INDICE
INTRODUZIONE …………...….………...………...1
1.1 L’ADENOSINA ………...………...….……2
1.2 I RECETTORI DELL’ ADENOSINA ...………...………...………...………...………... 5
1.2.1 CLASSIFICAZIONE E LOCALIZZAZIONE DEI RECETTORI P1 ………...………...…….…... 6
1.2.2 STRUTTURA MOLECOLARE E MECCANISMO DI TRASDUZIONE DEI RECETTORI ADENOSINICI ………...………...……7 …
1.2.3 MODELLI MOLECOLARI DEI RECETTORI ADENOSINICI ………...9 .
1.3 LIGANDI DEI RECETTORI ADENOSINICI: RELAZIONI STRUTTURA- ATTIVITA’ ………...12
1.3.1 AGONISTI DEI RECETTORI ADENOSINICI ………14
1.3.2 AGONISTI PARZIALI DEI RECETTORI ADENOSINICI ………...………16
1.3.3 ANTAGONISTI DEI RECETTORI ADENOSINICI ………16
1.4 EFFETTI FARMACOLOGICI DEI RECETTORI ADENOSINICI ………20
1.4.1 IMPIEGO TERAPEUTICO DEGLI ANTAGONISTI A3 COME ANTI-TUMORALI ………23 …
MATERIALI E METODI …………25
1.2 STUDIO DEI RECETTORI ATTRAVERSO LA METODICA DEL BINDING RADIOATTIVO ………...26 .
2.2 TRASFORMAZIONE LINEARE DEI DATI DI BINDING IN SATURAZIONE ……….…..………...………...………...30
2.2.1 SCATCHARD PLOT ………..….………...………...………..….……...30
2.2.2 HILL PLOT ………...………...………...………...31
2.3 DETERMINAZIONE DELLA SPECIFICITA’ DI LEGAME DI RADIOLIGANDI AI SITI RECETTORIALI ………...32 .
2.4 COLTURA DI CELLULE CHO TRASFETTATE CON IL CDNA
CODIFICANTE PER I RECETTORI ADENOSINICI ...34 2.5 PREPARAZIONE DI MEMBRANE DI CELLULE CHO TRASFETTATE CON I RECETTORI A1, A2A e A3 UMANI DELL’ADENOSINA ...36
2.6 DETERMINAZIONE DEL CONTENUTO PROTEICO ………...………..37 . 2.7 SAGGI DI BINDING SU RECETTORI A1 UMANI SU MEMBRANE DI
CELLULE CHO TRASFETTATE ………...41 2.8 SAGGI DI BINDING SU RECETTORI A2A UMANI SU MEMBRANE DI
CELLULE CHO TRASFETTATE ………..43 . 2.9 SAGGI DI BINDING SU RECETTORI A3 UMANI SU MEMBRANE DI
CELLULE CHO TRASFETTATE ………...44 2.10 SAGGIO DI VALUTAZIONE DELLA QUANTITA’ DI cAMP IN CELLULE CHO ...………...………...………...45 2.11 SAGGIO DI VALUTAZIONE DELLA PROLIFERAZIONE
CELLULARE ………...………...………49
RISULTATI E DISCUSSIONE ………….…..………...51
