers , P. J. , Biourge , V. , van den Ingh , T. S. , et al. (2010). A randomized, open- label, positively-controlled field trial of a hydrolyzed protein diet in dogs with chronic