LIETUVOS SVEIKATOS MOKSLŲ UNIVERSITETAS VETERINARIJOS AKADEMIJA
VETERINARIJOS FAKULTETAS UŽKREČIAMŲJŲ LIGŲ KATEDRA
JULIJA LEVICKA
ŠUNŲ PROSTATOS INTRAEPITELINöS NEOPLAZIJOS
(PIN) HISTOMORFOLOGINöS FORMOS
Veterinarin÷s medicinos vientisųjų studijų
MAGISTRO BAIGIAMASIS DARBAS
Darbo vadovas: Lekt. dr. Nomeda Juodžiukynien÷
PATVIRTINIMAS APIE ATLIKTO DARBO SAVARANKIŠKUMĄ
Patvirtinu, kad įteikiamas magistro baigiamasis darbas
ŠUNŲ PROSTATOS INTRAEPITELINöS NEOPLAZIJOS (PIN) HISTOMORFOLOGINöS FORMOS
1. Yra atliktas mano paties;
2. Nebuvo naudotas kitame universitete Lietuvoje ir užsienyje;
3. Nenaudojau šaltinių, kurie n÷ra nurodyti darbe, ir pateikiu visą panaudotos literatūros sąrašą.
2013 m. sausis 24 d. Julija Levicka
(data) (autoriaus vardas, pavard÷) (parašas)
PATVIRTINIMAS APIE ATSAKOMYBĘ UŽ LIETUVIŲ KALBOS TAISYKLINGUMĄ ATLIKTAME DARBE
Patvirtinu lietuvių kalbos taisyklingumą atliktame darbe. 2013 m. sausis 24 d. Julija Levicka
(data) (autoriaus vardas, pavard÷) (parašas)
MAGISTRO BAIGIAMOJO DARBO VADOVO IŠVADOS DöL DARBO GYNIMO 2013 m. sausis 24d. Lekt. dr. Nomeda Juodžiukynien÷
(data) (darbo vadovo vardas, pavard÷) (parašas)
MAGISTRO BAIGIAMASIS DARBAS APROBUOTAS KATEDROJE
2013 m. sausis 24 d.
(aprobacijos data) (katedros ved÷jo/ vardas, pavard÷) (parašas)
Magistro baigiamasis darbas yra patalpintas į ETD IŠ
(gynimo komisijos sekretor÷s/iaus parašas)
Magistro baigiamojo darbo recenzentas
(vardas pavard÷) (parašas)
Magistro baigiamųjų darbų gynimo komisijos įvertinimas:
Levicka J. (2013) Histomorphological forms of dogs prostatic intraepithelial neoplasia (PIN). Department of Infectious Diseases Veterinary Academy of Lithuanian University of Health Sciences.
SUMMARY
In this studies histomorphological examination of 77 dogs prostate glands was performed the 14 mongrel and 63 pure breed dogs prostates were examined. Prostatic intraepithelial neoplasia was found in prostates of 13 dogs (16.8 percent), of them: in 2 mongrel dogs prostate (14.2 percent) and in 11 pure breed dogs prostates - (17.4 percent). All dogs divide into the three age groups: young - 1-5 years, middle-ages - 6-10 years and old – 11 years and older. In youngest dogs 1-1-5 years PIN was found in 1 from 18 dogs (5.5 percent), in middle age 6-10 years group - in 7 from 42 dogs (16.6 percent), and in 11-16 years group - 5 from 17 dogs (29.4 percent). PIN was commonly in Scottish shepherd dogs (50 percent) and German shepherd dogs (57.1 percent). Low grade PIN was found in 1-5 years (5.5 percent), and in 10 years age dogs group (7.1 percent). High grade PIN found in 6-10 years age (9.5 percent) and in 11-16 years age group (29.4 percent). High grade PIN with carcinoma found in (2.3 percent) prostates 1 from 42 of 6-10 age group and 2 from 17 of 11-16 group (11.7 percent). Tuffting PIN pattern were found in 4 dogs prostates (5.1percent). Micropapillary PIN were found in one dog prostate (1.2 percent), Cribriform pattern was found in 3 dog prostates (3.8 percent). Flat pattern was found in one dog prostate (1.2 percent).
TURINYS
ĮVADAS...6
1. LITERATŪROS APŽVALGA...7
1.1. Nepažeistos prostatos morfologija ir histologija ... 7
1.2. Prostatos intraepitelin÷ neoplazija (PIN)... 9
1.3. Aukšto laipsnio PIN formos ... 10
1.4. PIN ryšys su karcinoma... 12
2. TYRIMŲ METODAI...15
2.1. Tyrimų atlikimo vieta ... 15
2.2. Tyrimo medžiaga ir metodai... 15
2.3. Histologinis tyrimas ... 15
2.4. Statistin÷ analiz÷... 15
3. TYRIMŲ REZULTATAI ...16
3.1. PIN dažnumas šunims ... 16
3.2. PIN dažnumas grynaveislių ir mišrūnų šunų amžiaus grup÷se ... 17
3.3. PIN dažnumas šunų veisl÷se ... 18
3.4. ŽLPIN ir ALPIN dažnumas amžiaus grup÷se ... 19
3.5. ALPIN su karcinoma pasireiškimo dažnumas... 20
3.6. ALPIN formų pasireiškimo dažnumas ... 21
3.7. Mikropapilin÷ PIN forma... 22
3.8. Kuokštin÷ PIN forma... 21
3.9. Kribriformin÷ PIN forma... 25
3.10. Plokščioji PIN forma... 27
4. TYRIMŲ REZULTATŲ APTARIMAS...28
IŠVADOS...30
SANTRUMPOS
HE - hematoksilinas ir eozinas
PIN – prostatos intraepitelin÷ neoplazija
ALPIN - aukšto laipsnio prostatos intraepitelin÷ neoplazija
PSA – prostatos specifinis antigenas
PIA – proliferacin÷ uždegimin÷ atrofija
GPH – gerybin÷ prostatos hiperplazija
VIII factor releted antigen – su VIII kreš÷jimo faktoriumi susijęs antigenas
PCNA – proliferuojančių ląstelių branduolių antigenai
ĮVADAS
Šunų prostatos piktybiniai navikai n÷ra dažni. Dažniausiai pasitaiko adenokarcinoma, pereinamojo epitelio ląstelių karcinoma, ploksčialąstelin÷ karcinoma ir limfoma (antrinis navikas).
Kliniškai PIN niekaip nepasireiškia, nebent jei iš jos yra išsivystęs navikas – karcinoma, kuri pasireiškia jai būdingais simptomais. Prostata gali būti suaugusi su aplinkiniais audiniais, skausminga, nelygi, be vidurin÷s linijos.
PIN reikšm÷ šunų prostatos karcinomos vystymęsi galutinai dar n÷ra ištirta.
Pagrindinis PIN požymis tai histologinis vaizdo pakitimas. Normalus prostatos sinusų epitelis sudarytas iš vienodo dydžio stulpinių ląstelių, kurių branduoliai d÷stosi viena eile prie pamatin÷s membranos, vienodos formos, dydžio su neryškiais branduol÷liais. PIN atveju epitelių ląstelių branduoliai tampa pailgi, įvairios formos, d÷stosi keliomis eil÷mis keliais aukštais vieni virš kitų, susigrūda, išryšk÷ja branduol÷liai. Sunkiu PIN atveju pradeda neįprastai d÷stytis, pačios ląstel÷s irgi susigrūda, d÷stosi kuokštais, sijomis ir taip užpildo acinuso spindį.
Procesai vykstantys šunų prostatos liaukoje morfologiškai ir funkciškai panašūs į žmogaus prostatoje vykstančius procesus. Žmon÷s ir šunys yra stambūs žinduoliai, kuriuose gali prad÷ti vystytis prostatos v÷žys. Šunims ši liga aptinkama rečiau ir n÷ra žinoma tiksli kilm÷s priežastis. Šunims sergantiems prostatos v÷žiu paprastai tyrimai atliekami jau su pažengusia liga, kai nebereaguoja į androgenų nepritekliaus terapiją. Panašiai kaip ir žmon÷ms, sergantiem šunims dažnai atsiranda osteoblastinių metastazių kauluose, dubens, juosmens ir stuburo skausmai. Pastebimi ir kiti klinikiniai požymiai: svorio netekimas, mieguistumas ir sutrikęs šlapinimasis ir / arba tuštinimasis.
Mūsų žiniomis piktybiniai pažeidimai šunų prostatoje ankščiau nebuvo aprašyti. (David J. Waters 1997).
Darbo tikslas: ištirti PIN dažnumą Lietuvoje auginamiems šunims. Darbo uždaviniai:
1. LITERATŪROS APŽVALGA
1.1. Nepažeistos prostatos morfologija ir histologija
Prostatoje gaminamas s÷klinis skystis, kuris yra svarbus spermatozoidų medžiagų apykaitai ir mitybai, taip pat slopinama pH rūgštine terp÷, kuri padidina spermatozoidų išgyvenamumą patelių dauginimosi organuose. Be to, s÷klinis skystis turi stiprų antibakterinį poveikį. (Barsanti, 1995). Žmogaus prostatos neuroendokrinin÷s ląstel÷s išskiria chromograniną-A ir serotoniną. Vyrauja prieštaringos nuomon÷s apie neuroendokrininių ląstelių funkciją šunų prostatoje. (Angelsen et al., 1997 ir Ismail et al, 2002). Sveiko šuns priešin÷ liauka sudaryta iš tvarkingai, tankiai susispaudusių epitelinių ląstelių ir nedaugelio kapiliarų, kurie yra stromoje ir suteikia liaukai skiltelinį pavidalą. Žmonių, šunų, ir kačių piešin÷ liauka anatomiškai sudaryta iš dvieju skilčių: proksimalin÷s šlapl÷s ir ovalo formos retroperitonin÷s liaukos, kuri juosia šlapimo pūsl÷s kaklelį.
http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1090023308002670
1.2. Prostatos intraepitelin÷ neoplazija (PIN)
PIN yra pakitusių prostatos epitelio ląstelių proliferacija acinusuose be invazijos į stromą ir ląstelių displazija latakuose bei latak÷liuose (McNeal JE 1996, McNeal JE 1986, Bostwick DG 1987). PIN išpradžių buvo suskirstyta nuo 1 iki 3 laipsnio, tačiau pagal šiuolaikines rekomendacijas buvo padalinta į du laipsnius (žemo ir aukšo). Vienetu buvo žymimas žemo laipsnio PIN, o dvejetu ir trejetu aukšto laipsnio PIN. Diagnozavus ALPIN, tai ženklas, kad turi būti atlikta patologin÷ prostatos biopsija, transuretralin÷ prostatos rezekcija arba radikali prostatoektomija. Tarp patologų priimta, kad žemo laipsnio PIN neturi būti nurodoma histologiniuose atsakymuose d÷l jos klinikinio nereikšmingumo.
Aukšto laipsnio PIN laikoma kaip labiausiai tik÷tina adenokarcinomos stadija. PIN yra ryškus ženklas adenokarcinomos atsiradimui, atlikus pakartotiną biopsiją neretai identifikuojama ir piktybin÷ karcinoma. Daugeliui pacientų PIN su karcinoma išsivysto per 10 metų. Su šiuolaikine vaizdo ir ultragarso technika PIN diagnozuoti neįmanoma, nes PIN nesukelia pokyčių PSA serume. Šiuo metu naudojamas vienintelis patikimas diagnostikos metodas, tai prostatos biopsija. PIN tiesiogiai susijusi su progresuojančiu fenotipo ir genotipo sutrikimu, kuris panašus į v÷žinį o ne į įprastą prostatos epitelio ląstelių pakitimą su pažengusią prostatos karcinogenez÷s stadija.
Aukšto laipsnio PIN yra ankščiausia karcinogenez÷s stadija, veikianti fenotipinius, biocheminius ir genetinius gerybinio v÷žio pokyčius pamatin÷je membranoje ir acinusuose.
.JAV kasmet atliekama 130000 prostatos biopsijų ir vidutiniškai nustatoma 198500 prostatos v÷žio atvejų. (Greenlee R 2001) Atlikus prostatos biopsijas suskaičiuotas ALPIN pasireiškimo vidurkis yra 9% (diapazonas kinta nuo 4% iki 16%). Tai yra 115000 ALPIN be karcinomos atvejų kasmet. (Greenlee R 2001, Steiner MS 2001) PIN atvejų dažnumas ir apimtis did÷ja su pacientų amžiumi. (Qian J 1997, Lee F 1989, Sakr WA 1993)
“PIN“ terminą pirmieji prad÷jo vartoti Bostwick ir Brawer. V÷liau, McNeal ir Bostwick PIN suskirst÷ į tris laipsnius. (Michael J. Haggman 1997). PIN asimetriškai išplečia pačią prostatą. Gali tur÷ti neigiamos įtakos pilvo organams, tod÷l gali atsirasti dizurija. Taip pat pasitaiko hematurija, anoreksija ir svorio kritimas. (Nicola M A Parry BSc MSc BVSc MRCVS).
1.3. Aukšto laipsnio PIN formos
Šiuo metu žinomos 4 pagrindin÷s ALPIN formos: kuokštin÷,
mikropapilin÷, kribriformin÷,
plokščioji. (žymimos nuo 1 iki 4). (Bostwick DG, Amin MB, 1993).
Kuokštin÷ PIN forma yra labiausiai paplitusi, žinomi 97% atvejų, tarp kurių dauguma būna mišrūs. Teigiama, kad nuo struktūros ALPIN klinikin÷ reikšm÷ nepriklauso ir nepaisant to vienoje ataskaitoje buvo teigiama, kad kribriformin÷ struktūra yra rizikingesn÷, tačiau tai buvo paneigta. Kita PIN rūšis sudaryta iš žiedinių ląstelių, mažų neuroendokrininių ląstelių ir putotų ląstelių (Reyes AO, Swanson PE, 1997). Tai gerybinis epitelio išveš÷jimas su PIN inversija. Proliferuoja pamatinių ląstelių sluoksnyje.
PIN proliferuoja i prostaos acinusus keliais skirtingais būdais, panašiai kaip ir prostatos karcinoma. Pirmuoju būdu navikin÷s ląstel÷s perkeičia įprastos sekrecijos epitelio ertmes, nepažeidžia bazinių ląstelių sluoksnio ir pamatin÷s membranos. Ši ALPIN forma vadinama kribriformine. ALPIN židinius sunku atskirti nuo viduląstelin÷s bei vidulatakin÷s karcinomos įprastiniu šviesos mikroskopu. (Bock BJ, Bostwick DG, 1999)
Antruoju būdu yra tiesiogin÷ invazija pro latakus arba liaukos skiltelių sieneles pažeidus pamatin÷s membranos ir bazinių ląstelių sluoksnį. Trečiuoju būdu navikin÷s ląstel÷s invaginuoja tarp bazinių ląstelių ir stulpinių ląstelių sluoksnių, toks reiškinys pasitaiko retai.
Ankstyvoji invazija į jungiamąjį audinį (stromą) tai ankščiausias karcinomos atsiradimo faktas. Pasitaiko prie liaukos skiltelių išorinių maišelių ir gali pasireikšti bazinių ląstelių pakitimais acinusuose. Tokia mikroinvazija užima apie 2% ploto stebint aukštos galios mikroskopais ir pasiskirsto vienodu tankumu visuose PIN formose.
vietose kur pereina į prostatos v÷žį (Bostwick DG, 2000; Sakr WA, 1998; Qian J, 1995; Montironi R, 1997; Montironi R, 1990 ). ALPIN ir prostatos v÷žys yra daugiažidininis ir heterogeninis. (Qian J, 1997, Qian J, 1999)
Citologiškai PIN laipsnis paraleliai auga su prostatos v÷žio laipsniu, kaip ir displazija su mažesne citologine atipija, kuri įvyksta didžiaja dalimi su žemo laipsnio tranzitin÷s zonos prostatos v÷žiu, tuo tarpu ALPIN yra lydinti aplinkyb÷ su aukštesnio laipsnio periferin÷s zonos prostatos v÷žiu. Tačiau, nors tai ir gali tur÷ti klinikinę reikšmę, šis ryšys nebuvo pakankamai ištirtas (2 pav.).
1.4. PIN ryšys su karcinoma
Žmogaus prostatos v÷žio ankstyvieji etapai histologiškai pasireiškia kaip prostatos intraepiteline neoplazija (PIN). PIN Morfologiškai yra apibūdinamas kaip liaukos vidaus ertm÷je esančių acinusų, latakų, pamatin÷s membranos ir epitelio pokyčiai. ALPIN tai prieškarcinomin÷ stadija. (Waters ir Bostwick, 1997 ir Bostwick, 2000).
Šunų PIN kaip v÷žio pirmtakas reikšm÷ yra neaiški. Šunims sergantiems ALPIN, karcinoma aptikta ~ nuo 30% iki 72% (Aquilina ir kt., 1998, Madewell et al, 2004 ir Waters ir kt., 1997).
Dvejuose dideliuose šunų tyrimuose PIN be prostatos karcinomos buvo rasta tik 6 iš193 (3%) ir 0/115. (Madewell et al, 2004 m. Ir Aquilina et al., 1998).
11 šunų 7-17 metų amžiaus grup÷je buvo rasti 6 PIN atvejai (Waters ir Bostwick, 1997b) tačiau trūksta įrodymų, kad v÷žys išsivyst÷ iš prostatos intraepitelin÷s neoplazijos. Šunims prognozuoti karcinomą taip kaip žmon÷ms negalime, nes ryšys tarp PIN ir prostatos karcinomos šunyse dar neaiškus. (Madewell et al, 2004).
Ankstyvos stadijos PIN neturi klinikinių požymių, tod÷l sud÷tinga ją diagnozuoti. Šunims nepasireiškus simptomams biopsija neatliekama. PIN pažeidimai gal÷jo lengvai būti užgožti karcinomos, kuri dalyvauja visur liaukoje ligos paūm÷jimo stadijoje. Yra manoma, kad vyrų prostatos v÷žys kyla iš acinusų periferin÷se arba pereinamose zonose, kurios ankščiau buvo paveiktos prostatos uždegimu. Kitokio tipo uždegiminis pažeidimas išsivysto prostatos epitelio ląstelių išor÷je ir pasireiškia kaip proliferacin÷ uždegimin÷ atrofija PIA. (Palapattu et al., 2005).
Paveiktos ląstel÷s vizualiai gali atrodyti kaip gerybin÷s, bet paradoksalu, kad jos gali prad÷ti sparčiai dalintis. Mutavusios somatin÷s PIA ląstel÷s dažnai randamos šalia karcinomos ir PIN židinių. (Nelson ir kt., 2003).
Paprastai žmogaus prostatos karcinoma dažnai esti daugiažidinin÷, pažeidžianti periferinę ir per÷jimo zonas. Dauguma adenokarcinomų išsivysto iš prostatos sekrecinių ląstelių acinusų (Epstein and Murphy, 1997). Latakin÷ karcinoma pasitaiko rečiausiai. (Ohyama et al., 2001).
Žmogaus v÷žys mikroskopiškai turi heterogeninę morfologiją, pradedant nuo mažų židinių gana lengva diferencijuoti ląsteles, funkciškai panašią į inkstų ląstelių karcinomą arba pereinamojo epitelio ląstelių karcinomą (Epstein ir Murphy, 1997). Kitos neoplazijos pasireiškiančios žmogaus prostatos liaukoje tai yra karcinosarkoma, mezenchiminiai navikai, limfoidiniai navikai ir gemalo ląstelių navikai. (Epstein ir Murphy, 1997).
morfologinių struktūrų balus, gauname skaičių (pvz. 3 + 4 = 7). Didesnis skaičius reiškia agresivesnį v÷žį. Pagal Glisono skalę buvo matuojama ir šunų priešin÷ liauka, bet tų matavimų prognostin÷ reikšm÷ yra nežinoma. Šiuo būdu gana tiksliai prognozuojamos ligos progresavimo ir gydymo pasekm÷s vyrams sergantiems prostatos v÷žiu.
3pav.
Struktūriškai ląstel÷s karcinoma galima diferencujuoti dažant hematoksilinu-eozinu. (Humphrey, 2004)
Apskritai, šunų prostatos v÷žys yra piktybiniai epiteliniai augliai, kurie dažnai atrodo panašiai kaip pačios liaukos struktūrą arba kaip acinarinę struktūrą ir yra klasifikuojami kaip adenocarcinomos. Žinomi pavieniai atvejai, šunų su gerybine prostatos adenoma arba su mazgine hiperplazija. (Gilson ir al., 1992). Fibrosarkoma, l÷jomiosarkoma, hemangiosarkoma, ir limfoma buvo taip pat identifikuotos šunų prostatose (McEntee, 2002 ir Winter, 2006). Nesutariama d÷l šunų prostatos v÷žio ląstelių kilm÷s. Potencialiai, šie augliai gal÷jo atsirasti iš prostatos epitelio acinusų, prostatos gleivin÷s (pavyzdžiui, pereinamoji ląstel÷s karcinoma), ar vidulatakinio epitelio. Histologiškai dauguma šunų prostatos karcinomos yra vidualveolin÷s struktūros (4 pav), bet daugelis turi savyje struktūrą, panašią į pereinamųjų ląstelių karcinomą. Neoplazijos paveikta šuns priešin÷ liauka dažnai turi savyje BPH židinius, liaukines cistas ar pavojingus pūlingus limfoplazmacitinius židinius.
http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1090023308002670
4 pav. Šunų intraepitelin÷s prostatos karcinomos fotomikrografija. Stroma (S), liaukos acinuso spindis (L) yra apsuptas daugialypiu navikinių epitelio ląstelių sluoksniu. Šiame pavyzdyje diagnozuota anizocitoz÷ ir anizokarioz÷. Branduoliai turi savyje euchromatinų, matosi branduol÷liai. taip pat dalyvauja mitozin÷s ląstel÷s (pažym÷tos str÷l÷mis). (didinimas x400).
Buvo atliktas vienas tyrimas kuriame buvo ištirtos 29 šunų prostatos su karcinoma. ALPIN su karcinoma buvo identifikuota 19 iš 29 šunų prostatų (66 %). 85% šunų rasti ALPIN židiniai. ALPIN su metastazine karcinoma aptikta 14 atvejų. Tikslas buvo nustatyti paplitimą ir imunofenotipinį ryšį tarp ALPIN ir karcinomos. Daugumoje šunų prostatų su karcinoma buvo rasti ALPIN židiniai. Tirtos PIN proliferacin÷s bazinių lastelių sluoksnio ardymo savyb÷s, padidinto proliferacijos indekso ir mikrokapiliarų tankumas palygintas su gerybiniu epiteliu. Rezultate teigiama, kad šunų ir žmogaus PIN dalyvauja nuo gerybin÷s epitelio neoplazijos iki karcinomos atsiradimo. Ši pavyzdžių grup÷ buvo įvertinta imunohistochemiškai, charakterizuojant ir palyginant pamatinio sluoksnio ląstelių vientisumą, proliferacinį indeksą, ir mikrokapiliarų tankį. (David J. Waters 1997).
Buvo atlikti imunohistocheminiai tyrimai. Dažymas keratinu 34 beta E12 išryškino pamatinį prostatos epitelio sluoksnį. Tyrime naudotas x200 didinimas, x20 objektyvas ir x10 okuliaras; 0.992 mm² laukas.
2. TYRIMO METODIKA IR ORGANIZAVIMAS
2.1. Tyrimo atlikimo vieta
Tyrimas atliktas 2011-2012m LSMU Užkrečiamųjų ligų katedroje, patologijos skyriuje. Šunys buvo pristatyti į patologijos skyrių su lydraščiu.
2.2 Tyrimo medžiaga ir metodai
Patologin÷ medžiaga buvo paimta paros b÷gyje po šunų gaišimo arba eutanazijos. Buvo tiriamos 77 šunų prostatos. Buvo nustatytas prostatos indeksas (prostatos svoris gramais dalinamas iš gaišenos svorio kilogramais).
2.3. Histologinis tyrimas
Histologiniam tyrimui ruošiami m÷giniai supjaustyti ne storesniais kaip 5mm gabal÷liais ir 2-3 dienas fiksuoti 10% formalino tirpale. V÷liau ruošiniai įlieti į parafiną, sustandinti ir supjaustyti 2-5µm storio gabaliukais. Standinimui naudota „Shandon“ firmos parafino vonel÷, o m÷giniai supjaustyti „Medite“ firmos roginiu mikrotomu. Histologiniai preparatai dažyti hematoksilinu ir eozinu, ir ištirti šviesiniu mikroskopu „Olympus BX41“.
2.4. Statistin÷ analiz÷
Statistiškai buvo įvertintas PIN dažnumas Lietuvoje auginamiems šunims. Iš 77 tirtų šunų grynaveislių-65, mišrūnų-12. Šunų amžius nuo 1 iki 16 metų. Visi šunys suskirstyti į tris amžiaus grupes:
I grup÷ (nuo 1 iki 5m.) 18 šunų (13 veislinių ir 5 mišrūnai)
II grup÷ (nuo 6 iki 10) 42 šunys (34 veisliniai ir 8 mišrūnai)
3 TYRIMŲ REZULTATAI
3.1. PIN dažnumas šunims
Ištyrus 77 šunų prostatas PIN buvo nustatyta 13 atvejų (16,8%). Įvertinus PIN dažnumą amžiaus grup÷se, rasta 1-5 metų grup÷je 1-oje šuns prostatoje iš 17 (5,5%), 6-10 metų PIN aptikta 7- iose šunų prostatose iš 42 (16,6), 11-16 metų grup÷je PIN aptikta 5-iose prostatose iš 18 (29,4%). (1 lentel÷.)
5,5
16,6
29,4
0
5
10
15
20
25
30
35
1-5 m.
6-10 m.
11-16 m.
Amžiaus grup÷s
p
ro
c
.
PIN
3.2. PIN dažnumas grynaveislių ir mišrūnų šunų amžiaus grup÷se
PIN rasta 11-oje iš 63-jų grynaveislių šunų prostatų (42,8%), o mišrūnų prostatose PIN rasta 2-ose iš 14 (14,2%). Grynaveislių šunų amžiaus grup÷se 1-5 metų PIN rasta 1-oje šuns prostatoje iš 12-os (7,6%). 6-10 metų grup÷je 5-iose šunų prostatose iš 34 (14,7%). 11-16 metų grup÷je 5-iose prostatose iš 16 (31,2%). Mišrūnų amžiaus grupese PIN 1-5 metų grup÷je nerasta (0%). 6-10 metų grup÷je PIN aptikta 2-ose iš 8 šunų prostatų (25). 11-16 metų grup÷je buvo tiriamas tik vienas šuo, kurio prostatoje PIN židinių nerasta. (2 lentel÷.)
7,6
14,7
31,2
0
25
0
0
5
10
15
20
25
30
35
1-5 m.
6-10 m.
11-16 m.
p
ro
s
.
Grynaveisliai
Mišrūnai
3.3. PIN dažnumas šunų veisl÷se
Buvo atrinktos 6-ios didesn÷s tuo metu pasitaikiusios veislių grup÷s, tarp kurių: mišrūnai – 14, vokiečių aviganiai – 7, rotveilerių – 6, likę po - 4. Visos kitos veisl÷s neįtrauktos į grafiką, kadangi buvo tik po vieną, du ar tris veislių atstovus. (3 lentel÷.)
PIN
14,2
57,14
16,6
50
25
25
0
10
20
30
40
50
60
M
išr
ūn
ai
Vo
k.
A
vi
ga
ni
ai
Ro
tv
ei
le
ria
i
Šk
ot
ų
av
ig
an
ia
i
Pu
de
lia
i
Do
be
rm
an
ai
p
ro
c
.
PIN
3.4. ŽLPIN ir ALPIN dažnumas amžiaus grup÷se
Šiame grafike pavaizduota ŽLPIN ir ALPIN priklausomyb÷ nuo amžiaus. 1-5 metų grup÷je ŽLPIN - 1, ALPIN – 0 atvejai iš 18 šunų, atitinkamai (5,5%) ir (0%); 6-10 amžiaus grup÷je ŽLPIN – 3, ALPIN – 4 atvejai iš 42 šunų, atitinkamai (7,1%) ir (9,5%), 11-16 amžiaus grup÷je ŽLPIN – 0, ALPIN – 5 atvejai iš 17 šunų, atitinkamai (0%) ir (29,4%). (4 lentel÷.)
5,5
7,14
0
0
9,5
29,4
0
5
10
15
20
25
30
35
1-5 m.
6-10 m.
11-16 m.
p
ro
c
.
ŽLPIN
ALPIN
4 lentel÷. ŽLPIN ir ALPIN dažnumas amžiaus grup÷se
3.5. ALPIN su karcinoma pasireiškimo dažnumas
1-5 metų amžiaus grup÷je karcinoma ir ALPIN nebuvo rasta. 6-10 metų amžiaus grup÷je ALPIN buvo rasta 4 atvejai iš 42 (9,5 %) iš kurių su karcinoma buvo vienas atvejis (2,3 %), 11-16 metų amžiaus grup÷je ALPIN buvo aptikta 5 atvejai iš 17 (29,4%) iš kurių su karcinoma 2 atvejai (11,7%). (5 lentel÷.)
0
9,5
29,4
0
2,3
11,7
0
5
10
15
20
25
30
35
1-5 m.
6-10 m.
11-16 m.
p
ro
c
.
ALPIN
Ca
5 lentel÷. PIN pasireiškimo dažnumas su karcinoma
3.6. ALPIN formų pasireiškimo dažnumas
Ištyrus 77 šunis, kuokštin÷ PIN forma aptikta 4 atvejai (5,1%). Mikropapilin÷ forma nustatyta 1 atvejis (1,2%), Kribriformin÷ forma rasta 3 atvejai (3,8%). Plokščioji forma nustatyta 1 atvejis (1,2%). (6 lentel÷) 5,1 1,2 3,8 1,2 0 1 2 3 4 5 6
Kuokštin÷ Mikropapilin÷ Kribriformin÷ Plokščioji
p
ro
c
.
ALPIN
6 lentel÷. ALPIN formų pasireiškimo dažnumas
3.7. Mikropapilin÷ PIN forma
Mikropapilin÷s PIN formos atveju prostatų acinusuose rastos piršto pavidalo mikroįšaugos į acinusų spindį, ląstelių branduolių formos pasikeitimas – nuo apvalių, esančių ląstelių pamatiniame poliuje iki ovalių arba stipriai ištemptų, esančių ląstel÷s vidurin÷je dalyje ar net apikaliniame poliuje, sudarančių 3-6 branduolių grandin÷les, besid÷stančias išilgai mikroįšaugų. Dalyje branduolių matosi ryškūs branduol÷liai. (5 pav.)
3.8. Kuokštin÷ PIN forma
Acinusų epitelin÷s ląstel÷s vietomis suformuoja ląstelių sangrūdas, kurios ties pamatine membrana ar gretimomis (nepakitusiomis) acinusų ląstel÷mis turi siaurą pagrindą, o sangrūdų dalis, esanti acinusų spindyje – daug platesn÷, sudaryta iš viena šalia kitos ir viena virš kitos besid÷stančių ląstelių ir jų branduolių, kurie yra ovalūs ar pailgi, su ryškiais branduol÷liais, ir d÷stosi labai tankiai vienas šalia kito sudarydami kuokštus. (6 pav.)
3.9. Kribriformin÷ PIN forma
Šiai PIN formai būdinga tai, kad epitelin÷s acinusų ląstel÷s proliferuodamos formuoja siauras sijas iš atskirų acinuso epitelio vietų, kurios nutįsta į spindį ir susilieja viena su kita, ir tokiu būdu susidaro acinuso spindyje sijų tinklas. Ląstelių branduoliams būdingi tokie patys pakitimai kaip ir kitų PIN tipų atvejais. (9 pav.)
9pav. Kribriformin÷ PIN forma. x200 didinimas.
Taip pat buvo rastas vienas vakuol÷tosios PIN formos atvejis. Ląstel÷s d÷st÷si panašiai kaip ir kribriformin÷s formos atveju, o pamatinių ląstelių citoplazmose buvo nuo smulkių iki stambių šviesių vakuolių, kurios HE nesidaž÷ – galimai , tai mucinin÷s medžiagos (manoma, pakitusios sud÷ties liaukos acinusų epitelinių ląstelių sekretas). Jam išryškinti reik÷tų specialaus dažymo - PAS, alciano m÷lio. (11 pav.)
3.10. Plokščioji PIN forma
Šiai PIN formai būdinga tai, kad acinusų epitelin÷s ląstel÷s neformuoja į spindį išsikišančių struktūrų, kaip aukščiau min÷tais atvejais, o suformuoja plokščius židinius – ląstelių daug÷ja, jos „susikrauna“ 3-5 sluoksniais, matomos gausios citoplazmos, branduoliai (su būdingais PIN pakitimais) – ir priklausomai nuo to, kaip yra pra÷jęs pjūvis pjaunant preparatą, gali būti vaizdas, kad „platus kilimas“ sudarytas iš ląstelių ir branduolių, uždengia šalia acinuso esančią stromą arba nutysta į acinuso spindį. (12 pav.)
4. TYRIMŲ REZULTATŲ APTARIMAS
Prostatos intraepitelinę neoplaziją makroskopiškai aptikti neįmanoma, vienintelis patikimas būdas histologinio vaizdo mikroskopinis įvertinimas.
Atlikus histologinį tyrimą, 1-5m. amžiaus grup÷je PIN rasta 5,5%, 6-10 m. amžiaus grup÷je 16,6% o 11-16 m. amžiaus grup÷je 29,4%. Literatūros duomenimis, šunų amžiaus vidurkis, kuriems pasireiškia PIN, yra 9 metai (Bell et al., 1991; Krawiec and Heflin, 1992). Mano atliktais skaičiavimais šunų amžiaus vidurkis siekia 9,7 metų, kuriuose rastas PIN.
Prostatos viduląstelinę neoplaziją radau trylikoje šunų, keturiems iš jų buvo rasta žemo laipsnio PIN, o devyniems - aukšto laipsnio PIN. Literatūroje minima, kad žemo laipsnio PIN netur÷tų būti nurodoma histologiniuose atsakymuose d÷l jos klinikinio nereikšmingumo. (David G Bostwick ir Junqi Qian, 2004). Manoma, kad essant aukšto laipsnio PIN, yra didel÷ tikimyb÷ karcinomos pasireiškimui –manoma, kad tai prieškarcinomin÷ būkl÷. (Waters ir Bostwick, 1997 ir Bostwick, 2000). Trims iš devynių šunų buvo rasta karcinoma: 10, 11 ir 15 metų amžiaus.
Aukšto laipsnio PIN radau 6-10 m. amžiaus grup÷je (9,5%) ir 11-16m. amžiaus grup÷je (29,4%). Aquilina JW ir bendraautorių duomenimis (1998), aukšto laipsnio PIN tirtų šunų prostatose be karcinomos nustat÷ 6 iš 199 šunų (3%). Kiti autoriai, atlikę didel÷s apimties tyrimus, pateikia panašius duomenis: PIN be karcinomos šunų prostatose buvo rasta tik 6/193 (3%) ir 0/115. (Madewell et al, 2004 m. Ir Aquilina et al., 1998). Tačiau kitų tyr÷jų duomenimis aukšto laipsnio PIN šunims su prostatos karcinoma buvo rasta 19 iš 29 (66 %). Tyrimo metu radau aukšto laipsnio PIN su karcinoma 3 iš 9 atvejų (33,3%). Dalis tyr÷jų teigia, kad aukšto laipsnio PIN ir karcinomos dažnumas priklauso nuo šuns amžiaus.
Savo tyrimuose pasteb÷jau, kad PIN pasireiškia dažniau Vokiečių aviganiams (57,14%), Škotų aviganiams (50%), Rotveileriams (16,6%). Kitų tyr÷jų duomenys rodo, kad PIN rizika 2-4 kartus padid÷ja kastruotiems šunims lyginant su nekastruotais (Bell et al. 1991; Teske et al. 2002; Sorenmoet al. 2003; Bryan et al. 2007). Pasteb÷ta priklausomyb÷ tarp kastracijos ir veisl÷s: didesn÷ PIN rizika yra Bigliams, Dobermanų pinčeriams, Anglų kokerspanieliams, Flamandų buvj÷, Vokiečių trumpaplaukiams pointeriams, Škotų baltiesiems terjerams ir Škotų aviganiams . (Teske et al. 2002; Bryan et al. 2007).
mucinin÷s medžiagos (galimai pakitusios sud÷ties liaukos acinusų epitelinių ląstelių sekretas). Jam išryškinti reik÷tų PAS dažymo, alciano m÷lio).
IŠVADOS
1. Šiame darbe PIN atvejų nustatyta 13 šunų.
2. Pagrindinis PIN požymis, tik histologinis vaizdo pakitimas.
3. PIN pasireiškia visose amžiaus grup÷se. Did÷jant amžiui atvejų daug÷jo.
4. PIN 63 grynaveisliams šunims pasireišk÷ visose amžiaus grup÷se, o tarp 14 mišrūnų buvo aptikta tik II amžiaus grup÷je.
5. PIN atvejai vokiečių ir škotų aviganiams buvo dažniausi 57,1 % ir 50%. 6. ŽLPIN aptikta tik I ir II amžiaus grup÷se 5,5% ir 7,1%
7. ALPIN aptikta tik II ir III amžiaus grup÷se 9,5% ir 29,4% 8. ALPIN su Ca aptikta tik II ir III grup÷se 2,3% ir 11,7%
9. Remiantis atliktais skaičiavimais galima teigti, kad PIN ir PIN su Ca dažnumas did÷ja, did÷jant šuns amžiui.
LITERATŪRA
1. Aquilina JW, McKinney L, Pacelli A, Richman LK, Waters DJ, Thompson I, Burghardt WF Jr, Bostwick DG. High grade prostatic intraepithelial neoplasia in military working dogs with and without prostate cancer. 1998 Aug 1;36 (3):189-93.
2. David G Bostwick and Junqi Qian. High-grade prostatic intraepithelial neoplasia. 2004 17, 360–379.
3. Joe Bartges and David J. Polzin. Nephrology and Urology of Small Animals. 2011, 793 4. K. Paclikova, P. Kohout, M. Vlasin. Diagnostic possibilities in the management of canine
prostatic disorders 2006 (1): 1–13
5. Michael J. Haggman, Jill A. Macoska, Kirk J. Wojno mn Joseph E. Oesterling. The relationship between prostatic intraepithelial neoplasia and prostate cancer:critical issues Vol. 158, 12-22, July 1997
6. Nicola M A Parry BSc MSc BVSc MRCVS. Non-inflammatory diseases of the canine prostate gland.
7. W. C. Powell1, R. D. Cardiff2, M. B. Cohen3, G. J. Miller4 and P. Roy-Burman1. Mouse Strains for Prostate Tumorigenesis Based on Genes Altered in Human Prostate Cancer. 2003
8. David J. Waters, David W. Hayden, Ford W. Bell, Jeffrey S. Klausner, Junqi Qian, and David G. Bostwick. Prostatic Intraepithelial Neoplasia in Dogs With Spontaneous Prostate Cancer. 30:92–97 (1997)
9. http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1090023308002670
10. http://www.stjohnprovidence.org/prostateimplant/Evaluation/
11. S.D. Johnston , K. Kamolpatana , M.V. Root-Kustritz , G.R. Johnston. Prostatic disorders in the dog 2000
12. Bostwick DG, Amin MB, Dundore P, et al. Architectural patterns of high-grade prostatic intraepithelial neoplasia. Hum Pathol 1993;24:298–310.
13. Reyes AO, Swanson PE, Carbone JM, et al. Unusual histologic types of high-grade prostatic intraepithelial neoplasia. Am J Surg Pathol 1997;21:1215–1222.
15. de la Torre M, Haggman M, Brandstedt S, et al. Prostatic intraepithelial neoplasia and invasive carcinoma in total prostatectomy specimens: distribution, volumes and DNA ploidy. Br J Urol 1993;72: 207–213.
16. Qian J, Wollan P, Bostwick DG. The extent and multicentricity of high-grade prostatic intraepithelial neoplasia in clinically localized prostatic adenocarcinoma. Hum Pathol 1997;28:143–148.
17. Bostwick DG, Montironi R, Sesterhenn IA. Diagnosis of prostatic intraepithelial neoplasia: Prostate Working Group/consensus report. Scand J Urol Nephrol Suppl 2000;205:3–10.
18. Sakr WA, Grignon DJ, Haas GP. Pathology of premalignant lesions and carcinoma of the prostate in African-American men. Semin Urol Oncol 1998;16:214–220.
19. Qian J, Bostwick DG. The extent and zonal location of prostatic intraepithelial neoplasia and atypical adenomatous hyperplasia: relationship with carcinoma in radical prostatectomy specimens. Pathol Res Pract 1995;191:860–867.
20. Montironi R, Diamanti L, Pomante R, et al. Subtle changes in benign tissue adjacent to prostate neoplasia detected with a Bayesian belief network. J Pathol 1997;182:442–449. 21. Montironi R, Scarpelli M, Sisti S, et al. Quantitative analysis of prostatic intraepithelial
neoplasia on tissue sections. Anal Quant Cytol Histol 1990;12: 366–372.
22. Qian J, Jenkins RB, Bostwick DG. Detection of chromosomal anomalies and c-myc gene amplification in the cribriform pattern of prostatic intraepithelial neoplasia and carcinoma by fluorescence in situ hybridization. Mod Pathol 1997;10:1113–1119.
23. Qian J, Jenkins RB, Bostwick DG. Genetic and chromosomal alterations in prostatic intraepithelial neoplasia and carcinoma detected by fluorescence in situ hybridization. Eur Urol 1999;35:479–483.
24. McNeal JE, Yemoto CE. Spread of adenocarcinoma within prostatic ducts and acini. Morphologic and clinical correlations. Am J Surg Pathol 1996;20: 802–814.
25. McNeal JE, Bostwick DG. Intraductal dysplasia: a premalignant lesion of the prostate. Hum Pathol 1986;17:64–71.
26. Bostwick DG, Brawer MK. Prostatic intra-epithelial neoplasia and early invasion in prostate cancer. Cancer 1987;59:788–794.
27. Greenlee R, Hill-Harmon M, Murray T, et al. Cancer statistics, 2001. CA Cancer J Clin 2001;51:15–36.
29. Lee F, Torp-Pedersen ST, Carroll JT, et al. Use of transrectal ultrasound and prostate-specific antigen in diagnosis of prostatic intraepithelial neoplasia. Urology 1989;34:4–8. 30. Sakr WA, Haas GP, Cassin BF, et al. The frequency of carcinoma and intraepithelial
