Valutazione del ruolo funzionale di un nuovo canale del potassio Kv7.4 a livello della membrana mitocondriale interna in cuori di ratto.

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Indice

1.1. Cenni sulla fisiologia e sulla funzione del mitocondrio... 1

1.1.1. La respirazione cellulare... 3

1.1.1.1. Il flusso elettronico mitocondriale... 4

1.1.1.2. La sintesi di ATP... 7

1.1.1.3. Conduttanza protonica mitocondriale... 9

1.1.1.4. Conduttanza protonica inducibile... 10

1.1.1.5. Produzione di ROS... 10

1.1.2. I canali del potassio mitocondriali... 12

1.1.2.1 Canali mitoK_ATP... 13

1.1.2.2. Canali mitoBK_Ca e mitoIK_Ca... 17

1.1.2.3. Canali mitoKV1.3... 21

1.1.2.4. Canali mitoTASK-3... 23

1.1.3. Pre-condizionamento ischemico (IPC)... 24

1.1.4. Post-condizionamentoischemico (I-Post)... 26

1.1.5. Ruolo dei canali mitoK_ATP nell’IPC... 28

1.1.6. Ruolo dei canali mitoBKCa nell’IPC... 30

1.1.7. mPTP (mitochondrial permeability transition pore)... 32

1.1.8. Ruolo dei canali ionici mitocondriali nella cardioprotezione... 34

1.1.9. Ruolo della proteina chinasi C nell’attivazione dei canali mitoK_ATP... 38

1.1.10. Ruolo dell’NO nell’attivazione dei canali mitoKATP... 39

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3.1. Animali... 44

3.2. Procedura di isolamento dei mitocondri... 45

3.2.1. Determinazione del contenuto proteico mitocondriale... 47

3.2.2. Protocollo sperimentale 1: valutazione delle variazioni del potenziale di membrana mitocondriale... 49

3.2.3. Protocollo sperimentale 2: valutazione delle variazioni nell’uptake di Ca2+... 51

3.3. Procedura del cuore isolato e perfuso alla Langendorff... 52

3.3.1. Analisi funzionale... 53

3.3.2. Analisi istologica... 53

3.4. Analisi statistica... 54

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