Scopo della tesi
CAPITOLO 2
SCOPO DELLA TESI
Lo scopo di questa tesi è stato quello di allestire un saggio in grado di valutare la risposta dei linfociti T citotossici nei confronti di antigeni vaccinali contro FIV.
Il saggio è basato sulla creazione di linee di fibroblasti autologhi,
esprimenti l’antigene Env ed un gene reporter, da utilizzare per la
presentazione dell’antigene ai linfociti T. Il test è articolato in due fasi; nella prima si induce la stimolazione e la proliferazione dei cloni di linfociti T sensibili ad Env; nella seconda la popolazione di PBMC arricchita di cloni sensibili ad Env viene incubata con fibroblasti autologhi trasdotti. La lisi cellulare indotta dai linfociti T Env-specifici viene misurata valutando la diminuzione di cellule fluorescenti all’interno del campione di fibroblasti trasdotti.
Nei nostri laboratori è in fase di sperimentazione un vaccino a DNA contro le glicoproteine di superficie del virus dell’immunodeficienza felina. La strategia utilizzata è quella del prime-boost:, che è stata scelta con l’intenzione di indurre una robusta risposta immunitaria cellulo-mediata poiché questa si è rivelata essenziale per assicurare una buona protezione nei confronti del virus wild-type.
Il saggio descritto in questo lavoro di tesi sarà quindi applicato alla misurazione della risposta CTL indotta da tale vaccinazione.
