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1 1. ! Introduzione ..................................................................................................... 3 ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! 2. ! Scopo della tesi .......................

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Academic year: 2021

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1

INDICE&

1.! Introduzione ... 3!

1.1

!

Definizioni ... 4

!

1.2

!

Fattori di rischio ... 6

!

1.3

!

Fisiopatologia ... 8

!

1.4

!

Infiammazione delle vie aeree ... 14

!

1.4.1

!

Cellule infiammatorie ... 14

!

1.4.2

!

Mediatori chimici ... 17

!

1.4.3

!

Le microparticelle ... 18

!

1.5

!

Patogenesi dell’asma ... 26

!

1.6

!

Patogenesi della BPCO ... 29

!

1.7

!

Recettore β2−adrenergico ... 33

!

1.7.1

!

Struttura recettoriale ... 33

!

1.7.2

!

Attivazione del recettore e trasduzione del segnale ... 33

!

1.7.3

!

Desensibilizzazione recettoriale ... 35

!

1.8

!

Glucocorticoidi ... 38

!

1.9

!

Recettori attivati dai proliferatori perossisomiali (PPAR) ... 42

!

1.9.1

!

Caratteristiche strutturali e meccanismi biologici dei PPAR ... 43

!

1.9.2

!

PPAR-γ ... 45

!

1.9.3

!

Ruolo dei PPAR-γ nell’infiammazione ... 46

!

1.10

!

I cisteinil-leucotrieni (Cys-LT) ... 48

!

1.10.1

!

Sintesi e meccanismo d’azione ... 50

!

1.11

!

Terapia ... 52

!

2.! Scopo della tesi ... 57!

3.! Materiali e metodi ... 59!

3.1

!

Linea cellulare ... 59

!

3.2

!

Modello in vitro di desensibilizzazione omologa ... 60

!

3.3

!

Analisi RT-PCR ... 60

!

3.4

!

Analisi EMSA (Electrophoretic Mobility Shift Assay) ... 62

!

3.5

!

Isolamento dei monociti e formazione delle MP ... 62

!

3.6

!

Misurazioni dei livelli di IL-8 ... 63

!

3.7

!

Misurazione livelli di PGE2 ... 64

!

3.8

!

Analisi del ciclo cellulare ... 65

!

(2)

2

4.! Risultati e discussione ... 66!

4.1

!

Desensibilizzazione omologa del β2-AR ... 66

!

4.2

!

Effetto dei PPAR-γ agonisti sulla desensitizzazione omologa del β2-AR ... 71

!

4.3

!

Proliferazione delle BSMC ... 74

!

4.4

!

Attività proinfiammatoria delle Microparticelle ... 84

!

5.! Conclusioni ... 94!

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