GRAFICO 2: Variazioni di peso

(1)

GRAFICO 1: Sopravvivenza

Sopravvivenza

79,2

62,5

54,0 54,0 100

0 20 40 60 80 100 120

0w 1w 4w 8w 10w

% animali vivi/tot animali

Durante il periodo sperimentale sono stati operati un totale di 24 animali. Tuttavia, come evidenziato dal grafico 1, è stata registrata un’alta mortalità dovuta alla procedura operatoria.

In particolare si osserva una riduzione della percentuale di sopravvivenza già dopo la prima settimana successiva all’intervento (79.2%), ed un’ulteriore riduzione dopo 4 settimane (62.5%). Tale indice tende a stabilizzarsi dopo la 4° settimana fino alla fine della 10°

settimana: al termine delle 10 settimane erano sopravvissuti solo 13 animali dei 24 nefrectomizzati (54%).

(2)

GRAFICO 2: Variazioni di peso

0 0,2 0,4 0,6 0,8 1 1,2 1,4

g 1 g 4 g 7 g 12 g 15

giorni incremento rispetto al baseline

Controllo Nefrectomia Nefrect+Fluoxetina

Com’è possibile notare dal grafico 2 non si assiste ad una riduzione significativa del peso corporeo nel gruppo nefrectomia rispetto al gruppo controllo durante i 14 giorni di somministrazione del farmaco. Nel gruppo “nefrectomia+Fluoxetina” si osserva invece una diminuzione del peso già a partire dal 4° giorno, anche se diventa significativa rispetto al controllo e al gruppo nefrectomia (* p<0.05) solo tra il 12° e il 15° giorno.

* *

*p<0.05

(3)

GRAFICO 3: BDNF a livello centrale

BDNF corteccia prefrontale

0 5 10 15 20 25 30

Controllo Nefrect+Fluoxetina Nefrectomia

pg BDNF/mg prot

Controllo

Nefrect+Fluoxetina Nefrectomia

BDNF Liquor

0 20 40 60 80 100 120 140 160

pg BDNF/ml

Controllo

*

*p<0.05

*p<0.05 3A

3B

(4)

BDNF Ippocampo

0 10 20 30 40 50 60 70

pg BDNF/mg prot

Controllo

La valutazione dei livelli di BDNF in corteccia prefrontale (3A) e nel liquor (3B), permette di osservare una diminuzione significativa dei livelli di BDNF nel gruppo con nefrectomia sia in corteccia prefrontale (Nx: 7.842±5.588 vs C: 12.158±6.767; *p<0.05), sia nel liquor (Nx:

73.473±34.389 vs C: 122.169±65.360; *p<0.05), mentre per quanto riguarda il gruppo

“nefrectomia+Fluoxetina” non si osservano variazioni significative di BDNF né in corteccia (Nx-F: 17.984±13.752 vs C: 12.158±6.767) né nel liquor (Nx-F: 95.605±33.148 vs C:

122.169±65.360) rispetto ai valori espressi dal gruppo controllo.

Il grafico 3C relativo ai valori di BDNF in ippocampo permette di osservare un aumento non significativo dei livelli di BDNF nel gruppo con nefrectomia rispetto al controllo, mentre non si osservano variazioni nel gruppo con nefrectomia e che ha ricevuto il farmaco.

3C

(5)

GRAFICO 4:BDNF a livello periferico

BDNF renale

0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50

pg BDNF/mg prot

Controllo

Variazione del BDNF sierico

0 500 1000 1500 2000

pg/ml

Controllo

* *

*p<0.05 4A

4B

(6)

Nel grafico 4A relativo ai livelli di BDNF nel tessuto renale, si osserva una diminuzione significativa dei livelli di BDNF in entrambi i gruppi con nefrectomia (Nx-F: 20.932±7.651;

Nx: 17.940±9.362 vs C: 35.910±14.194; *p<0.05), indipendentemente dal trattamento con il farmaco.

Nel grafico 4B non si osservano variazioni significative dei livelli di BDNF nel siero, in nessuno dei gruppi analizzati.

(7)

GRAFICO 5: Parametri di funzionalità renale

Proteinuria

0 2 4 6 8 10 12 14

mg proteine

Controllo

Clearance creatinina

0 0,2 0,4 0,6 0,8 1 1,2 1,4

clearance

Controllo

*p<0.05

*

* °

*

*p<0.05

*p<0.01

°p<0.05

°p<0.01 5B

5A

(8)

La valutazione della proteinuria (grafico 5A) evidenzia un aumento significativo di questo parametro nel gruppo di animali con nefrectomia rispetto ai valori basali espressi dal gruppo controllo (Nx: 9.341 ± 4.366 vs C: 3.358 ± 1.239; *p<0.05); diversamente, negli animali del gruppo “nefrectomia+Fluoxetina” non si osservano variazioni di questo parametro.

In accordo con quanto evidenziato dal grafico della proteinuria, la clearance della creatinina (grafico 5B) presenta una diminuzione significativa in entrambi i gruppi nefrectomizzati rispetto al controllo (Nx: 0.061 ± 0.018 vs C: 1.103 ± 0.108 , *p<0.01; Nx-F: 0.219 ± 0.094 vs C: 1.103 ± 0.108, *p<0.01), tuttavia nel gruppo di animali che ha ricevuto la Fluoxetina si osserva un aumento significativo rispetto al gruppo con sola nefrectomia (Nx-F: 0.219 ± 0.094 vs Nx: 0.061 ± 0.018, *p<0.05), pur rimanendo significativamente ridotto rispetto al controllo.

(9)

GRAFICO 6: Danno ossidativo

Nitrotirosine renali

0,000 1,000 2,000 3,000 4,000 5,000 6,000

moli/g prot

Controllo

Nitrotirosine

0 0,2 0,4 0,6 0,8 1 1,2

Contr Nefrect nefrect+Fluox

nmoli/g prot

Corteccia Ippocampo

*

*p<0.05

6B 6A

nefrectomia nefrect+Fluoxetina

(10)

La valutazione delle nitrotirosine come marker di danno cellulare a carattere ossidativo evidenzia un aumento significativo dei livelli di nitrotirosine nel rene del gruppo con nefrectomia rispetto al controllo (Nx: 4.952 ± 1.533 vs C: 2.517 ± 0.277; *p<0.05), mentre per quanto riguarda il gruppo trattato con Fluoxetina non si osservano variazioni rispetto al gruppo controllo (grafico 6A).

La valutazione dei livelli di nitrotirosine in corteccia e ippocampo (grafico 6B) non ha evidenziato variazioni di questo parametro in nessuno dei gruppi considerati.

(11)

FOTO 1: Valutazione istologica (Tricromica di Masson)

(25X) Foto A: Controllo

Foto B: Nefrectomia

Foto C: Nefrectomia + Fluoxetina

La valutazione istologica, attraverso la Tricromica di Masson, evidenzia come nel gruppo nefrectomia (foto B) si osservi un collasso a livello glomerulare con riduzione della cellularità, aumento dello spazio urinifero e formazione di edema a livello tubulare, rispetto al gruppo controllo (foto A); nel gruppo di animali “nefrectomia+Fluoxetina” (foto C) il tessuto si presenta più conservato rispetto al gruppo nefrectomia, come ben evidente dalla riduzione dell’edema a livello tubulare, dall’aspetto più conservato dell’epitelio tubulare e dalla ridotta presenza di materiale proteinaceo nel lume tubulare .

A

B

C

(12)

FOTO 2: Valutazione immunoistochimica (desmina)

(25X) Foto A: Controllo Foto B: Nefrectomia

Foto C: Nefrectomia + Fluoxetina

La valutazione immunoistochimica, utilizzando la desmina come marker, evidenzia come l’espressione di tale proteina nei gruppi nefrectomizzati (foto B) aumenti rispetto al gruppo controllo (foto A); nel gruppo trattato con fluoxetina (foto C), se pure l’espressione di questo marker risulti aumentata rispetto al controllo, risulta tuttavia ridotta rispetto al gruppo con

A

B

C