Nell’analisi dei risultati ottenuti nel confrontare la citologia vaginale con il dosaggio del P4 (Gruppo A), abbiamo ottenuto una buona concordanza fra
citologia vaginale e dosaggio del P4 nel periodo dell’anestro (0,38±0,14
ng/ml, range 0,29-0,68) e del proestro (1,03±0,67 ng/ml, range 0,31-2,56), mentre abbiamo riscontrato una maggiore variabilità nel valutare il periodo estrale. Infatti la media del P4 era di 6,8±7,49 ng/ml con range variabile da
0,37 a 32,2 ng/ml. Nonostante ciò la differenza delle concentrazioni di P4
nelle diverse fasi del ciclo era statisticamente significativa.
I valori bassi di P4 osservati in estro citologico si spiegano con la notevole
variabilità nell’aspetto della citologia vaginale fra i soggetti e con la soggettività nella valutazione della citologia vaginale. Questo ci indica che è necessario effettuare il dosaggio di P4 per stabilire con precisione la fase
del ciclo estrale e quindi degli accoppiamenti. La citologia vaginale infatti non può essere utilizzata per determinare il momento dell’ovulazione in anticipo, ma è in grado di individuare con precisione la fine dell’estro e l’inizio del diestro (D1). L’ovulazione può essere individuata quindi a posteriori in quanto avviene 5-7 giorni prima del D1 (Holst and Phemister, 1974; Levy and Fontbonne, 2007; Zambelli, 2010).
Nel Gruppo C la data dell’ovulazione è stata stimata in base al valore del progesterone ematico quando questo era tra 2 e 13 ng/ml. In base a questa stima è stata predetta con successo la data del parto nell’86% dei casi. L’accuratezza di questo metodo è risultata comparabile a quanto osservato in letteratura, sia quando la durata della gravidanza è stata calcolata dal primo giorno in cui il dosaggio del progesterone ha raggiunto 1,5 ng/ml (65±2 gg nel 90% dei casi) (Kutzler et Al., 2003) che quando è stata calcolata
dalla stima del giorno dell’ovulazione (63,1±2,1 gg, di 61-65 gg nel 77,8% dei casi) (Mir et Al., 2011).
Prevedere la data del parto a partire dalla data dell’ovulazione ha una precisione maggiore rispetto al calcolo effettuato a partire dalla data della monta, in quanto in questo caso la gravidanza può avere una durata di 57-72 gg (Concannon et Al., 1983). Il calcolo a cominciare dal picco dell’LH, invece, è altrettanto preciso, rispetto a quello da noi utilizzato, ma il dosaggio di un ormone proteico richiede dei kit specifici per ogni specie e vista la breve durata del picco i dosaggi devono essere effettuati quotidianamente (Conannon et Al., 1983; Levy and Fontbonne, 2007).
La durata della gravidanza nella nostra casistica non è variata in maniera significativa a seconda del numero dei cuccioli, anche se era possibile osservare un trend in cui la durata era inferiore con la presenza di un numero maggiore di cuccioli. Questo è in accordo con due studi precedenti (Kuzler et Al., 2003; Seki et Al., 2010), mentre in un ulteriore studio è stata descritta una maggiore durata della gravidanza quando il numero dei cuccioli era di 1 o 2 (Mir et Al., 2011).
Il progesterone è indispensabile per il mantenimento della gravidanza nella cagna e quindi il suo dosaggio in questa fase è utile per valutare l’andamento fisiologico della stessa e per verificare eventuali problemi patologici che possono portare all’aborto, ma anche per indicare il termine della gestazione. Nella nostra casistica (Gruppo B) erano presenti 3 femmine a cui sono stati effettuati controlli tra il 25° ed il 45° gg di gravidanza. Il progesterone ematico dovrebbe essere, a 20-30 gg post OV, >15 ng/ml e viene mantenuto >2 ng/ml fino a 24 ore prima del parto (Veronesi et Al., 2002; Gunzel-Apel et Al., 2006). In due dei nostri soggetti, in cui il P4 era
62-63 gg dopo l’ovulazione, mentre nella femmina in cui è stato riscontrato un valore pari a 12,6 ng/ml al 26°gg, che è ulteriormente diminuito nei controlli successivi sino ad avere 6,3 ng/ml al 43°gg, si è avuto aborto al 55° gg.
Secondo numerosi studi, la perdita dei cuccioli nel periodo fino allo svezzamento è del 10-35%. Più del 65% della mortalità avviene durante il parto o durante la prima settimana di vita (Englan and Von Heimendahl, 2013). La mortalità è più elevata in caso di distocia e il 60-70% di queste terminano con un C-S (Gaudet, 1985; Darvelid and Linde-Forsberg, 1994; Bergstrom et Al., 2006). Così come avviene nell’ostetricia umana il C-S effettuato in emergenza risulta in un rischio più elevato per la madre ed i feti rispetto ad un C-S programmato (Moon et Al., 2000).
I nostri risultati per i C-S programmati (Gruppo D), sebbene scarsi, sembrano comparabili, in termini di sopravvivenza dei cuccioli, con quelli riportati in letteratura (Smith, 2007). Nella pratica clinica ambulatoriale l’utilizzo dell’Ovulation Test® per decidere se effettuare C-S è risultato essere di grande utilità e ci ha permesso di ottenere il 100% dei cuccioli vivi alla nascita e 14/16 (87,5%) cuccioli vitali ad una settimana dal parto (uno è stato soppresso perché anasarca).
Per numerose patologie del ciclo o della gravidanza l’utilizzo del dosaggio del P4 è risultato essere importante per la diagnosi, la prognosi e la terapia
(Gruppo E).
Si parla di anestro primario (caso 1) quando non vi è stata attività estrale nei primi 24 mesi di vita (pubertà ritardata) (England and Von Eimendahl, 2013). Prima di instaurare una terapia per la risoluzione di questo problema occorre accertarsi che non si sia effettivamente verificato un ciclo estrale e che ci si trovi in fase di anestro. L’induzione dell’estro può essere
effettuato con PMSG per 5 gg associato ad hCG al giorno 5. Può essere impiegata anche la somministrazione di un inibitore della prolattina (England and Von Eimendahl, 2013).
La cabergolina è un derivato ergolinico con azione anti-prolattinica, che si manifesta in conseguenza di uno stimolo diretto dei recettori D2 dopaminergici presenti sulle cellule lattotrope ipofisarie.
Viene utilizzata:
− nell’interruzione di gravidanza, durante la seconda metà, associata o meno a cloprostenolo, anche se questo utilizzo non è autorizzato nel cane (Wanke et Al., 2002; Nöthling et Al., 2003; Corrada et Al., 2006b);
− nell’iperplasia mammaria, associata ad aglepristone (England and Von Heimendhal, 2013);
− nella piometra, associata alle prostaglandine (Corrada et Al., 2006a; England et Al., 2007);
− nella pseudogravidanza (England and Von Heimendhal, 2013);
− nelle neoplasie mammarie e pre-mastectomia (England and Von Heimendhal, 2013).
Inoltre la somministrazione degli agonisti della dopamina diminuisce la durata dell’anestro (Van Haaften et Al., 1989; Okkens et Al., 1985) o induce estro in caso di anestro prolungato (Jöchle et Al., 1989; Arbeiter et Al., 1988). In caso di anestro primario l’utilizzo della cabergolina è di 5 mg/kg pv una volta al giorno per 7-10 gg o fino al momento del proestro (Root Kustritz, 2008). Nel nostro caso clinico questo trattamento è stato efficace nell’indurre estro dopo 12 gg dall’inizio della sua somministrazione.
(caso 2) , la diagnosi differenziale può includere sia lo split-heat che la presenza di cisti follicolari. Nel primo caso si dovrebbero osservare delle interruzioni del calore mentre nel secondo questo continua per un tempo superiore ai 30 giorni. Il dosaggio del progesterone ci permette di confermare la non avvenuta ovulazione e di monitorare l’efficacia della terapia, da effettuarsi con hCG, per tentare di indurre l’ovulazione (England and Von Eimendahl, 2013). Nel nostro caso sono stati effettuati 5 dosaggi del P4 nell’arco di 30 gg, osservando valori compresi tra 0,77 e 1,59 ng/ml,
tutti con citologia vaginale tipica della fase estrale. Non vi è stata risposta alla terapia con hCG, per cui si è proceduto ad ovario-isterectomia su richiesta del proprietario. Questa mancata risposta è un’evenienza frequente in questi casi (England and Von Eimendahl, 2013).
Una ulteriore anomalia del ciclo è l’accorciamento dell’intervallo fra i cicli. Questa può essere dovuta a mancata ovulazione, fase luteinica breve o ad anestro breve (England and Von Eimendahl, 2013). Nel caso incluso in questa tesi (caso 5) l’ovulazione era avvenuta (P4=7,4 ng/ml) tantè che si era
proceduto all’IA. Al momento della diagnosi di gravidanza al 25° gg la cagna risultava vuota e la concentrazione di P4 risultava essere 6,7 ng/ml, assai più
bassa di quanto atteso (Gunzel-Apel et Al., 2006). Si sospettava quindi ipoluteinismo benché questo non giustificasse la mancata gravidanza (era comunque >2 ng/ml). Il ritorno in proestro di questa femmina è avvenuto dopo soli 2 mesi dall’ovulazione precedente confermando una durata inferiore alla norma della fase luteinica. Questa condizione può presentarsi in un unico ciclo o ripetersi in cicli successivi (England and Von Eimendahl, 2013).
Le patologie uterine sono un altro importante capitolo delle patologie cliniche della cagna. Le più frequenti sono l’endometrite, l’iperplasia
endometriale cistica e piometra (England and Von Eimendahl, 2013). La piometra si ha classicamente durante il diestro o più raramente durante la gravidanza e consiste in un accumulo di materiale purulento in utero. La patogenesi coinvolge la stimolazione dell’utero da parte degli estrogeni seguita da periodi di influenza del progesterone che determina proliferazione endometriale, secrezione delle ghiandole uterine, chiusura della cervice e riduzione delle contrazioni miometriali. Inoltre il progesterone ha un effetto negativo sulla protezione immunitaria dell’utero da parte dei leucociti. Nel 35% dei casi di piometra si riscontra linfopenia e nel 70% dei casi di piometra si riscontra E. coli, responsabile del rilascio di endotossine che possono dare shock settico (England and Von Eimendahl, 2013). Invece l’endometrite è una infiammazione dell’endometrio di minore entità che può portare ad infertilità. Le infezioni batteriche svolgono un ruolo fondamentale nello sviluppo di questa patologia (England and Von Eimendahl, 2013).
Nella nostra casistica erano presenti casi di endometrite (Caso 6, patologia uterina in estro con P4 pari a 0,35 ng/ml), piometra in diestro (Caso 4, 15 gg
post IA) e piometra concomitante alla gravidanza (caso 3).
La terapia dell’endometrite prevede di effettuare una coltura di campioni citologici endometriali ottenuti per via laparotomica o endoscopica trans cervicale (Groppetti et Al., 2007), ma il prelievo mediante tampone sterile in vagina anteriore durante il proestro risulta più facile e meno invasivo ed è quindi preferibile (Root-Kustritz, 2006).
Per la piometra la terapia elettiva è l’ovario-isterectomia, dopo stabilizzazione clinica del soggetto, mentre la terapia medica prevede, in associazione ad antibiotici e fluido-terapia, l’utilizzo di aglepristone.
farmaco è in grado di competere con questo ormone a livello dei recettori uterini (ha una affinità 3 volte maggiore rispetto al progesterone verso i recettori uterini, quindi spiazza il P4 dai siti recettoriali e, occupandoli, non
li attiverà), provocando svuotamento uterino nonchè aborto o riassorbimento embrionale entro 7 gg dalla somministrazione. Infatti causa luteolisi, apertura della cervice, favorisce le contrazioni uterine e lo svuotamento dell’utero, riducendo le dimensioni dell’organo e gli effetti tossici della piometra (Majolino, 2010; England and Von Eimendahl, 2013). In caso di piometra chiusa, come nella nostra esperienza, occorre effettuare aglepristone 10 mg/kg SC al giorno per 2 giorni da ripetere ogni 7 gg per 4 volte (giorni 1, 2, 7, 15, 23, 29 (Trasch et Al., 2003) o giorni 1, 2, 8, 15, 22, 29 (Fieni, 2006)). In caso di piometra a cervice chiusa si osserva scolo vulvare purulento 36-48 ore dopo l’inizio del trattamento, in genere accompagnato da un significativo miglioramento delle condizioni generali della cagna (England and Von Eimendahl, 2013). Poiché la sua attività non si esplica in assenza di progesterone la sua somministrazione non è necessaria quando ci si trova in proestro-estro, come nell’ultimo caso clinico presentato, od in anestro.
In conclusione la valutazione della concentrazione serica di progesterone è risultata utile per monitorare il ciclo estrale, la gravidanza, per predire la data del parto dal giorno stimato dell’OV, per decidere se effettuare un C- S e per gestire casi clinici.
RIFERIMENTI BIBLIOGRAFICI
Albassam MA, Thomson EC, O’Donnell L. Normal postpartum involution of the uterus in the dog. Can J Comp Med 1981; 34: 217-232
Andersen AC, Wooten E. The estrous cycle of the dog. In Cole HH, Cupps PT: Reproduction in Domestic Animals. New York, Academic Press 1959, pp 359-397
Andersen AC, McKelvie DH, Phemister RD. Reproductive fitness of the female Beagle. J Am Vet Med Assoc 1962; 141: 1451-1454.
Arbeiter K, Brass W, Ballabio R, Jo¨chle W. Estrus induction and fertility with cabergoline, a prolactin inhibitor, in the bitch. J Small Anim Pract 1988;29:781–8. Baba E, Hata H, Fukata T, Arakawa A. Vaginal and uterine microflora of adult dogs. Am J Vet Res 1983; 44: 606-609
Beach FA, Dunbar IF, Buehler MG. Sexsual characteristics of female dogs during successive phases of the ovarian cycle. Horm Behav 1982; 16: 414-442.
Beccaglia M, Luvoni GC. Comparison of the accuracy of two ultrasonographic measurements in predicting the parturition date in the bitch. Jornal of SAP 2006; 47: 670-673
Bergstrom A, Nodtvedt A, Lagerstedt AS, Egenval A. Incidence and breed pledilection for dystocia and risk factors for cesarean section in a Swedish population of insured dogs. Vet Surg 2006, 35: 786-791
Bo S. Cause Infettive di Infertilità. Congresso internazionale del trentennale SCIVAC 1984-2014 e delle società specialistiche. Rimini 29 Maggio-1 Giugno 2014
Bobic Gavrilovic B, Andersson K and Linde Fosberg C. Reproductive patterns in the domestic dog- a retrospective study of the Drever breed. Theriogenology, 2008. 70, 783-794.
Brugger N, Otzdorff C, Walter B, Hoffmann B, Braun J. Quantitative determination of progesterone (P4) in Canine Blood serum using an Enzyme-linked Fluorescence Assay.
Reprod Dom Anim 46, 2011, 870-873
Carmichael LE, Joubert JC: Transmission of Brucella canis by contact exposure. Cornell Vet, 1998, 78:63-73
Chakraborty PK. Reproductive hormone concentrations during estrus, pregnancy and pseudopregnancy in the Labrador bitch. 1987 Theriogenology 27: 827-840
Chapwanya A, Clegg T, Stanley P, Vaughan L. . Comparison of the immulite and RIA assay methods for measuring peripheral boold progesterone levels in greyhound bitches. Theriogenology 2008; 70: 795-799.
Christie DW, Bailey JB, Bell ET. Classification of cell types in vaginal smears during the canine oestrus cycle. Br Vet J 1972; 128: 301-310
Clark RD et al, Medical and Genetic Aspects of Purebred Dogs, 1983.
Concannon PW, Hansel W, Visek WJ. the ovarian cycle of the bitch: plasma estrogen, LH and progesterone. 1975 Biol Reprod 13: 112-121
Concannon P, Hansel W, McEntee K. Changes in LH, progesterone and sexual behavior associated with preovulatory luteinization in the bitch. Biol Reprod 1977; 17: 604-613. Concannon PW, Powers ME, Holder W et al. Pregnancy and parturition in the bitch. Biol Reprod. 1977; 16: 517-526
Concannon PW, Butler WR, Hansel W et al. Parturition and lactation in the bitch: Serum progesterone, cortisol and prolactin. 1978 Biol Reprod 19: 1113-1118
Concannon PW: Effects of hypophysectomy and of LH administration on the luteal phase plasma progesterone levels in the Beagle bitch. J Rdeprod Fertil 1980, 58:407. Concannon PW: Reproductive physiology and endocrine patterns of the bitch. Curr Vet Ther Small Anim Pract, 1983; 8: 886-900
Concannon PW, Digregorio GB. Canine vaginal cytology. In Burke TJ (ed): Small Animal Reproduction and Infertility, A Clinical Approach to Diagnosis and Treatment. Philadelphia, Lea and Febiger, 1986: pp 96-111
Concannon PW, Isaman L, Frank DA, Michel FJ, Currie WB. Elevated concentrations of 13-14-dihydro-15-keto- prostaglandin F-2α in maternal plasma during prepartum, luteolysis and parturition in dogs (canis familiaris). J Reprod Fertil 1988: 84, 71-77 Concannon PW, McCann JP, Temple M. Biology and endocrinoloy of ovulation, pregnancy and parturition in the dog. J Reprod Fertil Suppl 1989; 39: 3-25
Concannon P, Gimpel T, Newton L, Castracane VD. Postimplantation increase in plasma fibrinogen concentration with increase in relaxin concentration in pregnant dogs. AJVR 1996; 57 (9)
Concannon PW. Reproductive cycles of the domestic bitch. Anim Reprod Sci 2011; 124: 200-10.
Corrada Y, Arias D, Rodrigues R et al. Combination dopamine agonist and prostaglandin agonist treatment of cystic endometrial hyperplasia complex in the bitch. Theriogenology 2006°, 66 (6-7), 1557-1559
Corrada Y, Rodriguez R, Tortora M et al. A combination of oral cabergolina and double cloprostenolo injections to produce third-quarter gestation termination in the bitch. Journal of the American Veterinary Medical Association. 2006b, 42, 366-370.
Darvelid AW, Linde-Forseberg C. Dystocia in the bitch: a retrospective study of 182 cases. J Small Anim Pract, 1994, 35: 402-407
Davidson A. uterine monitoring during pregnancy. Proceedings for annual meeting. Society for theriogenology. Baltimore, 4-6 dec; 1998: 123-125
Davidson A. Current concepts on infertility in the bitch, Waltham Focus, vol. 16 (2), 2006, pag.13-21
Davidson A. When and how caesarian section can be avoided. V Biannual EVVSAR Congress Budapest 2006a, 7-9 April.
Davidson A. and Baker T. Reproductive Ultrasound of the Bitch and Queen. In Topics in Companion Animal Medicine. Elsevier Inc. Volume 24, number 2, May 2009. p. 55-63 Doig PA, Ruhunke HL, Bosu WTK: The genital Mycoplasma and Ureaplasma of healthy and diseased dogs. Can J Comp Med 1981, 45:223
Dubey JP, Greene CE, Lappin MR: Toxoplasmosis and neosporosis. p. 818. In Greene CE (ed): Infectious Diseases of the Dog and Cat. WB Saunders, Philadelphia, 1990
England GCW, Allen WE. Studies on canine pregnancy using B-mode ultrasound:
diagnosis of early pregnancy and the number of conceptus. J Sm Animal Prac 1990; 31: 321-323
England GCW. Pregnancy diagnosis, abnormalities of pregnancy and pregnancy
termination. In: Simpson G. Manual of small animal reproduction and neonatology. 1998: 113-126.
England Gc, Freeman SL and Russo M. Treatment of spontaneous piometra in 22 bitches with combination of cabergolina and cloprostenol. Veterinary Record 2007, 160 (9), 293-296.
England GCW, Russo M. Breeding management of the bitch. In Bonagura JD, Twedt DC, editors. Current veterinary therapy XIV. Philalphia: WB Saunders; 2008. p. 974-9. England G, Von Heimendahl A. Riproduzione e neonatologia del cane e del gatto. Seconda
Evans JM et al, The Book of the Bitch: A Complete Guide to Understanding and Caring for Bitches, 1988.
Feldman EC, Nelson RW. Canine female reproduction. In: Feldman EC, Nelson RW. Canine and feline endocrinology and reproduction. Philadelphia: WB Saunders; 1977: 399-480.
Feldman EC, Nelson RW. Canine female reproduction. In: Feldman EC, Nelson RW. Canine and feline endocrinology and reproduction, second edition. WB Saunders Company, 1996; p525-671
Feldman N. Infertility, associated breeding disorders and disorders of sexual development. In: Canine and feline endocrinology and re production. Philaldephia: WB Saunders; 1996: 619-648 (cap.22)
Feldman EC, Nelson RW. Endocrinologia e riproduzione del cane e del gatto, edizione italiana a cura di Giorgio Aria, 2a edizione, 1998, UTET.
Feldman EC, Nelson RW. Canine and feline endocrinology and reproduction, 3rd ed, Elsevier Science, 2004.
Fieni F. Clinical evaluation of the use of aglepristone, with or without cloprostenol, to treat cystic endometrial hyperplasia-pyometra complex in bitches. Theriogenology 2006, 66, 5-10.
Fontbonne A. New trends in imaging of the reproductive tract in dogs and cats. V Biannual EVVSAR Congress. Budapest, 7-9 april, 2006
Freshman J. Pregnancy and profit: a healthy bitch is healthy business. Proceedings for annual meeting. Society for theriogenology. Baltimore, 4-6 dic; 1998: 118-122
Gaudet AD. Retrospective study of 128 cases of canine dystocia. J Am Anim Hosp Assoc, 1985, 21: 813-818
Goodman M: Ovulation Timing Concepts and Controversies. In Veterinary Clinics of North America: Small animal practice, Clinical Theriogenology, 2001, Volume 31, Number 2, March
Goodwin M, Gooding KM, Regnier F. Sex pheromone in the dog. Science. 1979. 203: 559-561.
Groppetti D, Pecile A, Arrighi S and Cremonesi F. Endometrial cytology in the bitch: nuclei measurement in different phases of the estrous cycle and in uterine dosorders. Theriogenology 2007, 68: 499 (abstract)
Gunzel-Apel AR, Zabel S, Bunck CF, Dieleman SJ, Heinspanier A, Hoppen H-O. Concentrations of progesterone, prolactin and relaxine in the luteal phase and pregnancy in normal and short-cycling German Shepherd dogs. Theriogenology 2006, Vol 66, 1431-1435
Hannon W, Atkinson MA, Ball DJ, Lorenz RG, Mattson P, Moore DM, Whitney RJ. Assessing the quality of immunoassay system: radioimmunoassay and enzyme, fluorescence and luminescence assay. NCCLS, I/LA 23 Approved guidlines. Wayne, PA. 2004.
Holst PA, Phemister RD. Onset of diestrus in the beagle bitch: Definition and significance. 1974 Am J Vet Res 35: 401-406
Holst PA. Canine re production. A Breeder’s Guide, Ipine Publications, 1985 pp 122-126 Houillon C. Embriologia dei vertebrati. 2° ed. 1996, Casa Editrice Ambrosiana, Milano Jeffcoate IA, Lindsay FEF: Ovulation detection and timing of insemination based on hormone concentrations, vaginal citology and the endoscopic appereance of the vagina in domestic bitches. J Reprod Fertil 39 (suppl), 1989: 227-287
Jeffcoate Ian. Physiology and endocrynology of the bitch. In: England GCW, Harvey M. Manual of small animal re production and neonatology. BSAVA 1998. p.1-9
JeffCoate Ian. Physiology and endocrinology of the bitch. In: England GCW, Harvey M. Manual of small animal re production and neonatology. UK: BSAVA; 2004. p.1-15
Jo¨chle W, Arbeiter K, Post K, Ballabio R, D’Ver AS. Effects on pseudopregnancy, pregnancy and interoestrous intervals of pharmacological suppression of prolactin secretion in female dogs and cats. J Reprod Fertil Suppl 1989;39:199–207.
Johnston SD. Parturition and dystocia in the bitch. In: Morrow DA. Current therapy in theriogenology; 1986: 500-5001.
Johnston SD, Raksil S: Fetal loss in the dog and cat. Vet Clin North Am Small Anim Pract 1987, 17:535
Johnston SD: Clinical approach to infertility in bitches with primary anestrus. Vet Clin North Am Small Anim Pract 1991, 21:421.
Johnson CA, Walker RD: Clinical signs and diagnosis of Brucella canis infection. Compend Contin Educ Pract Vet 1992, 14:763
Johnston SD, Olson PN, Root MV: Clinical approach to infertility in the bitch. Semin Vet Med Surg (Small Anim), 1994, 9:2
Johnston SD, Root MV: Serum progesterone timing of ovulation in the bitch. In Proceedings of the Annual Meeting of the Society for Theriogenology, San Antonio, Texas, 1995; p. 195-203
Johnson CA, Nachreiner RF, Mullaney TP et al: Reproductive manifestations of hypothyroidism. Canine Pract 1997, 22:29
Johnston SD, Root Kustritz MV, Olson PNS. Canine and Feline Theriogenology. J Soc Theriogenol WB Saunders, Philadelphia. 2001
Jones DE and Joshua JO. Reproductive clinical problems in the dog. Wright Group, 1982, Texas
Kennedy PC and Miller RB. The female genital system. In: Patology of domestic animals, 4th edn, ed. K Jubb et Al., 1992, pp 349-470. Academy press, San Diego
Kreeger TJ, Seal US. Circannual prolactin rhythm in intact dogs housed outdoors.