Conclusioni - Inibizione delle chinasi PDK1 e Aurora A: effetto su cellule di glioblastoma mult

Questi risultati, analizzati alla luce di esperimenti analoghi presenti in letteratura riguardo al ruolo delle CSC, di PDK1 e di Aur-A in oncologia, hanno evidenziato che:

 PDK1 risulta essere solo in minima parte coinvolta nella proliferazione delle cellule di GBM, mentre Aur-A possiede un ruolo più significativo in tal senso. L’inibizione simultanea di queste proteine produce un effetto additivo o sinergico nell’inibizione della proliferazione delle cellule U87MG, rendendo l’attività antiproliferativa rilevante, a differenza dei risultati limitati ottenuti in seguito all’inibizione selettiva dell’una o dell’altra proteina. L’approccio multi-targed diretto a queste due chinasi, si prefigura quindi come possibile strategia vincente per limitare quei fenomeni di chemioresistenza osservati nello sviluppo clinico degli inibitori selettivi di PDK1 ed Aur-A.

 SA16, l’inibitore duale diretto verso PDK1 ed Aur-A sintetizzato nel Dipartimento di Farmacia dell’Università di Pisa, ha dimostrato possedere un’attività antiproliferativa nei confronti delle cellule U87MG paragonabile a quella ottenuta in seguito al trattamento simultaneo con Alisertib e MP7. Ai benefici di un approccio multi-targed per la terapia del GBM, SA16 aggiunge i vantaggi della somministrazione di un unico principio attivo.  L’inibizione di PDK1 non ha causato una significativa diminuzione della proliferazione delle CSC, mentre quella di Aur-A ha prodotto un considerevole effetto antiproliferativo dose-dipendente. Questi dati, alla luce di risultati analoghi presenti in letteratura, suggeriscono che PDK1 sia maggiormente implicata nei processi di formazione delle CSC, mentre Aur-A possiede un ruolo importante nei processi di divisione cellulare di queste cellule.

 Il co-trattamento delle neurosfere con MP7 ed Alisertib ha prodotto un effetto additivo o sinergico nell’inibizione della loro proliferazione. Questo conferma nuovamente il beneficio apportato da un’azione multitarged nella cura del GBM, anche per quanto riguarda la componente staminale, quella più resistente all’azione degli attuali farmaci utilizzati in terapia. SA16 ha causato una diminuzione della proliferazione delle neurosfere, maggiore di quella osservata in seguito al co-trattamento.

 Il differenziamento delle CSC è stato dimostrato essere promosso dall’inibizione di Aur- A. Questo costituisce un valido strumento terapeutico, poiché, tramite il loro differenziamento, queste cellule diventano più sensibili all’attività degli agenti antitumorali.

I dati ottenuti hanno quindi dimostrato che l’inibizione simultanea dei pathway regolati da Aur-A e PDK1, si traduce in una marcata riduzione della proliferazione delle cellule tumorali di GBM, e, fatto più significativo, della sottopopolazione staminale del tumore, tramite anche il suo differenziamento. Tutto questo a fronte di risultati non soddisfacenti quando l’inibizione è stata indirizzata verso una sola delle due proteine. Questo conferma gli scarsi effetti antitumorali, già noti in letteratura, di composti inibitori di Aur-A o PDK1 selettivi,

testati singolarmente. L’inibizione simultanea delle due proteine chinasiche, PDK1 ed Aur- A, si profila quindi come una valida strategia per contrastare lo sviluppo del GBM.

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Ringraziamenti

Desidero ringraziare tutte le persone che mi hanno aiutato per la stesura di questa tesi. La Prof.ssa Claudia Martini, dalle cui coinvolgenti lezioni di biochimica, è nata quella passione per la materia che mi ha portato a scegliere questo ambito di ricerca.

La Dott.ssa Simona Daniele, per l’infinita pazienza e la sua competenza nell’insegnarmi il lavoro di laboratorio, e non solo per la stesura di questa tesi.

La Dott.ssa Deborah Pietrobono, per la sua accurata supervisione delle mie attività, e per i suoi preziosi consigli pratici.

Vorrei inoltre ringraziare quelle persone che, anche se direttamente coinvolte, hanno, in un modo o nell’altro, contribuito al raggiungimento di questo mio importante traguardo. In primis la mia famiglia, che mi ha sempre lasciato libero di seguire le mie passioni, senza interferire nelle mie scelte, e che mi ha sempre messo nelle condizioni migliori per portare a termine il mio percorso di studi, senza farmi mancare nulla. Desidero ringraziare particolarmente i miei genitori per aver sempre coltivato in me l’istinto della curiosità, e avermi fatto comprendere l’importanza dello studio e della ricerca, valori senza le quali non avrei intrapreso questi studi universitari.

Ringrazio i miei amici e le nostre risate, perché la vita, fortunatamente, non si riempie con il solo lavoro.

Ringrazio Virginia, che ha portato serenità e soprattutto felicità nella mia vita, per la sua capacità unica di farmi dimenticare immediatamente ogni problema.

Nel documento Inibizione delle chinasi PDK1 e Aurora A: effetto su cellule di glioblastoma multiforme e sulla sottopopolazione staminale. (pagine 64-76)