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1.3. Immunoterapia dei tumori...17

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Academic year: 2021

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INDICE

1. INTRODUZIONE...6

1.1. Risposte immunitarie ai tumori...8

1.2. Evasione della risposta immune da parte dei tumori...14

1.3. Immunoterapia dei tumori...17

1.3.1. Immunoterapia passiva...18

1.3.2. Immunoterapia attiva...21

1.4. Antigeni tumorali...24

1.5. Vaccini antitumorali...30

1.5.1. Vaccini a vettori virali...35

1.5.2. Adenovirus...37

1.5.3. Vaccini basati su DNA plasmidico...45

1.6. TLR ed immunomodulatori...52

2. SCOPO DEL LAVORO...61

3. MATERIALI E METODI...64

3.1. Adiuvanti e peptidi...64

3.2. Topi e tumor challenge...64

3.3. Immunogeni...66

3.4. ELISA...68

3.5. Intracellular staining per IFN ... 3.6. Microarray peptidico...70

3.7. Saggio NK e ADCC...71

3.8. Analisi degli infiltrati tumorali...72

3.9. Valutazione istologica e patologica...72

3.10. In vivo imaging...73

3.11. Real Time PCR...73

3.12. Design dello studio sui cani...74

3.13. Vaccinazione dei cani...75

3.14. ELISPOT...76

3.15. Analisi statistica...76

4. RISULTATI...77

4.1. Effetto antitumorale del vaccino contro Her2 nello studio profilattico...77

4.2. Effetto antitumorale della combinazione DNA-IMO nello studio terapeutico...78

4.3. Parametri immunologici associati con il trattamento combinato DNA-IMO...81

4.4. Identificazione del loop di dimerizzazione di Her2 quale bersaglio della risposta anticorpale...84

4.5. Valutazione istologica e tossicologica dei tumori...86

(2)

4.6. Effetto antitumorale della combinazione DNA-IMO ad uno stadio più avanzato della

malattia...87

4.7. Valutazione della risposta immune al trattamento combinato di vaccino anti-hCEA ed IMO nei topi CEA.tg...90

4.8. Valutazione della risposta immune indotta dalla vaccinazione eterologa contro mTERT...92

4.9. Valutazione della risposta immune innata indotta da IMO...93

4.10. Effetto additivo del trattamento combinato DNA-IMO in xenografts tumorali murini...95

4.11. Aumento degli infiltrati tumorali di cellule T antigene-specifiche indotto da IMO...98

4.12. Effetto di IMO sulla risposta periferica mTERT-specifica indotta dal vaccino genetico...100

4.13. Il cane come modello preclinico nell’immunoterapia dei tumori...102

4.14. Espressione di dTERT nel linfoma B di cane...103

4.15. Design sperimentale...104

4.16. Induzione della risposta immune da parte del vaccino per dTERT...105

4.17. Prolungamento della sopravvivenza dei cani affetti da linfoma B e trattati con regime COP grazie alla vaccinazione contro dTERT...109

5. DISCUSSIONE...111

6. BIBLIOGRAFIA...125

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