1
INDICE&
1.! Introduzione ... 3!
1.1!
Definizioni ... 4!
1.2!
Fattori di rischio ... 6!
1.3!
Fisiopatologia ... 8!
1.4
!
Infiammazione delle vie aeree ... 14!
1.4.1
!
Cellule infiammatorie ... 14!
1.4.2
!
Mediatori chimici ... 17!
1.4.3
!
Le microparticelle ... 18!
1.5
!
Patogenesi dell’asma ... 26!
1.6
!
Patogenesi della BPCO ... 29!
1.7
!
Recettore β2−adrenergico ... 33!
1.7.1
!
Struttura recettoriale ... 33!
1.7.2
!
Attivazione del recettore e trasduzione del segnale ... 33!
1.7.3
!
Desensibilizzazione recettoriale ... 35!
1.8
!
Glucocorticoidi ... 38!
1.9
!
Recettori attivati dai proliferatori perossisomiali (PPAR) ... 42!
1.9.1
!
Caratteristiche strutturali e meccanismi biologici dei PPAR ... 43!
1.9.2
!
PPAR-γ ... 45!
1.9.3
!
Ruolo dei PPAR-γ nell’infiammazione ... 46!
1.10
!
I cisteinil-leucotrieni (Cys-LT) ... 48!
1.10.1
!
Sintesi e meccanismo d’azione ... 50!
1.11
!
Terapia ... 52!
2.! Scopo della tesi ... 57!
3.! Materiali e metodi ... 59!
3.1
!
Linea cellulare ... 59!
3.2
!
Modello in vitro di desensibilizzazione omologa ... 60!
3.3
!
Analisi RT-PCR ... 60!
3.4
!
Analisi EMSA (Electrophoretic Mobility Shift Assay) ... 62!
3.5
!
Isolamento dei monociti e formazione delle MP ... 62!
3.6
!
Misurazioni dei livelli di IL-8 ... 63!
3.7
!
Misurazione livelli di PGE2 ... 64!
3.8
!
Analisi del ciclo cellulare ... 65!
2
4.! Risultati e discussione ... 66!
4.1
!
Desensibilizzazione omologa del β2-AR ... 66!
4.2
!
Effetto dei PPAR-γ agonisti sulla desensitizzazione omologa del β2-AR ... 71!
4.3
!
Proliferazione delle BSMC ... 74!
4.4