CAPITOLO 2 Scopo ………………………………….. 57 CAPITOLO 3 Materiali e Metodi …………………… 59 Abstract CAPITOLO 1 Introduzione ………………………… 10 Riassunto Indice

Indice

Riassunto

Abstract

CAPITOLO 1 Introduzione ……… 10

1.1.2 Obesità e patologie organo-specifiche ……….….. 20

1.1.3 Un modello per studiare l’obesità: il ratto Zucker ……. 24

1.1.4 Il processo infiammatorio: obesità e infiammazione ….. 25

1.1.4.1 Fattore di necrosi tumorale (TNF-α) ……….. 29

1.1.4.2 Interleuchina 6 (IL-6) ………. 30

1.2 Il sistema dei peptidi natriuretici e l’obesità ……….. 32

1.2.1 Peptidi natriuretici: cenni storici ………... 34

1.2.2 CNP e obesità ………. 44

1.2.2.1 CNP e cuore ……… 49

1.2.2.2 CNP e rene ……….. 53

1.2.2.3 CNP e polmone ………... 55

CAPITOLO 2 Scopo ……….. 57

CAPITOLO 3 Materiali e Metodi ……… 59

3.1 Modello sperimentale animale ………... 59

3.2 Protocollo sperimentale ……….. 60

3.2.2 Determinazione dell’RNA totale ………. 62

3.2.3 Estrazione tessutale delle proteine ………. 64

3.2.4 Analisi di Real Time RT-PCR (Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction) semiquantitativa ……….. 65

3.2.5 Selezione dei geni di riferimento per la normalizzazione dei dati di Real Time RT-PCR ……….. 68

3.2.6 Saggio radioimmunologico per la misura del CNP …... 70

3.3 Analisi dei dati ……… 71

3.3.1 Selezione dei geni di riferimento ……… 71

3.3.2 Analisi statistica ……….. 72

CAPITOLO 4 Risultati ……….. 73

4.1 Risultati metodologici ………. 73

4.1.1 Quantizzazione RNA ………... 73

4.1.2 Valutazione delle condizioni ottimali di reazione dell’analisi di Real Time RT-PCR ……….. 74

4.1.3 Selezione dei geni di riferimento ……… 76

4.2 Risultati sperimentali ……….. 78

4.2.1 Livelli di espressione dell’mRNA codificante per i geni: CNP, BNP, NPR-B, NPR-C, TNF-a e IL-6 nei tessuti cardiaco, renale e polmonare ……… 79

CAPITOLO 5 Discussione ……… 84

Glossario ………. 89