3 Materiali e metod
4.3. Applicazione del metodo all’analisi del plasma di 40 donator
Nelle condizioni operative definite in questo lavoro di tesi il metodo e’ stato applicato all’analisi del plasma di 40 volontari sani (20 maschi e 20 femmine) al fine di ottenere un profilo cromatografico di riferimento della GGT sierica. La Figura 4.10 mostra sei tipici profili di eluizione della GGT sierica.
Fig 4.10. Cromatogramma di sei campioni di plasma (donatori di sangue) ottenuto nelle condizioni operative descritte in tabella 4.5 con una concentrazione di substrato 30 uM
Volume di eluizione (ml) A ttiv ità G G T ( F lu or es ce nz a) 5 10 15 20 25 30 0,00 0,04 0,08 0,12 0,16 5 10 15 20 25 30 0,00 0,04 0,08 0,12 0,16 5 10 15 20 25 30 0,00 0,04 0,08 0,12 0,16 5 10 15 20 25 30 0,00 0,04 0,08 0,12 0,16 5 10 15 20 25 30 0,00 0,04 0,08 0,12 0,16 5 10 15 20 25 30 0,00 0,04 0,08 0,12 0,16 A B C D E F 0.8 mU 1.1 mU 2.9 mU 0.9 mU 1 mU 1.7 mU
E’ interessante sottolineare che l’attività di GGT eluisce dalla colonna in un volume compreso tra i 10 e i 25 ml ed è possibile identificare quattro picchi corrispondenti a quattro frazioni di GGT in tutti i campioni. Queste 4 frazioni sono separate ed identificabili grazie alla precedente calibrazione della colonna. Le quattro frazioni sono state definite come big-GGT (b-GGT, eluizione tra 10 e 13.5 ml, PM 2000 KDa), medium-GGT (m-GGT, eluizione tra 13.5 e 16.6 ml, PM 940 KDa), small-GGT (s-GGT, eluizione tra 16.6 e 20,4 ml, PM 140 KDa) e free-GGT (f-GGT, eluizione tra 20.4 e 25 ml, PM 70 KDa).
Dalla figura 4.10 si osserva che il volume di eluizione delle frazioni di GGT e’ riproducibile. Il profilo di eluizione in termini di distribuzione dell’attivita’ di GGT nelle singole frazioni varia al variare dell’attivita’ totale di GGT serica del soggetto.
La figura 4.11 mostra la correlazione tra l’area totale sotto i quattro picchi del cromatogramma nella regione compresa tra 10 e 25 ml in funzione dell’attività di GGT iniettata in colonna. Il grafico mostra una correlazione lineare tra 5 e 47 U/l (fattore di sensibilità (SD) = 0.0159 (0.0006) a.u.× mL2/mU; intercetta (SD)
= 0.0344 (0.0114) a.u.× mL; r2 = 0.952, P < 0.0001, n = 40).
Una correlazione lineare positiva (tabella 4.7) è stata trovata anche tra l’attività di GGT plasmatica totale e l’attività di ciascuna delle quattro frazioni. Il contributo delle diverse frazioni è variabile in entrambi i sessi. In soggetti con bassa attività di GGT totale la frazione predominante è la f-GGT (> 75%) mentre in soggetti con alti valori sierici totali di GGT il contributo della f-GGT
diminuisce (<20%) con un incremento relativo delle frazioni s-GGT e b-GGT. (Fig 4.12a,b)
Fig 4.11. Correlazione lineare tra l’area sotto i quattro picchi del cromatogramma e l’attività di GGT iniettata in colonna.
0 1 2 3 4 5 6 7 8 0,0 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0 1,2
T
ota
l a
re
a
GGT (mU)
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 0 5 10 15 20 25 A Plasma GGT A tti vi tà d i G G T ( m U /m l) 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 0 5 10 15 20 25 Plasma GGT A tti vi tà di G G T ( m U /m l) B
Fig 4.12. Correlazione lineare tra l’attività di GGT delle diverse frazioni e l’attività totale nei maschi (A) (n=20) e nelle femmine (B). Le linee rappresentano le diverse rette di regressione. b-GGT (■ ,linea continua), m-GGT (○, linea tratteggiata), s- GGT ( , linea a puntini), f-GGT (▼, linea con tratteggio e puntini alternati).
Tabella 4.6: Correlazione lineare tra l’attività delle diverse frazioni di GGT (U/L) e l’attività plasmatica totale della GGT (U/L) nei maschi e nelle femmine.
Maschi (n = 20) Femmine (n = 20) Fattore di sensibilità (SD) Intercetta r2 Fattore di sensibilità (SD) Intercetta r 2 b-GGT 0.17 (0.03) -1.05 (0.66) 0.678 0.12 (0.02) 0.08 (0.33) 0.607 m-GGT 0.03 (0.01) a 0.28 (0.30) 0.301 0.02 (0.01) a 0.36 (0.18) 0.192 s-GGT 0.51 (0.04) -2.70 (1.01) 0.889 0.56 (0.04) -2.31 (0.54) 0.927 f-GGT 0.32 (0.04) 4.64 (1.06) 0.745 0.26 (0.04) 4.73 (0.65) 0.666 Significant correlation, P < 0.0001; a: P < 0.01
5. Conclusioni
Come evidenziato nell’introduzione, di recente si è risvegliato un notevole interesse nei confronti della GGT poiché sono emerse una serie di correlazioni prognostiche tra i livelli sierici di questo enzima ed importanti malattie umane, in particolare quelle cardiovascolari e metaboliche (Lee D.S. et al., the Framingham Heart Study). Il principale limite all’uso in diagnostica di tali correlazioni è dato dall’aspecificità di tale determinazione che è influenzata da numerosi fattori patologici e fisiologici (pressione arteriosa, glicemia, indice di massa corporea, livelli di lipidi ematici, attività fisica, fumo, consumo di bevande alcoliche ecc.). Tale aspecificità complica anche l’interpretazione delle connessioni patogenetiche tra elevazione della GGT e le malattie correlate. Per questo motivo, lo studio delle frazioni della GGT sierica riveste un notevole interesse, in quanto potrebbe permettere da un lato di mettere in connessione le malattie sopra menzionate con alcune specifiche isoforme di GGT, aumentando la specificità e la sensibilità della determinazione, dall’altro, in virtù delle diverse caratteristiche biologiche delle diverse isoforme potrebbe permettere una migliore comprensione su come ciascuna di esse partecipa alla patogenesi delle varie malattie. In particolare, poiché è già stato dimostrato che GGT cataliticamente attiva è presente all’interno di placche aterosclerotiche umane, tali studi potrebbero consentire di chiarire i meccanismi attraverso cui una o più frazioni di GGT possono essere trasportate dal sangue all’interno
della placca e, una volta localizzate in quella sede, svolgere il loro ruolo proossidante e pro-infiammatorio.
La messa a punto della metodologia per la rivelazione delle frazioni di GGT sierica risolve uno dei problemi principali in questo ambito, la scarsa sensibilità delle procedure finora utilizzate. Infatti, finora era possibile studiare le frazioni di GGT solo in soggetti con valori patologicamente elevati dell’enzima, affetti da epatopatie, tumori del fegato o colestasi, mentre le correlazioni tra GGT serica e malattie cardiovascolari, diabete e sindrome metabolica sono state evidenziate solo in soggetti con valori di GGT all’interno dell’intervallo di riferimento, e quindi verosimilmente dotati di un diverso pattern di frazioni di GGT.
La metodologia messa a punto permette la determinazione di quattro frazioni di GGT sierica in tutti i campioni analizzati con un aumento di sensibilità; il limite di determinazione risulta infatti 0.5 U/L per ciascuna frazione rispetto ai 5 U/L per l’attività plasmatica totale del metodo di routine. Le quattro frazioni identificate sono state definite come big-GGT (b-GGT, eluizione tra 10 e 13.5 ml, PM 2000 KDa), medium-GGT (m-GGT, eluizione tra 13.5 e 16.6 ml, PM 940 KDa), small-GGT (s-GGT, eluizione tra 16.6 e 20,4 ml, PM 140 KDa) e free-GGT (f-GGT, eluizione tra 20.4 e 25 ml, PM 70 KDa). I pesi molecolari della b-GGT, m-GGT, s-GGT sono compatibili con quelli di complessi enzima -lipoproteine, VLDL, LDL, HDL rispettivamente mentre quello della f-GGT è indicativo di una forma enzimatica libera. Il volume di eluizione delle singole frazioni dalla colonna non cambia indipendentemente dai livelli sierici di GGT
ciò suggerisce un interazione specifica dell’enzima con le lipoproteine piuttosto che un adsorbimento della GGT sulle lipoproteine circolanti.
La capacità di questa metodologia di definire la natura eterogenea dell’attività totale dell’enzima nel plasma e di descrivere uno specifico profilo di frazioni dipendente dal sesso e dalla GGT sierica totale rendono questa tecnica utilizzabile per una migliore caratterizzazione dei valori clinici dell’attività enzimatica in diverse condizioni patologiche.
In conclusione, l’analisi delle frazioni della GGT è un metodo riproducibile e sensibile in grado di consentire lo studio qualitativo e quantitativo della distribuzione dell’attività enzimatica nel plasma. Questa metodologia potrà inoltre essere impiegata su gruppi di pazienti selezionati al fine di studiare la precisa correlazione tra la composizione isoenzimatica di GGT individuale e il suo valore clinico in precise patologie.
Ringraziamenti
Il primo ringraziamento va ai miei genitori perché hanno saputo offrirmi le condizioni ideali per poter studiare, non mi hanno mai lasciato da solo e si sono interessati a questo mio percorso sostenendomi anche quando i traguardi erano lontani e i miei dubbi tantissimi.
Grazie a Francesco perche è un fratello e un amico a cui ho cercato sempre di ispirarmi nello studio.
Un grazie speciale va alla fortuna che mi ha permesso di incontrare Silvia che è senza dubbio l’emozione più forte che l’università mi abbia regalato, prima era una simpatia adesso è una persona di cui non so fare a meno. Grazie al mio amico Alberto, con cui ho studiato e condiviso molto in questi anni e con cui spero di continuare a condividere in futuro.
Desidero ringraziare il professor Paolicchi, per avermi seguito in questa mia tesi e per l’entusiasmo che trasmette nel suo lavoro. Grazie anche a tutto il gruppo di lavoro, Emilia, Vanna, Evelina, Virginia, Alessandro, Cecilia, Nicoletta e ai ragazzi con cui ho condiviso questo anno, Irene, Alessia, Riccardo. Un Grazie speciale a Maria che con passione ha cercato di insegnarmi come si vive e lavora in un laboratorio.
L’ultimo ringraziamento va a tutti gli amici e i parenti a cui la vita quotidiana toglie spazio perché io li penso moltissimo e passerei molto più tempo con loro se vivessi costantemente in vacanza, giuro!
Bibliografia
Abbot W.A., Meister A., (1983) “Modulation of gamma-glutamyl transpeptidase activity.” J Biol Chem 258(10): 6193-7.
Accoui M.J., Enoiu M., Mergny M., Masson C., Dominici S., Wellman M., Visvikis A. (2000) “Gamma-glutamyltranspeptidase-dependent glutathione catabolism results in activation of NF-kB.” Biochem Biophys Res Commun 276: 1062-67.
Allen S., Dashwood M., Morrison K., Yacoub M.(1998). Differential leukotriene constrictor responses in human atherosclerotic coronary arteries. Circulation; 97; 2406-2413.
Allison R.D., Meister A. (1981) “Evidence that transpeptidation is a significant function of gamma-glutamyl transpeptidase.” J Biol Chem 256(6): 2988-92.
Amoroso G, Van Boven AJ, Crijns HJ. Drug therapy or coronary angioplasty for the treatment of coronary artery disease: new insights. Am Heart J. 2001; 141: S22-5. Anderson M.E., Allison R.D., Meister A. (1982) “Interconversion of leukotrienes catalyzed by purified gamma-glutamyl transpeptidase: concomitant formation of leukotriene D4 and gamma-glutamyl aminoacids.” Proc Natl Acad Sci U S A 79(4): 1088-91.
Arndt V, Brenner H, Rothenbacher D, Zschenderlein B, Fraisse E, Fliedner TM. Elevated liver enzyme activity in construction workers: prevalence and impact on early retirement and all-cause mortality. Int Arch Occup Environ Health. 1998; 71: 405-12.
Barrett W.C., DeGnore J.P., Koning S., Fales H.M., Keng Y.F., Zhang Z.Y., Yim M.B., Chock P.B. (1999) “Regulation of PTP1B via glutathionylation of the active site cysteine 215:”Biochemistry 38(20): 6699-705.
Baeuerle P.A., Henkel T., (1994) “Function and activation of NF-kB in the immune system.” Ann Rev Immunol 12: 141-179.
Barouki R., Finidori J., Chobert M.N., Aggerbeck M., Laperche Y., Hanoune J. (1984) “Biosynthesis and processing of gamma-glutamyl transpeptidase in hepatoma tissue culture cells.” J Biol Chem 259(12): 7970-4.
Bauvois B, Laouar A, Rouillard D, Wietzerbin J.(1995) “Inhibition of γ-glutamyl transpeptidase activity at the surface of human myeloid cells is correlated with macrophage maturation and transforming growth factor β production.” Cell Growth
Differ; 6: 1163-70.
Bellini M., Tumino E., Giordani R., Fabrini G., Costa F., Galli R., Rucco M., Belcari C., Michelassi C., Murri L., Maltinti G., Marchi S. (1997) “Serum γ-glutamyl- transpeptidase isoforms in alcoholic liver disease”. Alcohol and alcoholism, Vol 32, No 3, 259-266.
Berliner J.A., Heinecke J.W. (1996) “The role of oxioxidizes lipoproteins in atherogenesis.“ Free Radic Biol Med 20(5): 707-27.
Bernstrom K., Hammarstrom S. (1982) ”A novel leukotriene formed by transpeptidation of leukotriene E.“ Biochem Biophys Res Commun 109(3): 800-4. Betro MG, Oon RC, Edwards JB.(1973) “ γ-Glutamyl transpeptidase and other liver function tests in myocardial infarction and heart failure.” Am J Clin Pathol.; 60: 679- 83.
Brannigan JA, Dodson G, Duggleby HJ, Moody PC, Smith JL, Tomchick DR, Murzin AG.(1995) “A protein catalytic framework with an N-terminal nucleophile is capable of self-activation.” Nature. 1995; 378: 416-9. Erratum in: Nature; 378: 644. Brenner H, Rothenbacher D, Arndt V, Schuberth S, Fraisse E, Fliedner TM.(1995). Distribution, determinants, and prognostic value of gamma-glutamyltranspeptidase for all-cause mortality in a cohort of construction workers from south Germany. Prev
Med.; 26: 305–10.
Brouillet A., Darbouy M., Okamoto T., Chobert M.N., Lahuna O., Garlatti M., Goodspeed D., Laperche Y. (1994) “Functional charaterization of the rat gamma- glutamyl transpeptidase promoter that is expressed and regulated in the liver and hepatoma cells.” J Biol Chem 269(21): 14878-84.
Bulle F., Mattei M.G., Siegrist S., Pawlac A., Passage E., Chobert M.N., Laperche Y., Guellaen G. (1987) ”Assignment of the human gamma-glutamyl transferase gene to the long arm of chromosome 22.” Hum Genet 76(3):283-86.
Cabiscol E., Levine R.L. (1996) ”The phosphatase activity of carbonic anhydrase III is reversibly regulated by glutathiolation.” Proc Natl Acad Sci U S A 93(9): 4170-4
Chen P.C., DuBois G.C.,Chen M.J. (1995) “Mapping the domain(s) critical for the binding of human tumor necrosis factor-alpha to its two receptors.” J Biol Chem 270(6): 2874-8.
Chikhi N., Holic N., Guellaen G., Laperche Y. (1999) “Gamma-glutamyl transpeptidase gene organization and expression: a comparative analysis in rat, mouse, pig and human species.” Comp Biochem Physiol B Biochem Mol Biol 122(4). 367-80.
Coan C., Ji J.Y., Hidge K., Mehlhorn R.J. (1992) ”Protein sulfhydryls are protected from irreversible oxidation by conversion to mixed disulfides.”Arch Biochem Biophys 295(2): 369-78.
Collins J.E., Mungall A.J., Badcock K.L., Fay J.M., Dunham I. (1997) ”The organization of the gamma-glutamyl transferase genes and other low copy repeats in human chromosome 22q11 [published erratum appears in Genome res 1997 Sep;7(9):942].” Genome Res 7(5): 522-31.
Conigrave KM, Saunders JB, Reznik RB, Whitfield JB. Prediction of alcohol-related harm by laboratory test results. Clin Chem. 1993; 39: 2266–70.
Corti A.,Paolicchi A., Franzini M., Dominici S., Casini A.F., Pompella A. (2005) “The S-thiolating activity of membrane γ-glutamyltransferase: formation of cysteinyl- glycine mixed disulfides with cellular proteins and in the cell microenviroenment.”
Antiox Redox Signall 7: 911-8.
Courtay C., Heisterkamp N., Siest G., Groffen J. (1994) „Expression of multiple γ- glutamyltransferase genes in man.” Biochem J 297(Pt 3): 503-8.
Curthoys N.P., Hughey R.P. (1979) “Characterization and physiological function of rat renal gamma-glutamyltranspeptidase.” Enzyme 24(6): 383-403.
Daeppen JB, Smith TL, Schuckit MA.(1998) Influence of age and body mass index on γ-glutamyltransferase activity: a 15-year follow-up evaluation in a community sample. Alcohol Clin Exp Res.; 22: 941-4.
Daufeub S., Leroy P., Paolicchi A., PompellaA., Wellman M., Galteau M.M., Visvikis A. (2002) “Enhanced resistance of HeLa cells to cisplatin by overexpression of gamma-glutamyltransferase.” Biochem Pharmacol 64(2):207-16.
Davis D.A., Newcombe F.M., Starke D.W., Ott D.E., Mieyal J.J., Yarchoan R. (1997) “Thioltransferase (glutaredoxin) is detect within HIV-1 and can regulate the activity of glutathionated HIV-1 protease in vitro.” J Biol Chem 272: 1289-95.
De Belder AJ, MacAllister R, Radomski MW, Moncada S, Vallance PJ.(1994) Effects of S-nitroso-glutathione in the human forearm circulation: evidence for selective inhibition of platelet activation. Cardiovasc Res.; 28: 691-4.
Del Bello B., Paolicchi A., Comporti M., Pompella A., Maellaro E. (1999) “Hydrogen peroxide produced durino gamma-glutamyl transpeptidase activity is involved in prevention of apoptosis and maintainance of proliferation in U937 cells.”FASEB J 13(1): 69-79.
DeLeve L., Kaplowitz N. (1991) “Glutathione metabolism and its role in hepatotoxicity.” Pharmacol Ther 52: 287-305.
Del Corso A., Voltarelli M., Riannessi M., Cappiello M., Barsacchi D., Zandomeneghi M., Camici M., Mura U. (1993) ”Thiol-dependent metal-catalyzed oxidation of bovine lens aldose reductase II. Proteolytic susceptibility of the modified enzyme form.” Arch Biochem Biophys 300(1): 430-3.
Dimmeler S, Haendeler J, Sause A, Zeiher AM. (1998) Nitric oxide inhibits APO- 1/Fas-mediated cell death. Cell Growth Differ.; 9: 415-22.
Dominici S., Pieri L., Comporti M., Pompella A. (2003a) “Possibile role of membrane gamma-glutamyltransferase activity in the facilitation of transferrin- dependent and –independent iron uptake by cancer cells.” Cancer Cell Int 3(1): 7. Dominici S., Pieri L., Paolicchi A., De Tata V., Zumino F., Pompella A. (2004) “Endogenous oxidative stress induces distinct redox forms of tumor necrosis factor receptor-1 in melanoma cells.” Ann N Y Acad Sci 1030: 62-68.
Dominici S., Visvikis A., Pieri L., Paolicchi A., Valentini M.A., Comporti M., Pompella A. (2003b) “Redox modulation of NF-kappaB nuclear translocation and DNA binding in metestatic melanoma. The role of endogenous and gamma-glutamyl transferase-dependent oxidative stress.” Tumori 89(4): 426-33:
Drozdz R., Parmentier C., Hachad H., Leroy P., Siest G., Wellman M. (1998) ”Gamma-glutamyl transferase dependent generation of reactive oxygen species from a glutathione/transferring system.” Free Radic Biol Med 25(7): 786-92.
Emdin M, Passino C, Donato L, Paolicchi A, Pompella A.(2002) Serum gamma- glutamyltransferase as a risk factor of ischemic stroke might be independent of alcohol consumption. Stroke.; 33: 1163-4.
Emdin M, Passino C, Michelassi C, Titta F, L’Abbate A, Donato L, Pompella A, Paolicchi A.(2001) Prognostic value of serum gamma-glutamyl transferase activity after myocardial infarction. Eur Heart J.; 22: 1802–7.
Fernández-Checa J.C., Takikawa H., Horie T., Ookhtens M., Kaplowitz N. (1992) “Canalicular transport of reduced glutathione in normal and mutant Eisai hyperbilirubinemic rats.” J Biol Chem 267(3): 1667-73.
Finidori J., Laperche Y., Haguenauer-Tsapis R., Barouki R., Guellaen G., Hanoune J. (1984) “In vitro biosynthesis and membrane insertion of gamma-glutamyl trasnspeptidase:” J Biol Chem 259(8): 4687-90.
Fliglewicz D.A., Delattre o:, Guellaen G., Krizus A., Thomas G., Zucman J. Rouleau G.A. (1993) “Mapping of human gamma-glutamyl transpeptidase genes on choromosome 22 and other human autosomes.” Genomics 17(2): 299-303.
Gardell S.J., Tate S.S. (1979) “Latent proteinase activity of γ-glutamyl transpeptidase light subunit.” J Biol Chem 254(12): 4942-45.
Glass G.A., Stark A.A. (1997) “Promotion of glutathione-gamma-glutamyl transpeptidase-dependent lipid peroxidation by copper and ceruloplasmin: the requirement for iron and the effect of antioxidants and antioxidant enzymes.” Environ
Mol Mutagen 29(1): 73-80.
Granville D.J., Carthy C.M., Hunt D.W., Mc Manus B.N. (1998) “Apoptosis: molecular aspects of cell death and disease.” Lab Invest 78(8): 893-913.
Griffith O.W., Bridges R.J., Meister A. (1979) “Tansport of gamma-glutamyl aminoacids: role of glutathione and gamma-glutamyl transpeptidase.” Proc Natl Acad
Sci U S A 76(12): 6319-22.
Hanigan M.H. (1998) Gamma “Glutamyl transpeptidase e glutathionase: its expression and function in carcinogenesis.” Chem Biol Interact 111-112: 333-42. Hanigan M.H., Frierson H.F., Jr. (1996) “Immunohistochemical detection of gamma- glutamyl transpeptidase in normal human tissue” J Histochem Cytochem 44(10): 286- 90.
Hanigan M.H., Pitot H.C. (1985) “Gamma-glutamyl transpeptidase its role in hepatocarcinogenesis” Carcinogenesis 6(2): 165-72.
Hanigan M.H., Ricketts W.A. (1993) “Extracellular Glutathione is a source of cysteine for cells that express γglutamyl tanspeptidase.” Biochemistry 32: 6302-6. Hart TW. (1985)Some observations concerning the S-nitroso and Sphenylsulphonyl derivatives of L-cysteine and glutathione. Tetrahedron Lett; 26: 2013-26
Hehner F.P., Breitkreuz P., Schubinsky G., Unsoeld H., Schultze-Osthoff K., Schmitz M.L., Dröge W. (2000) “Enhancement of T cell receptor signaling by a mild oxidative shift in the intracellular thiol pool.” J Immunol 165: 4319-28.
Hogg N, Singh RJ, Konorev E, Joseph J, Kalyanaraman B.(1997) Nitrosoglutathione as a substrate for gamma-glutamyl transpeptidase. Biochem J.; 323: 477-81.
Hood B, Kjellstrom T, Ruter G, Kristenson H.(1990) Serum cholesterol, serum triglyceride, alcohol, myocardial infarction and death (2): necessary to pay attention to serum GT in assessment of risks of myocardial infarction and death.
Lakartidningen.; 87: 3295-8.
Huseby N.E. (1981) “Separation and characterization of human γ- glutamyltransferases.” Clin Chim Acta 111: 39-45.
Huseby N.E. (1982a) “Multiple forms of γ-glutamyltransferase. Association of the enzyme with lipoproteins.” Clin Chim Acta 124: 130-12.
Huseby N.E. (1982b) “Hydrophilic form of γ-glutamyltransferase: proteolitic formationin liver homogenates and its estimation in serum.” Clin Chim Acta 124: 113-21.
Huseby N.E. (1982c) “Multiple form of γ-glutamyltransferases: Biochemical characterization.” Adv Biochem Pharmacol 3: 47-54.
Hwang C., Sinskey A.J., Lodish H.F. (1992) “Oxidized redox state of glutathione in the endoplasmic reticulum.” Science 257(5076): 1496-502.
Iannaccone P.M., Koizumi J. (1983) “Pattern and rate of disappearance of gamma- glutamyl transpeptidase activity in fetal and neonatal rat liver.” J Histochem
Inoue M, Hiratake J, Suzuki H, Kumagai H, Sakata K.(2000) Identification of catalytic nucleophile of Escherichia coli gamma-glutamyltranspeptidase by gamma- monofluorophosphono derivative of glutamic acid: N-terminal thr-391 in small subunit is the nucleophile. Biochemistry.; 39: 7764-71.
Jousilahti P, Rastenyte D, Tuomilehto J.(2000) Serum gammaglutamyltransferase, self-reported alcohol drinking, and the risk of stroke. Stroke.; 31: 1851–5.
Karlson BW, Wiklund O, Hallgren P, Sjolin M, Lindqvist J, Herlitz J.(2000) Ten-year mortality amongst patients with a very small or unconfirmed acute myocardial infarction in relation to clinical history, metabolic screening and signs of myocardial ischaemia. J Intern Med.; 247: 449–56.
Kazemi-Shirazi L., Endler G., Winkler S., Schickbauer T., Wagner O., Markis C. (2007) “Gamma Glutamyltranspeptidase and Long-Term Survival: Is It Just the Liver?.“ Clin Chem 53(5): 1-7.
Kerr J.F., Wyllie A.H., Currie A.R. (1972) “Apoptosis: a basic biological phenomenon with wide-ranging implication in tissue kinetics.” Br J Cancer 26(4): 239-57.
Kinlough CL, Poland PA, Bruns JB, Hughey RP.(2005) Gamma- glutamyltranspeptidase: disulfide bridges, propeptide cleavage, and activation in the endoplasmic reticulum. Methods Enzymol.; 401: 426-49.
Konorev EA, Tarpey MM, Joseph J, Baker JE, Kalyanaraman B.(1995) S- nitrosoglutathione improves functional recovery in the isolated rat heart after cardioplegic ischemic arrest-evidence for a cardioprotective effect of nitric oxide. J
Pharmacol Exp Ther.; 274: 200-6.
Koyama S., Kotani A., Sasaki J.(1996),”Spontaneous dissecting aneurysm of the anterior cerebral artery: report of two cases.”Surg Neurol.;46(1):55-61.
Klatt P., Molina E.P., De Lacoba M.G., Padilla C.A., Martinez-Galesteo E., Barena J.A., Lamas S. (1999) ”Redox regulation of c-Jun DNA binding by reversible S- glutathiolation.” FASEB J 13: 1481-90.
Kristenson H, Ohrn J, Trell E, Hood B.(1980) Serum γ-glutamyltransferase at screening and retrospective sickness days. Lancet; 1: 1141.
Lee DH, Jacobs DRJr, Gross M, Kiefe CI, Roseman J, Lewis CE, et al.(2003) γ- Glutamyltransferase is a predictor of incident diabetes and hypertension. Coronary Artery Risk Development in Young Adults (CARDIA) Study. Clin Chem.; 49: 1358- 66.
Lee DS, Evans JC, Robins SJ, Wilson PW, Albano I, Fox CS, Wang TJ, Benjamin EJ, D'Agostino RB, Vasan RS.(2007) Gamma glutamyl transferase and metabolic syndrome, cardiovascular disease, and mortality risk: the Framingham Heart Study.
Arterioscler Thromb Vasc Biol.; 27: 127-33.
Lewis RA, Austen KF, Soberman RJ.(1990) Leukotrienes and other products of the 5-lipoxygenase pathway. Biochemistry and relation to pathobiology in human diseases. N Engl J Med.; 323: 645-55.
Lieberman M.W., Barrios R., Carter B.Z., Habib G.M., Lebovitz R.M., Rajagoalan S., Sepulbeda A.R., Shi Z.Z., Wan D.F. (1995) “gamma-Glutamyl transpeptidase. What does the organization and expression of a multipromoter gene tell us about its functions?”Am J Pathol 147(5): 1175-85.
Lu S:C: (1999) “Regulation of epatic glutathione synthesis: current concepts and controversies.” FASEB J 13(10): 1169-83.
Maellaro E., Dominici S., Del Bello B., Valentini M.A., Pieri L., Perego P., Supino R., Zumino F., Lorenzini E., Paolicchi A., Comporti M., Pompella A. (2000) “Membrane gamma-Glutamyl transpeptidase activity of melanoma cells: effects on cellular H2O2 production, cell surface protein thiol oxidationand NF-kappaB
activation status.” J Cell Sci 113(Pt15): 2671-8.
Magnan S.D.J., Shirota F.N., Nagasawa H.T. (1982) “Drug latentation by τ-glutamyl transpeptidase.” J Med Chem 25: 1018-21.
Mallis R.J., Buss J.E., Thomas J.A. (2001) “Oxidative modification of H-ras: S- thiolation and S-nitrosylation of reactive cysteines.” Biochem J 335: 145-53.
Mayatepek E, Flock B.(1998) Leukotriene C4-synthesis deficiency: a new inborn error of metabolism linked to a fatal developmental syndrome. Lancet.; 352: 1514-7.
Mayatepek E, Okun JG, Meissner T, Assmann B, Hammond J, Zschocke J, Lehmann WD.(2004) Synthesis and metabolism of leukotrienes in gamma-glutamyl transpeptidase deficiency. J Lipid Res.; 45: 900-4.
Meisinger C, Doring A, Schneider A, Lowel H; KORA Study Group.(2006) Serum gamma-glutamyltransferase is a predictor of incident coronary events in apparently healthy men from the general population. Atherosclerosis.; 189: 297-302.
Meister A. Glutathione metabolism. Methods Enzymol. 1995; 251: 3-7.
Meister A.(1988) “Glutathione.“ In The liver: Biology and Pathology , Second
Edition (Aria I.M., Jakoby W.B., Popper H., Schachter D., Shafritz D.A., eds) pp.
401-417, Raven Press, NewYork
Meister A. (1983) “Metabolism and transport of glutathionr and other γ-glutamyl compounds.” In: Functions of glutathione: biochemical, toxicological and clinical
aspects. (Larsson A., Orrenius S., Holmgren A., Mannervik B., eds) Raven Press,
New York, pp 1-22.
Meister A., Anderson M.E. (1983) “Glutathione.“ Annu Rev Biochem 52: 711-60. Meister A., Tate S.S., Griffith O.W. (1981) ”Gamma-glutamyl transpeptidase.“
Methods Enzymol 77: 237-53.
Meredith M.J., Reed D.J. (1982) “Status of the mitochondrial pool of glutathione in the isolated hepatocyte.” J Biol Chem 257(7): 3747-53.
.Minotti G.(1993) Sources and role of iron in lipid peroxidation. Chem Res Toxicol.; 6: 134-46.
Miura K, Nakagawa H, Nakamura H, Tabata M, Nagase H, Yoshida M, et al.(1994) Serum γ-glutamyl transferase level in predicting hypertension among male drinkers. J
Hum Hypertens.; 8: 445-9.
Nemesànszky E, Lott J.A (1985): “Gamma-Glutamyltransferase and its isoenzymes: Progress and problems”. Clinical chemistry, vol 31, No 6, 1985; 797-803.