SOMMARIO
Introduzione
1. Le cellule staminali……...………..……….….1
1.1 Cellule staminali embrionali (ESC)…...……..……...………...…3
1.2 Cellule staminali del cordone ombelicale ...…..……….3
1.3 Cellule staminali adulte o somatiche ………...……..…..………...4
1.4 Cellule staminali adulte residenti………...……….…...9
1.5 Utilizzazione delle cellule staminali nel trattamento delle patologie cardiache...11
1.6 Strategie per modulare il differenziamento cardiaco delle cellule staminali…...…...14
2. L’ingegneria dei tessuti………... …………..……..……..18
2.1 Polimeri naturali………...……….……...20
2.2 Polimeri sintetici………...……….…21
2.3 Riparazione del muscolo cardiaco mediante tecniche di ingegneria dei tessuti………...………..22
3. Scopo della Ricerca………...…………25
4. Materiali e Metodi 4.1 Colture cellulari………..……….………...….27
4.2 Analisi delle MSC e CSC tramite citofluorimetria a flusso………..…….…...29
4.3 Separazione immunomagnetica……….…….……...29
4.4 Analisi della proliferazione cellulare………...………...…..30
4.5 Analisi Western blot………...……...…...30
4.6 Differenziamento adipogenico………...…31
4.7 Estrazione di RNA totale ed analisi tramite RT-PCR semiquantitativa………...31
4.8 Sintesi dei polimeri e microdeposizione delle matrici……...……33
4.9 Immunofluorescenza………...……34
5. Risultati 5.1 Le MSC e CSC sono popolazioni eterogenee………..……...……35
5.2 Le MSC e CSC presentano un diverso fenotipo indifferenziato………...36
5.3 Le MSC e CSC hanno una diversa capacità proliferativa………...……39
5.4 Le MSC e CSC mantengono la loro capacità differenziativa………..…...40
5.5 Le MSC e CSC rispondono differentemente ai diversi
polimeri……….……...….42 5.6 Effetti della composizione chimica dei polimeri
sul fenotipo delle MSC e CSC……….…...……46 5.7 Risposta delle MSC e CSC a supporti polimerici con
differente struttura tridimensionale……….………...……47 6. Discussione………..……….……...….50 7. Bibliografia………..……….……….………….….….56
