LIETUVOS SVEIKATOS MOKSLŲ UNIVERSITETAS MEDICINOS AKADEMIJA
FARMACIJOS FAKULTETAS
VAISTŲ TECHNOLOGIJOS IR SOCIALINĖS FARMACIJOS KATEDRA
KAROLINA BAJORAITĖ
pH REIKŠMĖS ĮTAKOS KREMŲ TEKSTŪRAI TYRIMAS
Magistro baigiamasis darbas
Darbo vadovas Prof. Jurga Bernatonienė
2
LIETUVOS SVEIKATOS MOKSLŲ UNIVERSITETAS MEDICINOS AKADEMIJA
FARMACIJOS FAKULTETAS
VAISTŲ TECHNOLOGIJOS IR SOCIALINĖS FARMACIJOS KATEDRA
TVIRTINU:
Farmacijos fakulteto dekanas Vitalis Briedis
pH REIKŠMĖS ĮTAKOS KREMŲ TEKSTŪRAI TYRIMAS
Magistro baigiamasis darbas
Darbo vadovas
Prof. Jurga Bernatonienė
Recenzentas Darbą atliko
Magistrantė Karolina Bajoraitė
3
TURINYS
SANTRUMPOS ... 7 SĄVOKOS ... 8 1. ĮVADAS ... 9 1.1. Darbo aktualumas ... 92. DARBO TIKSLAS IR UŢDAVINIAI ... 10
2.1. Darbo tikslas ... 10
2.2. Darbo uţdaviniai... 10
2.3. Tyrime naudojama aparatūra ir prietaisai ... 10
3. LITERATŪROS APŢVALGA ... 11
3.1. Odos funkcijos ir savybės ... 11
3.2. pH reikšmės įtaka odos rūgštinei dangai ... 12
3.3. Pusiau kietų preparatų, skirtų vartoti ant odos, farmakopėjinės kategorijos ir reikalavimai.. 14
3.4. Ingredientų įtaka preparatų tekstūrai ... 15
3.5. pH reikšmės įtaka preparatams, jų terapiniam poveikiui ... 16
3.6. pH reikšmės įtaka preparato taikymui ... 17
3.7. Pagrindinės kremų sudedamosios dalys ... 18
3.8. Poligliceril-4-laurato/ sukcinato panaudojimas odos preparatų kūrime ... 19
4. TYRIMO METODIKA ... 21
4.1. Tyrimo planavimas ... 21
4.2. Tyrimo objektas ... 21
4.3. Tyrimo metodai ... 22
4.3.1. Kremų gamyba su poligliceril-4-lauratu/ sukcinatu ... 22
4.3.2. Kremų pagrindų mikroskopinis tyrimas ... 22
4.3.3. Kremų stabilumo tyrimas, taikant centrifugavimą ... 22
4.3.4. Kremų emulsinių sistemų viskozimetrinis tyrimas ... 23
4.3.5. Šaldymo – šildymo ciklo tyrimas ... 23
4.3.6. Organoleptinių savybių vertinimas ... 23
4.3.7. Kremų su poligliceril-4-lauratu/ sukcinatu pH reikšmės tyrimas ... 24
4
4.4. Duomenų analizės metodai ... 25
4.4.1. Statistinė analizė ... 25
5. REZULTATAI IR JŲ APTARIMAS ... 26
5.1. Poligliceril-4-laurato/ sukcinato įtaka emulsinės sistemos kūrimui ... 26
5.2. Emulsinių sistemų su poligliceril-4-lauratu/ sukcinatu mikrostruktūra ... 27
5.3. Poligliceril-4-laurato/ sukcinato įtaka emulsinių kremų stabilumui ... 30
5.4. Poligliceril-4- laurato/ sukcinato įtaka kremų klampai ... 31
5.5. Temperatūros įtaka emulsinei sistemai... 32
5.6. Kremų su poligliceril-4-lauratu/ sukcinatu apklausos vertinimas ... 33
5.7. Skirtingų pH reikšmių nustatymas 5 % poligliceril-4-laurato/ sukcinato koncentracijos kremuose ... 42
5.8. 5 % poligliceril-4-laurato/ sukcinato pH vertės priklausomybės įtaka kremų tekstūrai ... 43
6. IŠVADOS ... 50
7. PRAKTINĖS REKOMENDACIJOS ... 51
8. LITERATŪROS SĄRAŠAS ... 52
9. PRIEDAI ... 55
9.1. Bioetikos komisijos leidimas atlikti anketinę apklausą ... 55
5
SANTRAUKA
Karolina Bajoraitė. Magistro baigiamasis darbas/ darbo vadovė prof. Jurga Bernatonienė; Lietuvos sveikatos mokslų universiteto, medicinos akademijos, farmacijos fakulteto, Vaistų technologijos ir socialinės farmacijos katedra.- Kaunas, 2016. pH reikšmės įtakos kremų tekstūrai tyrimas.
Darbo tikslas - Įvertinti pH reikšmės įtaką emulsinių sistemų kokybės rodikliams ir tekstūrai.
Tyrimo objektas - Emulsinės sistemos su skirtingais emulsiklio poligliceril-4-laurato/ sukcinato kiekiais, esant skirtingai lipofilinei fazei (balto, minkšto parafino ir alyvuogių aliejaus).
pH reikšmė skirtingos emulsiklio poligliceril-4-laurato/ sukcinato koncentracijos mėginių pagrinduose tarp lyginamųjų lipofilinių fazių reikšmingai nesiskyrė. Mikroskopavimo tyrimo metu nustatyta, jog skirtingų koncentracijų poligliceril-4-laurato/ sukcinato kremai: balto, minkšto parafino, esant pH reikšmei 4,69 – 4,77 ± 0,09, o alyvuogių aliejaus, esant pH reikšmei 4,56 – 4,68 ± 0,08 geba sudaryti patvarią ir stabilią emulsinę sistemą pagal pasirinktą emulsijos tipą - aliejus vandenyje. Šio tipo emulsinė sistema atlikus centrifugavimo tyrimą buvo patvari ir stabili mechaninei paţaidai. Geriausias maţo klampumo a/v tipo emulsinių sistemų ilgalaikio stabilumo rodiklio patikimumas gaunamas esant aliejaus su emulsikliu poligliceril-4-lauratu / sukcinatu ir vandens santykiui 5:5. Kitų santykių emulsinės sistemos, atsiţvelgiant į pH reikšmės skirtumus, yra taip pat patvarios ir stabilios. Temperatūros kaita pagamintoms a/v tipo emulsinėms sistemoms reikšmingos įtakos stabilumui ir patvarumui neturėjo. Analizuojant kremuose esantį poligliceril-4-laurato/ sukcinato koncentracijos ir pagrindo santykį - respondentų optimaliausiu buvo išrinktas 5 % poligliceril-4-laurato/ sukcinato a/v tipo kremas. Jo organoleptinės savybės: pojūtis po pavartojimo - 50 %, susigėrimas - 32 %, konsistencija - 9 % patenkino respondentų, daugiausiai moterų, poreikių, keliamų kosmetikos priemonei, skirtai rankų ir veido odai. Po atliktų tepumo tyrimų pH reikšmės rodikliams rūgštinis kremo tipas yra reikšmingai geresnis uţ šarminį, nes produktas lengviau ir geriau uţtepamas ant odos. Kuo maţesnė kremo pH reikšmė, tuo tepumo rodiklis yra geresnis. Kremo tekstūros savybėms: tirštumui, lipnumui, kietumui pH reikšmės įtaka nebuvo reikšminga.
Tyrimo rezultatai yra pateikti 8 lentelėse, 4 grafikuose ir demonstruojami 22 paveiksluose. Naudotos literatūros sąrašą sudaro 33 šaltiniai. Magistro baigiamojo darbo apimtis yra 57 puslapiai.
6
SUMMARY
Karolina Bajoraitė. Master‘s thesis / work supervisor Prof. Jurga Bernatonienė; Lithuanian University of Health Sciences, Medical Academy, Faculty of Pharmacy, Department of Drug Technology and Social Pharmacy. Kaunas, 2016. A Study on the Influence of pH Value on the Texture of Ointments.
Work goal: to evaluate the influence of pH value on the quality values and texture of emulsion systems.
Research object – emulsion systems with different amounts of emulsifier polyglyceryl-4- laurate/ succinate, in different lipophilic phases (white, soft paraffin and olive oil).
The pH values in sample bases of different concentrations of emulsifier polyglyceryl-4- laurate /succinate between comparative lipophilic phases were not significantly different. During a microscopy study, it has emerged, that ointments of differing polyglyceryl-4-laurate/ succinate concentrations: soft white paraffin with pH values 4,69 – 4,77 ± 0,09, and olive oil with pH values 4,56 – 4,68 ± 0,08 – are able to constitute a stable and lasting emulsion system according to chosen type of emulsion: oil in water. This type of emulsion system, after performing a centrifuge test, was proven to be stable and lasting under mechanical damage. The highest reliability for indicator of low viscosity o/w type emulsion system long-term stability was achieved at the ratio of 5:5 between emulsifier polyglyceryl-4-laurate/ succinate and water. Emulsion systems of different ratios, taking into account the differences in pH values, were also stable and lasting. Changes in temperature did not have a significant influence on the stability and endurance of produced o/w emulsion systems. When analysing the ratio between polyglyceryl-4-laurate/succinate concentration and base, respondents chose 5% polyglyceryl-4-laurate/ succinate o/w type ointment as the most optimal. Its organoleptic qualities: feel after use – 50%, absorption – 32%, consistency – 9% - satisfied the needs for cosmetic hand and face skin products of the respondents, mainly women. After performing application tests for pH values, the acidic type of ointment proved significantly better than alkaline, because the product was easier and better to apply on skin. The lower the pH value, the better was the spreadability value. The pH value was not significant for ointment textural qualities: thickness, stickiness or hardness.
Study results are provided in 8 tables, 4 graphs and demonstrated in 22 illustrations.
The list of referenced literature includes 33 sources. The volume of this master’s thesis is 57 pages.
7
SANTRUMPOS
SC Ph Eur AR CR a/v v/a vit °C % min aps/ min Stratum corneum Europos farmakopėja askorbo rūgštis citrinų rūgštis aliejus vandenyje vanduo aliejuje vitaminas temperatūra procentai minutėapsisukimų skaičius per minutę g ml cm mm mm/ s gramai mililitrai centrimetrai milimetrai
milimetrai per sekundę milimetrai
p Pa*s pav pH
patikimumo koeficientas paskalis per sekundę paveikslas
vandenilio jonų (H+) koncentracijos tirpaluose
s
matas sekundė
8
SĄVOKOS
1. Aknė (Acne vulgaris) - odos riebalinių liaukų funkcijos sutrikimas/ uţdegimas.
2. Antioksidatoriai - medţiagos, apsaugančios nuo oksidacinių procesų pačiame preparate, taip pagerinančios vartojimo ir organoleptines savybes.
3. Daţikliai - medţiagos, suteikiančios preparatui norimą spalvą ir estetinę išvaizdą. 4. Drėkikliai - medţiagos, kurios padeda palaikyti reikiamą drėgmės kiekį preparate.
5. Egzema - neuţkrečiamas, daţnai pasikartojantis alerginio pobūdţio odos uţdegimas, pasireiškiantis nieţėjimu išbėrimo vietoje.
6. Emulsikliai - medţiagos, naudojamos emulsinių sistemų stabilimui uţtikrinti. 7. Konservantai - medţiagos, uţtikrinančios preparato tinkamumo laiko pratęsimą. 8. Kvapikliai - medţiagos, suteikiančios preparatui priimtiną kvapą.
9. Neokliuzyvinis - medţiagos savybė, kuri nepadengia odos plėvele, taip leidţiant drėgmei išgaruoti iš gilesnių jos sluoksnių.
10. Paprastoji ichtiozė (ichthyosis vulgaris) - tai autosominiu dominantiniu būdu paveldimas odos sausumas ir pleiskanojimas, ryškiausias ant tiesiamųjų galūnių paviršių ir susijęs su plaukų folikuline keratoze bei atopija.
11. Psoriazė (Psoriasis vulgaris) - lėtinė uţdegiminė odos liga, pasireiškianti išorinio sluoksnio ląstelių, besidalijančių greičiau nei normaliai ir besikaupiančių odos paviršiuje, sutrikimu. 12. Rišikliai - medţiagos, kurios geba sujungti (fiziškai/ chemiškai) kompomentus į vientisą
masę.
13. Sfingolipidai - lipidai, kurių molekulėse yra aminoalkoholio sfingozino.
14. Stabilizatoriai - medţiagos, uţtikrinančios stabilumo išlaikymą preparato dispersinėse sistemose.
15. Tekstūra - medţiagos sandaros ypatybės, atsiradusios veikiant fiziologiniams, cheminiams ir fiziniams procesams.
16. Tirpikliai - medţiaga, kurioje tirpinami kiti preparato komponentai.
17. Tirštikliai - medţiagos, kurios padidina preparato klampumo rodiklį, nepakeisdami kitų fiziko-cheminių savybių.
9
1. ĮVADAS
1.1. Darbo aktualumas
Oda kartu su kitų organų (lytinių, virškinimo, kvėpavimo sistemų) gleivine saugo vidinę kūno struktūrą nuo neigiamos išorinės aplinkos įtakos, t.y. teršalų, temperatūros pokyčių, drėgmės. Tose vietose, kuriose apsaugos nuo išorinio poveikio nėra, odos rūgštingumas, t.y. jos pH reikšmės rodiklis yra paţeidţiamas. Dėl to kyla odos problemos, todėl svarbu atsiţvelgti į jos rūgštingumą, t.y. pH reikšmės lygį [1]. Norint turėti normalią odą, turi būti palaikomas normaliai odai būdingas pH reikšmės rodiklis. Atsiţvelgiant į tai, bandoma kurti ir tobulinti pusiau kietų preparatų gamybos technologijas, turinčias įtakos pusiau kietų vaistų formoms, pvz.: kremams. Viena tokių naujovių - pH reikšmės įtakos nagrinėjimas, kuris gali lemti ne tik organoleptines, fizikines, bet ir terapines pusiau kietų preparatų savybes.
Remiantis europinės kosmetikos pramonės duomenų statistika, Europos Sąjungos gyventojai kasmet nuperka per 6 milijardus vienetų įvairių kosmetikos gaminių, todėl didieji gydomosios kosmetikos gamintojai daţnai atnaujina ketvirtadalio savo gaminių sudėtį. Ją pagerinti naudojamos naujos kartos, tekstūros ir kitos pagalbinės medţiagos: emulsikliai, drėkikliai, kurie taip pat apsprendţia ir gauto produkto pH reikšmę [2]. Tyrime naudojamas naujos kartos emulsiklis - poligliceril-4-lauratas/sukcinatas (angl. Natragem E145 NP- LQ MV). Pagaminti poligliceril-4-laurato/sukcinato aliejus vandenyje (a/v) tipo kremai buvo pateikti respondentų įvertinimui – anketavimui. Buvo vertinamos kremų organoleptinės savybės: pojūtis po pavartojimo, susigėrimas ir konsistencija. Atliekant literatūros analizę rasta duomenų apie pagalbinių medţiagų struktūros ir fiziko-chemines savybes. Mokslinių tyrimų, kaip šių medţiagų tekstūrai turi įtakos pH rodiklis, yra labai maţai. Mūsų tyrimo tikslas yra įvertinti pH reikšmės įtaką emulsinių sistemų kokybės rodikliams ir tekstūrai, nes literatūros duomenys apie tai yra nepakankami arba prieštaraujantys vieni kitiems.
10
2. DARBO TIKSLAS IR UŢDAVINIAI
2.1. Darbo tikslas
Įvertinti pH reikšmės įtaką emulsinių sistemų kokybės rodikliams ir tekstūrai.
2.2. Darbo uţdaviniai
1. Susisteminus literatūros šaltinius parinkti emulsinės sistemos receptūrą; 2. Ištirti emulsinių sistemų su poligliceril-4-lauratu/ sukcinatu mikrostruktūrą; 3. Nustatyti poligliceril-4-laurato/ sukcinato įtaką emulsinių sistemų stabilumui; 4. Išsiaiškinti ir įvertinti respondentų poţiūrį į kremų organoleptines savybes; 5. Nustatyti pasirinktuose kremuose pH reikšmių įtaką tekstūrai.
2.3. Tyrime naudojama aparatūra ir prietaisai
Centrifuga High speed centrifuge type 310 (Vokietija) Kaitinimo plytelė SB160 (Stuart, UK)
Optinis mikroskopas Motic® BA310 (Ltd.Kinija)
pHmetras Cyberscan pH/mV/oC Meter (EUTECH Instrument, Olandija) Rotacinė maišyklė Heidolph, RZR 2020 (Vokietija)
Svarstyklės SCALTEC (Scaltec Instrument GmbH, Vokietija)
Tekstūros analizatorius Stable micro systems manual TA. Xtplus (UK) Termometras TFA Digitales Kontroll- Thermometer (Vokietija) Viskozimetras Selekta P ST-2010 Abrera ( Ispanija)
11
3. LITERATŪROS APŢVALGA
3.1. Odos funkcijos ir savybės
Norint geriau suvokti pH reikšmę bei jos įtaką kremų tekstūrai, pirmiausia turime suvokti odos fiziologiją. Tai patvirtina ir mokslinėje literatūroje rasti straipsniai ir publikacijos. Yra trys pagrindiniai odos sluoksniai (1pav): epidermis, derma (arba tiesiog oda) ir poodinis riebalinis ląstelynas (hipoderma). Odos pagrindinės funkcijos – saugoti organizmą, reguliuoti ir sąveikauti su aplinka. Šias funkcijas ji atlieka, kai pH reikšmė yra 4 - 6, kuri priklauso nuo anatominės jos padėties. Odos paviršius, esant nepakitusiai pH reikšmei, uţtikrina daugiafunkcinę odos paskirtį [3,4,5].
1 pav. Odos sandara
(http://www.avevitaklinika.lt/lt/seimos-klinika/zinynas/bendra-informacija/anatomija-ir-fiziologija-.html)
Pasak Lelio ir kitų autorių [3], oda pasiţymi plačiu funkcijų spektru, todėl galime varijuoti tarp šiuolaikinių pusiau kietų farmacinių preparatų vaistinių ir pagalbinių medţiagų formavimo sistemų. Sunku rasti lygiavertę proporciją tarp optimalaus efektyvumo ir preparato fiziko-cheminių savybių. Tam didelę įtaką turi tinkamas receptūros parinkimas, atsiţvelgiant į vaistines ir pagalbinų medţiagų savybes bei pačios odos struktūrą: pH reikšmę, terapinę paskirtį,
12
patologijas ir kt. Pagamintas preparatas charakterizuojamas pagal savo tekstūrines savybes (kietumą, tepumą, klampą, absorbciją), kurioms įtaką turi ne tik sudedamos dalys, bet ir pačio preparato pH reikšmė. Jos vertės priklausomybę apsprendţia kokiu terapiniu tikslu bus vartojamas preparatas, kurią kūno dalį/sistemą pasirinkome kaip taikinį, taip pat lokalizaciją (vidinis ar išorinis kremas). Remdamiesi šiais rodikliais, kurie orientuoti į pagrindines odos funkcijas: apsauginę (barjerinę) ir jutiminę, galime suformuoti optimalios sudėties bei kokybės produktą. Tai padėtų greičiau atstatyti paţeistas odos ląstelių funkcijas, sandarą [3,4,5,6,7].
Atsiţvelgiant į ţinomas odos savybes, kurios taip pat gali kisti pagal kiekvieną individualiai, bet pagrindinės funkcijos yra visiems atvejams vienodos, todėl kurdami kremus turime didelį dėmesį skirti pH reikšmei, kuri leistų pašalinti esamas odos disfunkcijas ar kaip tik palaikyti normalią terpę.
3.2. pH reikšmės įtaka odos rūgštinei dangai
Odos raginis sluoksnis stratum corneum (SC) pasiţymi didele rūgštine pH reikšme. Pavadinimas „rūgštinė mantija/ danga“ yra kilęs iš dviejų endogeninių mechanizmų, kurie veikia per išorines epidermio ląsteles- fermentas fosfolipazė A2, atskelia nuo fosfolipidų laisvąsias riebiąsias rūgštis ir taip pat iš natrio - protonų siurblio aktyvumo, išskiriant į ląstelių išorę vandenilio jonus H+. Remiantis mokslininkų duomenimis, jog trečiasis išorinis epidermio mechanizmas, kuris sąlygoja trans - urokano rūgšties iš filagrino proteolizės gamybą, taip pat gali būti svarbus, nes sukelia SC pH reikšmės padidėjimą, esant filagrino trūkumui, pvz.: pacientų, sergančių paprastąja ichtioze (ichthyosis vulgaris). Odos epidermio raginis sluoksnis kompaktiškai apvilktas hidrolipidine plėvele. Tai pirmasis apsauginis odos barjerinis sluoksnis nuo nepalankių išorinės aplinkos faktorių, pvz.: radiacijos, aplinkos taršos, UV spindulių, mechaninių paţeidimų, infekcijų ir bakterijų. Hidrolipidinė mantija dar yra vadinama stratum compactum. Ši uţtikrina reikiamą odos floros pusiausvyrą. Prakaito ir riebalinės liaukos nuolat aprūpina odą ir padengia ją vandeniu/aliejine emulsija. Rūgštinis pH taip pat reguliuoja raginio sluoksnio vientisumą, pavyzdţiui, barjeras atkuriamas tada, kai odos ląstelės susiduria su neutraliu pH buferiu, todėl pagrindiniai ingredientai išlaiko pH reikšmę- 5,5 [1,8,9]. Bet remiantis atliktu Lambers H. ir kitų tyrėjų tyrimu, paneigta nuomonė, jog net apie 50 procentų (%) literatūros šaltiniuose laikyta normali pH reikšmė 5,5, yra klaidinga. Tyrimo metu nustatyta, jog vidutiniška normalios odos pH reikšmė yra 4,7 [10].
13
Normalios odos paviršiuje rūgštingumo laipsnis, t.y. odos pH reikšmė siekia 4,7 - 5,5, kai neutrali pH reikšmė - 7-7,4. Beveik visos ląstelės jautriai reaguoja į pH reikšmės pokyčius ir net nedidelis rūgštingumo pokytis jas praţudo. Tik oda, padengta negyvų, suragėjusių ląstelių sluoksniu, gali pasidengti rūgštine danga (dar vadinama Markioninio mantija) [4,11]. Ją sudaro odos riebalų, prakaito ir organinių rūgščių: pieno, citrinų (CR) ir kt. mišinys. Šios rūgštys susidaro epidermyje biocheminių procesų metu. Odos rūgštinė danga - tai pirmoji apsaugos grandis. Ji sulaiko mikroorganizmus, kurių dauguma nemėgsta rūgštinės terpės.
Egzistuoja ir tokių bakterijų, kurios gyvena ant odos (Staphylococcus epidermidis), pieno bakterijos. Jos labiau mėgsta būtent rūgštinę terpę ir net pačios gamina rūgštis, tokiu būdu prisidėdamos prie odos dangos formavimo. Minėtos bakterijos visai nekenkia odai, be to, jos išskiria toksinus, kurių poveikis analogiškas antibiotikų poveikiui. Šie toksinai slopina patogeninės mikrofloros gyvybinę veiklą [4,6,11].
Odos rūgštingumas sutrinka sergant kai kuriomis odos ligomis. Turint odos grybelį, pH reikšmės lygis siekia >7 (ţemas šarminis lygis), sergant egzema - >7,4 pH, gydant ją kuo maţesnė pH reikšmė, tuo efektyviau veikia prieš odos raudonį, perštėjimą ar išsausėjimą, o aknę (Acne
vulgaris) sukeliančios bakterijos (Proprionibacterium acnes) veši esant 6 - 6.5 pH reikšmei.
Reikėtų paţymėti, kad epidermio pamatiniame sluoksnyje, kur yra išsidėsčiusios gemalinės ląstelės, odos pH reikšmė prilygsta kraujo pH reikšmei - 7,4 [8,9,11]. Palaikant rūgštinės mantijos normalią pH reikšmę, galima išvengti visų uţdegiminių odos ligų, taip pagerinant barjero pralaidumo funkciją [1].
Raginis sluoksnis taip pat yra sudarytas ir iš plokščių keratino ţvynelių, kuriuos sulipdo lipidų sluoksnis, laikomi epidermio barjero pagrindu. Lipidų sluoksnį sudaro specialios molekulės, vadinamieji poliniai lipidai su hidrofiline galvute ir hidrofobine uodega. Raginio sluoksnio lipidų pluoštai sudaryti iš ypatingų lipidų, kurie priskiriami sfingolipidų (ceramidų) klasei. Jie uţpildo raginiame sluoksnyje esančių ţvynelių tarpus, taip dalyvaudami epidermio barjero kūrimo procese [6,8,11]. Remiantis Buraczewska I., Lodén M. atliktu tyrimu [5], buvo nustatyta, jog fiziologinis vaidmuo "rūgščios odos mantijos" ir pH reikšmės gradientas per SC funkciją lieka nepaaiškintas. pH reikšmės gradientą buvo pasiūlyta suaktyvinti fermentų, atsakingų uţ odos barjerinės funkcijos prieţiūrą, ir palengvinti SC pleiskanojimo procesą. Tyrimo tikslas buvo ištirti drėkinamojo kremo pH reikšmės įtaką barjero paviršiaus paţeistos ţmogaus odos regeneracijai. Tyrime nebuvo įrodyti kremo nuo pH 4,0 iki kremo pH 7,5 reikšmių pranašumas dėl odos barjero regeneracijos skatinimo, nes jokių reikšmingų skirtumų (p> 0,05) nebuvo rasta, taip pat buvo pastebėtas vandens praradimas iš epidermio.
14
3.3. Pusiau kietų preparatų, skirtų vartoti ant odos, farmakopėjinės kategorijos
ir reikalavimai
Dermatologijos praktikoje ir preparatų asortimente naudojami įvairūs preparatai: nuo kietų, pusiau kietų iki skystų vaisto formų. Dermatologinė vaisto forma priimtina vartotojui yra tokia, kuri – lengvai išimama/išspaudţiama iš talpyklos, pasiţymi optimaliais tekstūros poţymiais: lengvai ir lygiai tepasi, nepalieka likučių ant odos, nesukelia nepriimtino lipnumo pojūčio, nedirgina odos, taip pat pasiţymi indiferentinėmis juslinėmis savybėmis ir yra lengvai nuplaunama nuo odos ir drabuţių.
Puskiečiai preparatai pagal vartojimo sritį priskiriami dermatologinių preparatų grupei. Remiantis Europos farmakopėja (Ph Eur 01/2008:0132) pusiau kieti preparatai vartojami ant odos [12], skirti gauti veikliųjų medţiagų vietinį poveikį ar poveikį per odą, minkštinantį ar apsauginį veikimą. Jie yra homogeniškos išvaizdos. Pusiau kietų preparatų, skirtų vartoti ant odos, sudėtyje gali būti paprastas ar sudėtinis pagrindas, kuriame būna ištirpinta ar disperguota viena ar daugiau veikliųjų medţiagų. Priklausomai nuo sudėties, pagrindas gali turėti įtakos preparato veikimui. Pagrindas gali būti sudarytas iš natūralių ir sintetinių medţiagų, gali būti vienafazis arba daugiafazis. Priklausomai nuo pagrindo prigimties preparatas gali turėti hidrofilinių arba hidrofobinių savybių, jame gali būti pagalbinių medţiagų, pvz. antimikrobinių konservantų, antioksidantų, stabilizatorių, emulsiklių, tirštiklių ir kitų medţiagų. Pusiau kietų preparatų pagrindo sudėtis turi suteikti modeliuojamam preparatui ne tik puskietę konsistenciją, bet ir atlikti veikliųjų medţiagų nešėjo vaidmenį [7,13,14,].
Pagal Europos farmakopėją [12], viena iš skiriamų kelių pusiau kietų preparatų vartoti ant odos kategorijų - kremai. Priklausomai nuo savo struktūros kremai yra tąsūs, elastingi ir elgiasi ne niutoniškai, pvz., yra plastiški, pseudoplastiški, teka stipriai spaudţiant [12,15].
Kremas - tai sudėtinis preparatas, į kurio sudėtį įeina keletas skirtingų organinių medţiagų (aliejų) ir vanduo, kuris daţniausiai būna konservantas. Kremai turi keletą būdingų savybių:
1. Baltos spalvos ir iš dalies riebios tekstūros;
2. Pagalbinės medţiagos gali sukelti alergiją, sudirginimą; 3. Platus vartojimo/ naudojimo spektras;
4. Labai gerai toleruojamas dėl savo pagrindo savybių;
5. Greita absorbcija vartojimo vietoje leidţia greitai pasiekti norimą efektą; 6. Daţniausiai vartojami raukšlėtose zonose ( rektalinė zona, kirkšnis) [8].
15
Kremams keliami tokie patys fiziko-cheminiai reikalavimai, kaip ir kitoms pusiau kietoms vaistų formoms, vartojamoms ant odos: aktyvių sudedamųjų dalių stabilumas; pagalbinių medţiagų stabilumas; reologinės savybės – konsistencija, klampumas-elastingumas, takumas; lakių medţiagų, įskaitant vandenį, netekimas; fazių pokyčiai – nevienalytiškumas, atsiskyrimas; dispersinės fazės dalelių dydţio pasiskirstymas; pH reikšmė; uţterštumas dalelėmis [7,12,15].
3.4. Ingredientų įtaka preparatų tekstūrai
Kremai, skirti išoriniam naudojimui, turi būti kosmetiškai/estetiškai priimtini pacientams. Šie kremai yra skirstomi į du tipus: a/v tipo kremai, kurie yra sudaryti iš smulkių aliejaus lašelių, pasiskirsčiusių vandeninėje fazėje, ir vanduo aliejuje (v/a) tipo kremai, kurie yra sudaryti iš smulkių vandens lašelių, pasiskirsčiusių aliejinėje fazėje. A/v tipo kremai yra patogesni ir labiau priimtini, nes jie yra lengvesnės tekstūros ir geriau nuplaunami vandeniu. V/a tipo kremai yra sunkiau nuvalomi, bet sudėtyje turi daugiau vaistinių medţiagų, kurios yra įterpiamos į kremus. Iš hidrofobinių kremų ingredientai yra lengviau ir greičiau atpalaiduojami negu iš a/v tipo kremo. Tačiau norint išgauti prolonguotą preparato veikimą, efektą, geresnis yra a/v tipo kremas. Atlikto tyrimo metu į emulsinių kremų [16], su albumino mikrosferose įterptu vitaminu (vit.) A ir be mikrosferų įvesto vit. A išsiskyrimas. In vivo tyrimo metu 6 savanorių rezultatai parodė, jog mikrosferos gali likti ant odos kurį laiką, taip prailgindamos norimą terapinį efektą [7,15,17,18].
V/a kremai yra labiau drėkinantys, nes jie suteikia riebalinę plėvelę, kuri sumaţina vandens netekimą per raginį odos sluoksnį. A/v emulsijos naudingiausios kaip prausikliai, tuo tarpu v/a emulsijos yra minkštinančios ir valančios. Pacientai daţnai renkasi v/a kremą, o ne tepalą, nes kremas lengviau tepamas, yra maţiau riebus, o garuojantis vanduo ramina karščiuojantį audinį. A/v kremai susigeria į odą: dispersinė fazė išgaruoja ir padidina vandenyje tirpios vaistinės medţiagos koncentraciją. Vaisto koncentracijos gradientas raginiame sluoksnyje didėja, skatindamas perodinę absorbciją. Norint sumaţinti vaistinės medţiagos nusėdimą, galima panaudoti maţiau lakų, su vandeniu besimaišantį pagalbinį tirpiklį. A/v kremas yra neokliuzyvinis, kadangi jis nesudaro ištisinės vandens nelaidţios skysčio plėvelės [7,15].
Sunku prognozuoti vaidmenį tekstūrai, kurį emulsinis pagrindas vaidina perodinėje absorbcijoje, nes tai priklauso nuo: veikliosios medţiagos pasiskirstymo tarp emulsijos fazių; konservantų pridėjimo; difunduojančių molekulių klampumo nustatymo; emulsijos aplikacijos metu skilimo ant odos galimybių. Kremai gali būti naudojami: 1. uţtvaros sudarymui, kad apsaugoti odą. Gali būti fizinė ir cheminė uţtvara; 2. drėgmės išsaugojimui (ypač v/a tipo kremai); 3. valymui
16
(dezinfekavimui); 4. minkštinimo poveikiui; 5. kaip vaistinių medţiagų priemonė, tokių kaip vietinių anestetikų, priešuţdegiminių (NVNU ar gliukokortikoidų), hormonų, antibiotikų, priešgrybelinių ar antihistamininių vaistų [7,14,16,18,19].
Preparatuose esančios medţiagos į odą patenka dviem būdais:
1) Pro odos poras ir plaukų maišelius. Čia Reino barjero nėra ir šiuo keliu praeina visos medţiagos, kurioms praeiti trukdo būtent blizgusis sluoksnis.
2) Pro epidermio ląsteles ir tarpląsteline erdve. Šiuo keliu besiskverbiančios medţiagos turi nugalėti Reino barjerą, t.y. po raginiu esantį blizgųjį sluoksnį. Pastarojo meto mokslinių tyrimų duomenimis Reino barjeras praleidţia tik lipidus, riebaluose tirpias medţiagas, fermentus, amino rūgštis, gliukozę, spindulius ir dujas. Todėl tiriant odos ekosistemą ir kuriant kosmetinius produktus, Reino barjero reikšmę sunku pervertinti [4,7,11,16,17,18].
Vietinio produkto (kosmetinio preparato) pH reikšmė gali pasikeisti laikymo metu, todėl būtina atsiţvelgti, ne tik į medţiagų savybių charakteristikos apibūdinimą tekstūrai, bet ir jau pagaminto preparato poveikiui. Todėl labai svarbu uţtikrinti pH reikšmės pastovumą viso produkto kūrime ir panaudojimo sferose.
3.5. pH reikšmės įtaka preparatams, jų terapiniam poveikiui
Kaip minėtame 3.1 skyriuje, kad kurdami kosmetinius preparatus, pirmiausia vertiname jų poveikį epidermio barjerui, kadangi jis yra lengvai paţeidţiamas ir suardomas. Epidermio pH reikšmės balanso sutrikdymas savo ruoţtu neigiamai paveikia odą. Paţeidus raginį sluoksnį, jis atkuriamas per 5 dienas. Apsauginė odos plėvelė yra rūgšti (4,5 - 5,8), bet daţnas spirito naudojimas pH reikšmę paslenka į šarminę pusę, taip sudarant epidermio barjero disbalansą. Taip gali suaktyvėti grybelinių ligų bei spuogų atsiradimas, todėl labai svarbu atsiţvelgti į preparatų pH reikšmės nustatymą ir terapinį poveikį [4,6,11].
Svarbus Sheraz MA ir kitų bendraautorių tyrimas [20], kuriuo buvo tiriamos askorbo rūgšties (AR) v/a kremų formavime ypatybės, esant pH reikšmei 4 - 6, naudojant skirtingus riebiklius ir drėkiklius. Preparatai buvo laikomi tamsoje, esant 30 ° C temperatūroje, 3 mėnesių laikotarpyje, o po to buvo tiriamas jų cheminis ir fizikinis stabilumas. Gauti rezultatai buvo tokie: kremų pH reikšmė turėjo įtakos AR stabilumui: buvo nustatyta, jog pH reikšmės padidėjimas taip pat padidina nestabilumo riziką. Tarp visų kremų, kurių sudėtyje buvo ricinos aliejaus - kaip minkštiklio ir glicerino - kaip drėkiklio, parodė aukščiausią klampumą ir maţiausį stabilumą palyginti su kremais, kurių sudėtyje yra kitų pagalbinių medţiagų. CR buvo nustatyta, kad gali
17
sumaţinti AR nestabilumo normas visose kremuose. Fizikinės AR ir CR mišinių savybės, tirtos spektrometrijos metodu, neparodė sąveikos tarp dviejų junginių.
Apibendrinant galima teigti, kad pH reikšmė emulsinių sistemų preparatuose yra viena iš tiesiogiai priklausančių rodiklių jų fiziko-cheminėms savybėms bei terapiniam poveikiui.
3.6. pH reikšmės įtaka preparato taikymui
pH reikšmė turi įtakos ne tik odai, o taip pat dermatologinio preparato savybėms ir/ar terapiniui poveikiu. Dar svarus faktorius yra preparato taikymo galimybės, kurios praktikoje yra labai plataus spektro. Vertinant tai, jog apsauginė odos plėvelė yra rūgštinė (pH 4,5-4,8 - 5,8), bet daţnai valant spiritu - pH reikšmė pasislenka į šarminę pusę, taip susilpninant barjerinę epidermio funkciją, todėl gali suaktyvėti grybelinių ligų bei spuogų atsiradimas. Todėl svarbu tinkamai parinkti pH reikšmę preparatams, kurių vidurkiai yra pateikti 1 lentelėje [4,10,21,22,23]:
1 lentelė. pH reikšmių vidurkiai dermatologinėse priemonėse [9]
Kosmetikos priemonė pH reikšmės vidurkis
Veido tonikas 5,5
Valymo priemonės 6
pH rūgštingumas matuojamas pagal vandenilio jonų koncentraciją tirpale. Didėjant pH reikšmei, rūgštingumas maţėja, neutralus tirpalas yra tada, kai pH reikšmė būna apie 7, o esant didesnei pH reikšmei, jis tampa šarminiu. Idealus normalios moterų odos riebalų ir vandens apsauginės mantijos pH reikšmė siekia 5,5, vyrų – 5. Jeigu pH reikšmė ţemesnė negu nurodyta (1 lentelė), oda blogai sugeria drėgmę ir yra sausa. Jeigu pH reikšmė aukštesnė, oda – nevienoda,
Apsauginiai ir odos prieţiūros preparatai pH reikšmės vidurkis
Sausai odai 6
Normaliai odai 5,5
Riebiai odai 5
Mišriai odai 5
Kūdikio odai 5
Preparatai nuo inkštirų ir nešvarumų 3-4
18
tada pH reikšmė siekia 6-7 ir odoje gali veistis ligų sukėlėjai, taip paţeisdami jos apsauginę funkciją. Odos pH reikšmės poslinkis į šarminę reakciją skatina prasidėti pūlingų ir grybelinių ligų pradţią [1]. Tai – labai riebių odos dalių problema, kaip būna nevienodos mišrios arba riebios odos atveju. Nešvarios odos pH reikšmė – 6–8, inkštirų turinčios odos – daţniausiai 7–8, pūlinių turinčios odos – 7,5–9. Kūdikių odos pH reikšmė – 5 [4,9,11,10,21].
Įvertinę pH reikšmių priklausomybę pagal skirtingus poreikius (ligos, lytis, amţius ir kt.), galime optimaliai pritaikyti dermatologinius preparatus pacientams, gerinant terapinio veikimo mechanizmus ir pasveikimo lygį.
3.7. Pagrindinės kremų sudedamosios dalys
Vanduo – pagrindinė visų kremų sudėtinė dalis, vartojama kaip medţiagų tirpiklis. Vanduo yra ir odos drėkiklis, bet oda "išorinio" vandens geba pasisavinti vos 10-30% [24]:
Dauguma gamintojų naudoja paprastą distiliuotą vandenį (INCI: Aqua);
Rečiau naudojamas mineralinis jūros vanduo (INCI: Maris aqua) ar vandenį pakeičiantys distiliuoti augalų ekstraktai, arba hidrolatai, (pvz. INCI: Lavandula angustifolia water;
extract) [24,25,26].
Lipidai (riebalai) – kitas svarbiausias ingredientas. Jie turėtų padėti išlaikyti odos drėgmę, ją suminkštinti ir maitinti- tokiomis savybėmis pasiţymi tik kokybiški šalto spaudimo nerafinuoti aliejai, tačiau rafinuoti produktai ir/ar sintetiniai pakaitalai yra pigesni, stabilesni, savo organoleptinėmis savybėmis priimtinesni – nekeičia produkto spalvos, konsistencijos, neprideda jam kvapo:
daţniausiai naudojamas pigiausias cheminis produktas – mineralinė alyva (INCI: paraffinum
liquidum, petrolatum, mineral oil; vaseline; paraffin);
sintetiniai - silikonai (INCI: dimetchicone, cyclomethicone);
chemiškai pakeisti, hidrinti ar frakcionuoti augalinės kilmės lipidai (INCI: palmitic acid,
PEG- 60 hydrogenated castor oil, gliceryl linoleate);
gyvulinės kilmės lipidai (INCI: lanolinum) [24,25,26].
Kone visi gaminami kosmetikos produktai, pvz.: kremai, iš esmės yra v/a arba a/v tipo emulsijos. Emulsijos stabilumui išlaikyti yra būtini emulsikliai.
19
Emulsikliai (INCI pvz.: Ceteareth-10, Cocamide, Carbamide) odai yra ne tik kad nenaudingi, bet ir ţalingi kremo ingredientai, kurie sutrikdo normalias odos funkcijas. Tai įrodo Koch E. ir kt. atliktas tyrimas [27], kurio metu buvo nustatoma (pH reikšmės 4 ir 8) įtaką veikliųjų medţiagų terapiniam poveikiui sveikai ir paţeistai odai. Atlikti tyrimai abiejų tipų odai reikšmingų skirtumų tarp kremų, kurių pH reikšmės 4 ir 8 nenustatė. Tačiau palyginus kremus su 10 % karbamido kremu (pH reikšmė 8) ir 10 % ir 5 % pieno rūgštimi pacientai paţymėjo, jog pajuto dirginanti pojūtį, diskomfortą. Išimtis yra natūralios kilmės emulsiklis – nerafinuotas bičių vaškas (INCI: cera flava/cera alba), kurį naudojant oda gauna bioaktyvių medţiagų – vitaminų, propolio, medaus ir kt. Emulsikliai daţniausiai yra vaškinės prigimties medţiagos, todėl odos raginiame sluoksnyje sulipina paviršines negyvas ląsteles, kurios sudarydamos vis storesnį dangalą, keičia odos spalvą (pilkėja). Tai sutrikdo natūraliai atsinaujinti epidermiui (paviršiniam odos sluoksniui) [24,25,26].
Kad emulsija išliktų stabili, o kremas, turėtų visas savybes, būdingas gerai tekstūrai apibrėţti: lengvas ir purus, pasiţymėtų gera skvarba, negestų ir išliktų stabilus keletą metų, be emulsiklių naudojama daug kitų vadinamųjų funkcinių ingredientų. Jie skirti tik tam, kad būtų išsaugotas estetiškai patrauklus kremo pavidalas, tekstūra ir kad jį būtų malonu teptis, todėl medţiagų, skirtų kosmetikos ilgalaikei produkto išvaizdai ir formai palaikyti, kremuose naudojama daugiausiai. Tai daugiausia sintetinės medţiagos - emulsikliai, rišikliai, stabilizatoriai, tirpikliai, antioksidatoriai, konservantai, daţikliai, kvapikliai ir t.t. [24,25,26].
Aktyvieji ingredientai – emolientai - minkštikliai, tonikai, drėkikliai, vitaminai antioksidantai, odą balinančios, raukšles lyginančios, elastingumą palaikančios ir gyvybinius ląstelių procesus skatinančios medţiagos, kurios praturtina ir papildo kremų sudėtis. Šios aktyviosios medţiagos naudojamos pagal konkrečius poreikius: odos degeneracijai skatinti, atkurti paţeistą odą, pigmentinių dėmių gydymui ir prevencijai ir t.t. [24,25,26].
Ţinodami sudėtinių dalių funkcijas ir paskirtį, galime varijuoti ne tik tarp preparatų sudėties parinkimo, apspręsti preparato funkcijas ir/ar paskirtį, bet taip pat sukurti norimos tekstūros produktą, kuris pagal poreikius: terapinius, kosmetinius ir kt. gali būti toliau vystomas pramonėje.
3.8. Poligliceril-4-laurato/ sukcinato panaudojimas odos preparatų kūrime
NatraGem E145 NP [28] - yra natūralios kilmės, aukštos kokybės a/v tipo emulsiklis, idealiai tinka kurti natūralius/ekologiškus kremus ir losjonus kosmetikos pramonėje. NatraGem
20
E145 NP - Poligliceril-4-lauratas/sukcinatas ir vanduo (2 lentelė). Taip pat tinka naudoti karšto-
šalto ciklo emulsijos gamybos technologijoje. Šis produktas yra suderinamas su didelio ir maţo poliariškumo aliejais ir rodo puikią elektrolitų, pH reikšmės ir temperatūros toleranciją [26,28,29].
2 lentelė. NatraGem E145 NP pagalbinių medžiagų funkcijos [28]
Pagalbinės medţiagos pavadinimas Funkcija
Poligliceril-4-lauratas/ sukcinatas a/v tipo emulsiklis
Vanduo Tirpiklis
Naudojant poligliceril-4-lauratą/sukcinatą galima suformuot stabilų a/v tipo kremą ar losjoną, esant tiek aukšto, tiek ţemo poliariškumo aliejams. Atliekant tyrimus poligliceril-4-lauratas/sukcinatas buvo palygintas su dviem daţniausiai naudojamais emulsikliais: Polisorbatu 60 ir Stearatu - 20. Vertinant dviejų skirtingo poliariškumo a/v tipo emulsijų stabilumą su poligliceril-4-lauratu/sukcinatu, buvo pagamintos su kiekvienu emulsikliu atskirai, naudojant oktano/dekano trigliceridą (20.06 MPa½) - aukšto poliariškumo aliejų ir kitą formuojant su mineraliniu aliejumi, kuris pasiţymi ţemu poliariškumu (15.55 MPa½). Tyrimas vyko 3 mėnesius, esant 40 °C temperatūroje. Rezultatai parodė, jog poligliceril-4-lauratas/sukcinatas taip pat gali sudaryti stabilias emulsijas iš elektrolitų ar kitų nestabilių medţiagų buvimo, nes jo struktūros modelis yra hidrofilinės grupės pagrindas, lyginant su Stearatu - 20 , o su Polisorbatu 60, net stabilesnes [28].
Atlikus literatūros šaltinių apţvalgą, kremų tekstūrai turintys faktoriai yra įvairūs: odos savybių, ingredientų ypatybės ir kt. Jie yra plačiai išnagrinėti, literatūros šaltinių medţiaga dėl jų įtakos kremų tekstūrai yra gana vienoda.
Susipaţinus su moksline literatūra apie pH reikšmių įtaką kremų tekstūroms, buvo nustatytas nuomonių prieštaringumas apie normalios odos pH reikšmių neatitikimus. Tai apsunkina kuriamų kremų terapinio veiksmingumo optimizavimą bei tokių preparatų pritaikymą.
Literatūros apţvalga parodė, kad kremų kūrimui naudojant poligliceril-4-lauratą/sukcinatą jų tekstūros priklausomybė nuo pH reikšmių nėra pilnai ištirta.
21
4. TYRIMO METODIKA
4.1. Tyrimo planavimas
Apţvelgus literatūros šaltinius ir pritaikius įgytas ţinias, pasirinktos tiriamųjų mėginių su poligliceril-4-laurato/sukcinato koncentracijų ribos nuo 1% iki 5%. Lipofilinei fazei pasirinkti dviejų tipų aliejai : alyvuogių ir balto, minkšto parafino, kad patvirtinti, jog tiriamasis emulsiklis geba sudaryti patvarias emulsines sistemas su abiejais pagrindų tipais. Laboratorijoje pritaikius moderniausią aparatūrą ir prietaisus ekstemporaliu būdu turi būti pagaminti mėginiai ir išmatuotos jų kontrolinės pH reikšmės.
Siekiant įrodyti emulsinių sistemų patvarumą ir stabilumą, esant nustatytoms pH reikšmėms, buvo planuoti atlikti šie tyrimų metodai: mikroskopavimo tyrimas, taip patvirtinant a/v tipo emulsinės sistemos tapatybę ir nustatyti emulsinių lašelių dydį.
Centrifugavimo tyrimo metu planuojama patvirtinti emulsinių sistemų su skirtingų koncentracijų poligliceril-4-lauratu/sukcinatu patvarumą ir stabilumą mechaninei paţaidai.
Viskozimetrinio tyrimo metu bus tiriama emulsiklio koncentracijos priklausomybė esant skirtingai lipofilinei fazei, o šaldymo - šildymo ciklo tyrimo metu - temperatūros priklausomybę nuo poligliceril-4-laurato/ sukcinato koncentracijos pasirinktuose lipofilinėse fazėse.
Taip pat planuojama atlikti anketavimą, kuriame bus anonimiškai apklausta 100 respondentų nuomonė apie skirtingų poligliceril-4-laurato/sukcinato koncentracijų įtaką mėginių organoleptinėms savybės: susigėrimui, pojūčiui po pavartojimo, spalvai ir kt. Atrinkus geriausiai įvertintus mėginius, bus atlikti jų tekstūros ir tepumo tyrimai, kur prieš tai buvo nustatytos pagamintų skirtingų mėginių pH reikšmių (rūgštinis/šarminis) rodiklis. Gauti rezultatai bus statistiškai apdoroti ir įvertinti.
4.2. Tyrimo objektas
Emulsinės sistemos su skirtingais emulsiklio poligliceril-4-laurato/sukcinato kiekiais, esant skirtingai lipofilinei fazei (balto, minkšto parafino ir alyvuogių aliejaus).
22
4.3. Tyrimo metodai
4.3.1. Kremų gamyba su poligliceril-4-lauratu/ sukcinatu
A/v tipo tiriamieji kremai gaminami masės metodu. Prieš tai visos tyrime reikalingos medţiagos yra pasveriamos svarstyklėmis SCALTEC Scaltec Instrument GmbH, (Vokietija). Lipofilinė fazė 80 % (sintetinė, augalinė) yra šildoma ant kaitinimo plytelės SB160 (Stuart, UK) iki 70°C ± 2°C temperatūros, matuojant termometru TFA Digitales Kontroll - Thermometer, (Vokietija), įmaišant 1%, 2%, 3%, 4%, 5% emulsiklį poligliceril-4-lauratą/sukcinatą, o hidrofilinė fazė yra 5 % glicerolio tirpalas 20 mililitrų (ml) distiliuoto vandens, kaitinant ant kaitinimo plytelės SB160 (Stuart, UK) iki 70°C ± 2 °C temperatūros, matuojant termometru TFA Digitales Kontroll- Thermometer, (Vokietija) ir ant vandens - glicerolio paviršiaus uţbarstomas klampos modifikatorius - ksantino guma. Į hidrofilinę fazę buvo porcijomis pilama lipofininė fazė, maišoma iki homogeniškos masės. Gautas kremas dar kartą gerai išmaišomas naudojant rotacinę maišyklę Heidolph RZR 2020, (Vokietija), esant 500 apsisukimų per minutę (aps./min), 2 min.
4.3.2. Kremų pagrindų mikroskopinis tyrimas
Pagamintų pavyzdţių dalelės stebimos optiniu mikroskopu Motic® BA310 Ltd.( Kinija), naudojantis kompiuterine programa Motic® Images Plus. Skirtingų koncentracijų bandiniai yra paruošiami, dedant ant objektinio stiklelio labai ploną kremo sluoksnį ir prispaudţiant dengiamuoju stikleliu. Apţiūrima ir matuojamas padidinus 100 kartų. Optinis mikroskopas per kamerą sujungtas su kompiuteriu. Mikroskopinio stebėjimo metu daromos tiriamųjų preparatų nuotraukos.
4.3.3. Kremų stabilumo tyrimas, taikant centrifugavimą
Vienas iš a/v tipų kremų stabilumo parametrų nustatymo rodiklių yra centrifugavimo tyrimas. Jis atliekamas norint įsitikinti, ar pagaminta pusiau kieta vaisto forma yra stabili, ar neatsiskiria dispersinės fazės pagal parinktą receptūrą bei naudojant naują emulsiklį poligliceril-4-lauratą/sukcinatą. Į mėgintuvėlius, kur vieno mėgintuvėlio masė 1,2 gramai (g), įdedama tiriamųjų pavyzdţių kiekis. Centrifuguojama centrifugoje High speed centrifuge type 310, (Vokietija) 1500 ir
23
3000 aps/min, 5 min. Sistemos stabilumas vertinamas vizualiai pagal aliejinės ir vandeninės fazių atsiskyrimą.
4.3.4. Kremų emulsinių sistemų viskozimetrinis tyrimas
Tiriamųjų mėginių vienodas kiekis (50g ± 0,01g) yra patalpinamas į vienodo dydţio laboratorinius indus ir gerai sumaišomas. Pagamintų bandinių klampa yra matuojama viskozimetru Selekta P ST-2010 Abrera, (Ispanija). Aparate nustatome reikalingus parametrus: matavimo laikas 10 sekundţių (s), esant spindulio apsisukimui 50 aps/min. Kiekvieno mėginio bandymą atskirai kartojame po 3 kartus, esant kambario temperatūrai (20°C ± 2°C).
4.3.5. Šaldymo – šildymo ciklo tyrimas
Į 2 ml tūrio 5 mėgintuvėlius įdedama vienodas tiriamųjų kremų kiekis po 1g. Kiekvienas kremo mėginys tiriamas po penkis kartus. Mėginiai parą patalpinami į šaldiklį (-18°C ± -1°C). Po to parą laikomi kambario temperatūroje ( 20°C ± 2°C) . Sistemos stabilumas vertinamas pagal vandeninės ir aliejinės fazių atsiskyrimą. Ciklas kartojamas tol, kol pasireiškia mėginių nestabilumas (5 kartus).
4.3.6. Organoleptinių savybių vertinimas
Standartiniai organoleptinių savybių kriterijai yra šie: spalva, kvapas, tepumas, klampumas, kietumas, lipnumas ir kt. ir yra nustatomi ne tik kokybiniu, bet ir kiekybiniu produkto tekstūros įvertinimu. Šie kiekybiniai duomenys padeda atsiţvelgti į trūkumus ir pagerinti dermatologinių produktų savybių kokybės vertinimo kriterijus, esant tam tikrai tikslingai odos prieţiūros priemonių grupei. Kiekvienas įvertinimas yra rodmuo, jog produktas pasirinktas dėl savo prieinamumo, juslinių savybių indiferentiškumo, tekstūros savybių pastovumo ar kitų kriterijų [30].
Norint įvertinti pagamintus mėginius su poligliceril-4-lauratu/sukcinatu buvo pasirinkta atlikti anketavimą, kad suţinotume, kokie mėginiai yra geriausiai vertinami pagal juslinio vertinimo kriterijus.
Tiriamųjų emulsinių kremų su poligliceril-4-lauratu/sukcinatu anketiniame tyrime dalyvavo 100 respondentų, kurie buvo apklausiami vaistinėje, pirkę ar domėjęsi apie dermatologinius kremus.
24
Tyrimui atlikti gautas LSMU Bioetikos centro leidimas - Nr. BEC-FF-21 (1 priedas). Tyrimui buvo sudaryta anoniminė anketinė apklausa (2 priedas). Anketoje buvo pateikta 13 klausimų, kurie buvo uţdarojo tipo, t.y. respondentas galėjo pasirinkti vieną ir/ar keletą iš pateiktų atsakymo variantų.
Prieš atliekant anketinį tyrimą buvo atlikta anketos validacija - anketos pavyzdys buvo pateiktas 15 ţmonių tikslu įsitikinant, ar anketoje pateikti klausimai yra suprantami ir aiškūs. Gavę pastabas, anketą pakoregavome.
Anketos struktūrinės dalys:
1. Įvadinė dalis, kurioje trumpai prisistatoma ir paaiškinama, kokiu tikslu ir kam yra atliekama apklausa. Taip pat trumpa uţpildymo informacija.
2. Klausimai apie bendrą respondentų kremų naudojimą ir mėginių su poligliceril-4-lauratu/ sukcinatu organoleptines savybes, prieš tai praktiškai juos pabandę.
3. Bendra informacija apie respondentą: lytis, amţius.
Testuojami mėginiai buvo pateikiami plastikiniuose induose, su aiškiomis sudėties etiketėmis, taip pat pateikiama buvo medinė mentelė, kad neuţterštų tiriamųjų mėginių mikroorganizmais. Po kiekvieno mėginio vertinimo respondentams buvo sudarytos sąlygos nusivalyti rankas popieriniu rankšluosčiu [31].
4.3.7. Kremų su poligliceril-4-lauratu/sukcinatu pH reikšmės tyrimas
Norėdami nustatyti pH reikšmės įtaką, labiausiai respondentams patikusiuose poligliceril-4-laurato/sukcinato koncentracijų mėginiuose, tekstūrai, turime pasigaminti skirtingų pH reikšmių kremus. Bandymas atliekamas pHmetru Cyberscan pH/mV/oC Meter EUTECH Instrument, (Olandija). Tiriant bandinių pH reikšmes, į tiriamąjį mėginį įkišamas elektrodas, o prietaiso ekrane parodoma pH reikšmė: jei norima rūgščios terpės, dedame 90% pieno rūgšties, o jei šarminės terpės - 0,1N natrio hidroksido tirpalo. Prieš kiekvieną matavimą ir po kiekvieno mėginio matavimo pHmetras nuplaunamas vandeniu. Bandymas kartojamas 5 kartus.
4.3.8. Kremų tekstūros analizė
Skirtingos pH reikšmės kremų pagrindų (6 lentelė) tekstūra analizuojama naudojantis Stable micro systems manual TA.Xtplus, (UK) aparatu. Tiriamieji pavyzdţiai su skirtingomis pH reikšmėmis, patalpinti į vienodos talpos ir dydţio indelius, padedami ant specialios tekstūros
25
analizatoriaus plokštumos - platformos. Kompiuterinėje programoje pasirenkamas testas: išstūmimo (angl. back extrusion), kai išmatuojama jėga (g) tiriamojo pavyzdţio suspaudimo metu. Nustačius reikiamus parametrus prietaisas pradeda dirbti - strypelis su plokštele nusileidţia 25 (milimetrų) mm ţemyn į tiriamąjį mėginį 1 milimetro per sekundę (mm/s) greičiu (mėginių temperatūra – (20°C ± 2°C) ir pakyla į viršų. Tuo tarpu kompiuterinėje programoje automatiškai yra nubraiţomas grafikas ir uţrašomi tyrimo rezultatai duomenų lentelėse.
Emulsinių pagrindų tekstūros išsamesnei analizei taip pat buvo atliktas tepumo tyrimas. Tepumo testui (angl. spreadability) parenkamas stiklinis kūgio formos zondas HDP/SR. Šiam tyrimui atstumas buvo pasirinktas 50 mm, o greitis 3mm/s. Taip pat aparatas nustatė preparatų klampos parametrus [17].
4.4. Duomenų analizės metodai
4.4.1. Statistinė analizė
Tyrimų metu gauti duomenys apdoroti, naudojant programinį statistinių duomenų paketą GraphPad Prism 6 ir Microsoft® Office Excel 2007m. programą, kad būtų galima statistiškai įvertinti gautų duomenų patikimumą ir reikšmę tolimesnių tyrimų rekomendacijoms teikti.
26
5. REZULTATAI IR JŲ APTARIMAS
5.1. Poligliceril-4-laurato/sukcinato įtaka emulsinės sistemos kūrimui
Tyrimo metu buvo svarbu, jog poligliceril-4-lauratas/sukcinatas sudarytų stabilią emulsinę sistemą kremuose. Kremų sudėtis buvo modeliuojama keičiant bei parenkant optimalią poligliceril-4-laurato/sukcinato koncentraciją ir ingredientų proporcijas, kurios pateiktos 3 lentelėje. Gauta 10 kremo mėginių, kurie nuo N1-N5 buvo balto, minkšto parafino (1% ,2%, 3%, 4%, 5%), o N6-N10 - alyvuogių aliejaus (1% ,2%, 3%, 4%, 5%).
3 lentelė. A/v tipo emulsinių kremų receptūros sudėtys
Pagaminti emulsinės sistemos kremų mėginiai buvo patikrinti centrifugavimo testu (4 pav). Mėginių su baltu, minkštu parafinu (1%, 2%, 3%, 4%, 5%) kvapas buvo indiferentinis, Kremų numeris Poligliceril-4-laurato/sukcinato koncentracija, % Aliejaus kiekis (*balto, minkšto parafino, **alyvuogių), g Vandens kiekis, g Glicerolio kiekis, g Ksantino gumos kiekis, g N1 1 % 74* 20 5 0.6 N2 2 % 73* 20 5 0.6 N3 3 % 72* 20 5 0.6 N4 4 % 71* 20 5 0.6 N5 5 % 70* 20 5 0.6 N6 1 % 74** 20 5 0.6 N7 2 % 73** 20 5 0.6 N8 3 % 72** 20 5 0.6 N9 4 % 71** 20 5 0.6 N10 5 % 70** 20 5 0.6
27
baltos spalvos, purios konsistencijos. Alyvuogių aliejaus pagrindo mėginiai (1%, 2%, 3%, 4%, 5%) turėjo alyvuogių aliejui būdinga gelsvą spalvą, specifinį kvapą, bet taip pat pasiţymėjo puria konsistencija. Nustatytos mėginių ir pH reikšmės, kurios pateiktos 4 lentelėje:
4 lentelė. Poligliceril-4-laurato/ sukcinato koncentracijos lipofilinėje fazėje įtaka pH reikšmei, N=3
Skirtingos emulsiklio poligliceril-4-laurato/sukcinato koncentracijos mėginių pagrinduose pH reikšmės reikšmingai nesiskyrė tarp lyginamų lipofilinių fazių. Pagal gautus rezultatus matome, jog pH reikšmės, esant lipofilinei fazei: baltam, minkštam parafinui varijuoja tarp (4,69 – 4,77 ± 0,08), o alyvuogių aliejaus (4,56 – 4,68 ± 0,08).
Galime daryti prielaidą, jog lipofinė fazė turėjo įtakos tokiam pH reikšmių pasiskirstymui, nes NatraGem E145 NP produkto specifikacijoje pH reikšmės įtaka kremų pagrindui nėra nurodyta.
5.2. Emulsinių sistemų su poligliceril-4-lauratu/sukcinatu mikrostruktūra
Siekiant pagaminti kokybišką ir stabilią emulsinę sistemą kreme, reikia įvertinti jos mikroskopines savybes, kur viena iš svarbiausių - lipofilinės fazės lašelių dydis. Kuo maţesni emulsijos lašeliai, tuo pagamintas emulsinio a/v tipo kremas yra stabilesnis. Mūsų pasirinkta naujos kartos klampą modifikuojanti/emulsuojanti medţiaga - poligliceril-4-lauratas/sukcinatas palengvina produkto emulsavimo procesą, suteikdama emulsijos lašeliams reikiamą dydį ir stabilumą. Dėl šių savybių
Poligliceril-4-laurato/ sukcinato koncentracija, %
Lipofilinės fazės:
Alyvuogių aliejus Baltas, minkštas parafinas
1 % 4,66 ± 0,08 4,72 ± 0,08
2 % 4,60 ± 0,08 4,77 ± 0,09
3 % 4,59 ± 0,09 4,69 ± 0,09
4 % 4,56 ± 0,08 4,7 ± 0,08
28
patvirtinimo tyrimu metu galima pagrįsti arba paneigti, jog pasirinktos skirtingos poligliceril-4-laurato/ sukcinato koncentracijos kremuose geba sudaryti patvarią ir stabilią emulsinę sistemą, esant nustatytai pH reikšmei.
Skirtingų lipofilinių fazių poligliceril-4-laurato/ sukcinato koncentracijų mikroskopavimo vaizdinė medţiaga parodyta 2 paveiksle:
A B C D E
F G H I J
2 pav. Balto, minkšto parafino (A,B,C,D,E) ir alyvuogių aliejaus (F,G,H,I,J) emulsinio pagrindo mikroskopinis vaizdas; Didintas 100 kartų;
Mikroskopavimo tyrimo metu patvirtinome a/v tipo emulsinės sistemos tapatybę: uţlašinus lašą distiliuoto vandens hidrofilinėje fazėje pasiskirstė aliejiniai lašeliai, kurių vaizdo fragmentus matome 3 paveiksle. Stebint mikroskopinį vaizdą abiejų tiriamųjų lipofilinių fazių lašelių dydţiai yra tolygiai pasiskirstę ir maţai skiriasi savo dydţiu, nors pH reikšmė kiekvienam mėginiui yra skirtinga.
29
3 pav. Emulsinių lašelių dydžio priklausomybė nuo poligliceril-4-laurato/sukcinato koncentracijos alyvuogių aliejaus mėginiuose, kurių pH reikšmė (4,56-4,68±0,08) *p<0,05,
vs su balto, minkšto parafino mėginių, kurių pH reikšmė (4,69-4,77±0,09)
Didţiausius emulsinių lašelių dydţio vidurkio rezultatus gavome 4 % balto, minkšto parafino, kurio pH reikšmė 4,7 ± 0,08 (2,812 ± 0,082 mm) ir 5 % balto, minkšto parafino, kurio pH reikšmė 4,75 ± 0,09 (2,806 ± 0,123 mm) pavyzdţiuose. Šie mėginiai pasiţymėjo stabilumu ir patvarumu kaip ir kiti balto, minkšto parafino ar alyvuogių aliejaus pagrindo mėginiai, nors emulsinių lašelių dydis du kartus didesnis palyginus su maţiausiu lašelių dydţiu 5 % alyvuogių aliejaus tiriamajme kreme, kurio pH reikšmė 4,68 ± 0,07 (1,01 ± 0,029 mm) (p<0,05). Kitų koncentracijų ir pagrindų su poligliceril-4-lauratu/sukcinatu emulsinių lašelių dydţių rezultatai ţymaus skirtumo neparodė, esant pH reikšmių skirtumui, todėl lipofilinės fazės kilmė bei poligliceril-4-laurato/sukcinato koncentracijos pokyčiai reikšmingai nesiskiria (p<0,05).
Skirtingų lipofilinių fazių (baltas, minkštas parafinas/alyvuogių aliejus) poligliceril-4- laurato/sukcinato koncentracijų mikroskopavimo vaizdinė medţiaga (2 pav) ir rezultatų palyginimai (3 pav) įrodė, jog skirtingų koncentracijų poligliceril-4-laurato/sukcinato kremai, esant pH reikšmei: balto, minkšto parafino (4,69 – 4,77 ± 0,09), o alyvuogių aliejus (4,56 – 4,68 ± 0,08) geba sudaryti patvarią ir stabilią emulsinę sistemą pagal pasirinktą emulsijos tipą - aliejus vandenyje (p<0,05). 0 0,5 1 1,5 2 2,5 3 3,5 1% 2% 3% 4% 5% Em u lsi n ių laš e lių d yd ži ai , m m
Poligliceril-4-laurato/ sukcinato koncentracija, proc.
Alyvuogių aliejus, pH reikšmė (4,56-4,68±0,08) Baltas, minkštas parafinas, pH reikšmė (4,69-4,77±0,09) Lipofilinė fazė:
*
*
*
*
*
30
5.3. Poligliceril-4-laurato/sukcinato įtaka emulsinių kremų stabilumui
Poligliceril-4-laurato/sukcinato funkcija - emulsiklis, kuris suriša lipofilinę ir hidrofilinę fazes į vienalytę a/v tipo emulsinę sistemą. Stabilumui ir patvarumui patvirtinti buvo atliktas centrifugavimo testas, kurio rezultatų nuotraukos pateiktos 4 paveiksle.
A B
4 pav. Tiriamieji pavyzdžiai po centrifugavimo testo: A- 1500 aps./min, B- 3000 aps./min 5 min; geltonos spalvos mėginiai- alyvuogių aliejaus pagrindo, o baltos spalvos- balto, minkšto parafino
pagrindo
Centrifugavus mėginius 1500 aps/min, tiek 3000 aps/min 5 min gauti stabilumo ir patvarumo rezultatai patvirtino, kad pagamintų skirtingų poligliceril-4-laurato/sukcinato koncentracijų a/v tipo kremai su skirtingais lipofilinei bazei parinktais aliejais ir pH reikšmėmis, yra stabilūs ir neišsisluoksniavo į vandeninę ir aliejinę fazes. Kremai po testo buvo nepakitę, vienalytės konsistencijos. A/v tipo kremų pH reikšmė, kaip stabilumo rodiklis, neturėjo įtakos nesudaryti nestabilios emulsinės sistemos. Djuris J. ir kitų autorių mokslinio tyrimo metu [32], ištirtų a/v tipo emulsinių kremų stabilumas, naudojant stearino rūgštį, glicerilo stearatą ir kt., atliekant centrifugavimo testą, taip pat parodė teigiamus stabilumo rezultatus, bet optimaliausias rezultatas pasiektas naudojant glicerilo stearatą.
Galime teigti, jog tiriamojo skirtingų koncentracijų poligliceril-4-laurato/sukcinato naudojimas a/v tipų emulsinėse sistemose sudaro stabilų ir patvarų produktą, kuris atsparus mechaninei paţaidai, esant pH reikšmių skirtumui tarp mėginių (4 lentelė) (p<0,05).
31
5.4. Poligliceril-4- laurato/sukcinato įtaka kremų klampai
Tyrimo eigoje atlikome klampos matavimus pagamintiems a/v tipo kremams. Tiriamieji pavyzdţiai buvo per daug tiršti, dėl ksantino gumos receptūroje, todėl buvo pagaminti tirpalai: 10g kremo sumaišėme su 10 ml vandens. Gauti rezultatai pateikti 5 paveikslo grafike:
5 pav. Alyvuogių aliejaus su skirtingomis poligliceril-4-laurato/sukcinato koncentracijomis pagrinduose,*p<0,05 (N=3) vs balto minkšto parafino pagrindas viskozimetrinio
tyrimo rezultatai
Įvertinus rezultatus grafike matome, jog pagamintų emulsijų tirpalų su alyvuogių aliejaus ir balto, minkšto parafino pagrindu didţiausia klampos vertė sutampa esant 3,5-3,6 % poligliceril-4-laurato/sukcinato koncentracijai (p<0,05). Balto, minkšto parafino pagrindo emulsijos klampos pikas pasiektas esant 3 % poligliceril-4-laurato/sukcinato koncentracijos mėginiui - 2,396 ± 0,045 Pa*s. Alyvuogių aliejaus pagrindo emulsijos klampos pikas - 4 % poligliceril-4-laurato/sukcinato koncentracijai - 2,151 ± 0,025 Pa*s, kurie reikšmingo skirtumo tarpusavyje neturi (p<0,05).
Maţiausiais klampos rezultatais pasiţymėjo 5 % poligliceril-4-laurato/sukcinato mėginiai:
balto, minkšto parafino (pH reikšmė 4,75±0,01) - 1,44 ± 0,64 Pa*s, alyvuogių aliejaus (pH reikšmė 4,68±0,01) - 1,432 ± 0,017 Pa*s, kurių skirtumas reikšmingai maţesnis uţ 3 % ir 4 %
poligliceril-4-laurato/sukcinato koncentracijas skirtingose lipofinėse fazėse. Remiantis mokslininkų atliktu tyrimu [33], kurio metu buvo pagamintos dviejų maţo klampumo a/v tipo emulsijos, kurių aliejinę bazę sudarė angliavandenių esterių linijinės arba šakotosios nesočiųjų riebalų rūgščių
0 0,5 1 1,5 2 2,5 3 3,5 4 4,5 1% 2% 3% 4% 5% K lam p o s d yd is, Pa* s
Poligliceril-4-laurato/ sukcinato koncentracija, proc.
Alyvuogių aliejaus pagrindo mėginiai, pH reikšmė (4,56-4,68±0,08) Balto, minkšto parafino pagrindo mėginiai, pH reikšmė (4,69-4,77±0,09) Lipofilinė fazė:
*
*
*
*
*
32
grandinės, turinčios nuo 6 iki 22 anglies atomų, naudojant natūralios kilmės emulsiklį, parodė ilgalaikio stabilumo rodiklio patikimumą, esant aliejaus ir vandens santykiui 9:1, 8:2, 7:3, 6:4, 5:5.
Įvertinus gautus mūsų tyrimo rezultatus ir mokslininkų atlikto tyrimo išvadas, jog geriausia maţo klampumo a/v tipo emulsinių sistemų ilgalaikio stabilumo rodiklio patikimumas gaunamas esant aliejaus su emulsikliu poligliceril-4-lauratu /sukcinatu ir vandens santykiui 5:5.
5.5. Temperatūros įtaka emulsinei sistemai
Atliktame tyrime buvo nustatoma šaldymo - šildymo ciklo metu kintančios temperatūros įtaka skirtingoms poligliceril-4-laurato/sukcinato koncentracijoms ir pH reikšmėms (4 lentelė), esant natūraliam ir sintetiniam kremų pagrindų aliejams. Gauti duomenys pateikti 5 lentelėje:
5 lentelė. Temperatūros įtaka skirtingai poligliceril-4-laurato/ sukcinato koncentracijai, (N=5)
Poligliceril-4-laurato/sukcinato koncentracija, proc.
Lipofilinės fazės tipas:
Šaldymo - šildymo ciklo numeris 1 2 3 4 5 1 % Alyvuogių al. Baltas, minkštas parafinas - - - - - 2 % Alyvuogių al. Baltas, minkštas parafinas - - - - - 3 % Alyvuogių al. Baltas, minkštas parafinas - - - - - 4 % Alyvuogių al. Baltas, minkštas parafinas - - - - - 5 % Alyvuogių al. Baltas, minkštas parafinas - - - - -
- Fazių atsiskyrimas nepasireiškė
Pagal 5 lentelėje pateiktus duomenis matyti, jog atlikus 5 šaldymo - šildymo ciklus, tiriamiesiams mėginiams parinktos poligliceril-4-laurato/sukcinato koncentracijos, su skirtingomis
33
pH reikšmėmis (4 lentelė) neturėjo įtakos nei dispersinės fazės atsiskyrimui ar nestabilumui nustatyti.
Atsiţvelgiant į šią fizikinę savybę, jog temperatūros ( -18°C ± 1°C iki 20°C ± 1°C) kaita poligliceril-4- lauratui/sukcinatui neturi reikšmingos įtakos sudaryti nestabilias a/v tipo emulsines sistemas kaip ir pH reikšmės skirtumas tarp tiriamųjų mėginių (p<0,05), todėl padidėja preparato panaudojimo, taikymo ir laikymo paprastumo sąlygų galimybės.
5.6. Kremų su poligliceril-4-lauratu/sukcinatu apklausos vertinimas
Pagaminus a/v tipų įvairios poligliceril-4-laurato/sukcinato koncentracijos kremus buvo siekiama įvertinti jų pirmines organoleptines savybes pagal parinktą receptūrą. Tai - naujas produktas, todėl norint toliau gerinti gamybos receptūrą, būtina atsiţvengti į pirminius respondentų išsakytus pastebėjimus ir tolimesnio tyrimo metu tęsti tyrimus su geriausiai įvertintais mėginiais.
Tiriamieji mėginiai buvo sunumeruoti eilės tvarka: nuo N1-N5 su balto, minkšto parafino pagrindu, o nuo N6-N10 su alyvuogių aliejaus pagrindu, nurodant poligliceril-4-laurato/sukcinato koncentracijas (1%, 2%, 3%, 4%, 5%) ir pH reikšmes (3 ir 4 lentelės). Apklausos rezultatai pateikti diagramose, kurios yra 6,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17 ir 18 paveiksluose:
34
7 pav. Kremų vartojimo dažnumas tarp respondentų, proc.
Atsiţvelgiant į vykdytos apklausos sezono laikotarpį - ţiemą, pagal 6 pav ir 7 pav diagramas matome, jog reikšmingai daugiau respondentų - 60 % naudoja kremus ir net kelis kartus per dieną - 38 % / kartą per dieną - 35 % arba kartą per savaitę - 20 %, lyginant su respondentų reikšmingai maţesniu kiekiu (40 %), kurių rezultatų tarpe retai naudojančių kremų yra 5 %, o visai nenaudojančių - 2 % respondentų.
35
9 pav. Respondentų nuomonė apie kremų natūralumą, proc.
Pagal 8 pav diagramos duomenis reikšmingai daugiau respondentų rūpinasi rankų - 50 % ir veido - 40 % oda. Tik 5 % respondentų rūpinasi pėdų ir kūno odos prieţiūra. Esant šaltiems orams labiausiai sausėja ir šerpėtoja rankų ir veido oda, nes šios kūno dalys labiausiai yra neapsaugotos nuo ţemos temperatūros ar jos kaitos. Todėl aktualu, jog a/v tipo kremų gamybos technologijos plėtra būtų orientuota į šią kosmetikos priemonių sritį. Tiek alyvuogių, tiek balto, minkšto parafino pagrindu pagaminti kremai, esant sudėtyje poligliceril-4-laurato/sukcinato pasiţymi maitinančiu ir drėkinančiu poveikiu. Nors emulsiklis yra natūralios kilmės pagalbinė medţiaga, pagal 9 pav tik 46 % respondentų prisipaţįsta apie natūralių kremų vartojimą lyginant su reikšmingai daugiau respondentų, pasisakančių apie natūralių kremų vartojimo įtaką: 30 % - apklaustųjų nuomonės neturi, o 24% - apklaustiesiems tai yra nesvarbu.
36
10 pav. Išvardintų kriterijų (kvapo, spalvos ir kt.) įtaka kremų pasirinkimui tarp respondentų, proc.
11 pav. Respondentų nuomonė apie gaminio savybes, proc.
Pagal 10 pav diagramos suvestinę matome, jog reikšmingai daugiau respondentų pirmiausia linkę atkreipti dėmesį į kremų sudėtį - 29 % ir esamą problemą, pvz.: ligą - 25%, taip pat svarbi yra kaina - 19 %, prekės ţenklas - 18 % ir kvapas - 4 %. Reikšmingo dėmesio produkto pH reikšmei ir spalvai respondentai nekreipia - 1 %, o 3 % apklaustųjų tai visai nesvarbu.
37
Gautus rezultatus lyginant su 11 pav rezultatais respondentai pačio produkto pirmenybę teikė jo susigėrimui ir pojūčiui po pavartojimo net 48 %, šių rezultatų suvestinėje reikšmingai pakilo kvapo kriterijus net iki - 20 % lyginant su 10 pav duomenimis. Procentaliai produkto išvaizda ir konsistencija pasiskirstė vienodai - po 15 %.
Tyrime dalyvavusieji ţmonės prieš atsakinėdami į klausimus, susijusius su pagamintais mėginiais, prieš tai juos išmėgino, išanalizavo įvertindami jų pirminę išvaizdą bei organoleptines savybes: susigėrimą, konsistenciją, tepumą ir savo nuomonę išreiškė 7-10 klausimuose:
12 pav. Respondentų nuomonės pasiskirstymas apie tiriamuosius mėginius, proc. *N2- 2% poligliceril-4-laurato/sukcinato mėginys, balto , minkšto parafino pagrindu; N4- 4 % 4-laurato/sukcinato mėginys, balto , minkšto parafino pagrindu; N5- 5%
poligliceril-4-laurato/sukcinato mėginys, balto , minkšto parafino pagrindu; N7-2% poligliceril-4-laurato/ sukcinato mėginys, alyvuogių aliejaus pagrindu; N9- 4% poligliceril-4-laurato/sukcinato mėginys, alyvuogių aliejaus pagrindu; N10- 5% poligliceril-4-laurato/sukcinato mėginys,
38
13 pav. Pasirinkto mėgiamo kremo savybių įvertinimas pagal pateiktus kriterijus, proc.
Respondentų nuomonės apie labiausiai patikusį kremą- mėginį 12 paveikslo diagramoje pasiskirstė taip: reikšmingai daugiau respondentų pasirinko N10 - 46 % ir N5 - 40 % kaip favoritus lyginant su N7 - 5 %, N4 - 4%, N2 - 3 % ir N9 - 2 %. Paprašyti pagrįsti savo pasirinkimą pagal atsakymo variantus, apklaustųjų nuomonės pasiskirstė taip: net 50 % ţmonėms patiko pojūtis po pavartojimo, t.y. nelipni odos vieta, ant kurios buvo aplikuotas kremas ir greitas susigėrimas - 32 %.
Remiantis pagal 6 klausimo rezultatų suvestines apklaustieji paţymėjo, jog 15 % respondentų pačio produkto konsistencija jiems yra svarbi, tai pasirinktų tiriamųjų mėginių 13 pav konsistencija reikšmingai sumaţėjo iki 9 %, tačiau malonaus kvapo nuomonių skaičius reikšmingai padidėjo iki 8 %. Paprašyti įvardinti sąvoką „malonus“ respondentai įvardino kaip neerzinantis, natūralus, tinkantis kasdienai.
39
14 pav. Respondentų nuomonė apie nepatikusius mėginius, proc.
*N1- 1% poligliceril-4-laurato/sukcinato mėginys, balto , minkšto parafino pagrindu; N3- 3% 4-laurato/sukcinato mėginys, balto , minkšto parafino pagrindu; N6- 1%
poligliceril-4-laurato/sukcinato mėginys, alyvuogių aliejaus pagrindu; N8- 4% poligliceril-4-laurato/ sukcinato mėginys, alyvuogių aliejaus pagrindu;
14 paveikslo diagramoje respondentų išrinkti labiausiai nepatikusiais mėginiai: su balto, minkšto parafino pagrindu N1 - 24 % ir N3 - 30 %, o alyvuogių aliejaus pagrindu N6 - 26% ir N8 - 20 % rezultatai tarpusavyje skyrėsi neţymiai.
