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Una tecnica istochimica

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Academic year: 2021

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Bacci S: una tecnica istochimica

Descrizione

Colorazione dei mastociti con avidina rodaminata

Stock solution: TRITC-avidin (e.g., Sigma Milano Italia), 1 mg/mL; diluito 1:400 per l’uso (Concentrazione finale: 2.5 µg/mL).

Fissazione delle cellule o dei tessuti: 4% in formaldeide in PBS o altro fissativo: Carnoy’s, Bouin’s, Acetone freddo ,

Ethyldimethylaminopropyl-carbodiimide (EDCDI), 4% in PBS 0.1 mol/L pH 6.9.,

Sezioni: Il tessuto deve essere incluso in paraffina o crioconservato.

Colorazione

1) Bloccare i siti aspecifici con una soluzione proteica (1% BSA in PBS).

2) Colorare con avidina roda minata 2, 5 µg/mL, 60 min a 37°C. 3) Lavare in PBS e acqua bi distillata, montare con medium appropriato. Riferimenti bibliografici

Tharp MD, et al. . J Histochem Cytochem. 1985 Jan;33(1):27-32 Bonelli A, et al. Int J Legal Med. 2003 Dec;117(6):331-4. Bechi P, et al. Dig Dis Sci. 1995 Oct;40(10):2207-13.

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Protocollo - Bacci S: una tecnica istochimica

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