PARTE SPERIMENTALE

(1)

(2)

46

MATERIALI E METODI

La struttura dei composti è stata controllata per mezzo della spettrometria 1H-NMR e 13C-NMR. Degli spettri 1H-NMR sono stati riportati i particolari più significativi. Tutti i composti sintetizzati presentano dati spettroscopici in accordo con le strutture assegnate. Gli spettri di risonanza magnetica nucleare sono stati eseguiti con uno spettrofotometro Varian Gemini 200 operante a 200 MHz in CDCl3, CD3OD, DMSO-d6; i chemical shift δ

sono espressi in ppm.

I punti di fusione sono stati determinati al microscopio di Kolfler e non sono stati corretti. Le evaporazioni sono state eseguite sotto vuoto in evaporatore rotante e le disidratazioni delle fasi organiche sono state eseguite usando Na2SO4.

Le TLC analitiche sono state effettuate usando lastre MERCK di gel di silice (G60) contenenti un indicatore fluorescente 20.2 mm; le varie macchie sono state evidenziate per mezzo di una lampada UV (256 nm).

Per le cromatografie su colonna è stato usato gel di silice MERCK 70-230 mesh. Per la filtrazione su celite è stata usata celite  521.

(3)

47

SINTESI DEL 1,3-DIHYDRO-2H-INDOL-2-ONE (3) [SCHEMA 1]

N H

O

3

L’acido 2-nitro-fenilacetico commerciale (11.04 mmoli, 2.00 g) in AcOH glaciale (25.2 mL) è stato sottoposto a reazione di ciclizzazione riduttiva in presenza di ferro elementare (29.40 mmoli, 1.64 g). La miscela così ottenuta è stata posta sotto agitazione e a riflusso per 12 h. Trascorso tale periodo il solvente è stato evaporato a pressione ridotta e il residuo ripreso con AcOEt, filtrato e la soluzione residua è stata lavata due volte con una soluzione acquosa di HCl 1 N e ghiaccio. La fase organica ottenuta è stata essiccata, filtrata ed evaporata ottenendo un solido grezzo 3 che non è stato ulteriormente purificato.

C8H7NO2 P.f. = 92-95C RESA: 95% 1 H NMR (CDCl3) δ: 3.56 (s, 2H, CH2); 6.90 (d, 1H, J = 7.7 Hz, Ar); 6.98-7.06 (m, 1H, Ar); 7.19-7.26 (m, 2H, Ar); 8.95 (br s, 1H, NH) ppm. 13 C NMR (CDCl3) δ: 179.25, 143.38, 128.54, 125.98, 125.12, 122.93, 110.66 (Ar); 37.10 (CH2 Indolone) ppm. ANALISI ELEMENTARE: C8H7NO2

C

H

N

Calc.%

72.16%

5.30%

10.52%

Trov. %

72.32%

5.35%

10.48%

(4)

48

SINTESI DEL 2-OXO-2,3-DIHYDRO-1H-INDOLE-5-SULFONIL

CLORURO (4) [SCHEMA 1]

N H O S Cl O O 4

A 2.5 mL circa di acido clorosolfonico (37.61 mmoli, 4.38 g) è stato aggiunto in piccole porzioni il 2-oxi-indolo 3 (8.63 mmoli, 1.16 g) mantenendo la temperatura sotto i 30°C durante l’aggiunta. La reazione è stata lasciata in agitazione a t.a. per 1.5 h e poi a 68°C per 1 h. Trascorso tale periodo la soluzione è stata raffreddata e addizionata ad una miscela contenente H2O e ghiaccio. Il solido formato è stato quindi separato per filtrazione

su setto fornendo il grezzo 4 che non è stato ulteriormente purificato.

C8H6ClNO3S P.f. = 180-185C RESA: 98% 1 H NMR (DMSO) δ: 3.46 (s, 2H, CH2); 6.74 (d, 1H, J = 7.7 Hz, C7 Indolone); 7.42-7.46 (m, 2H,C4,C6 Indolone); 10.48 (br s, 1H, NH) ppm. 13 C NMR (DMSO) δ:  175.89, 143.68, 139.71, 124.55, 121.32, 107.39 (Ar); 35.16 (CH2 Indolone) ppm. ANALISI ELEMENTARE: C8H6ClNO3S

C

H

N

S

Calc.%

41.48%

2.61%

6.05%

13.84%

Trov. %

41.55%

2.48%

6.01%

14.05%

(5)

49

SINTESI DI

N-(3,4-DIMETOSSIBENZIL)-2-OXO-2,3-DIIDRO-1H-INDOLIN-5-SULFONAMMIDE (6) [SCHEMA 1]

N H O S O O MeO MeO NH 6

Ad una soluzione di 5-clorosulfonil-2-oxindolo 4 (2.29 mmoli, 530 mg) in EtOH (10.0 mL) è stata aggiunta la 3,4-dimetossi-benzilammina (2.50 mmoli, 418 mg). La reazione è stata fatta reagire a t.a. per 4 h; trascorso tale periodo la soluzione è stata evaporata a pressione ridotta e il solido formato è stato quindi purificato tramite cristallizzazione da MeOH.

C17H18 N2O5S

P.f. =227-232C

RESA: 80%

1

H NMR (DMSO) δ: 3.52 (s, 2H, CH2); 3.65 (s, 3H, OCH3); 3.68 (s, 3H, OCH3); 3.88 (d,

2H, J = 6.2 Hz, CH2NH); 6.68-6.82 (m, 3H, Ar); 6.90 (d, 1H, J = 8.1 Hz, C7 Indolone); 7.51 (s, 1H, C4 Indolone); 7.60 (d, 1H, J = 8.1 Hz, C6 Indolone); 7.89 (br t, 1H, J = 6.2 Hz, NH); 10.76 (br s, 1H, NH) ppm. 13 C NMR ANALISI ELEMENTARE: C17H18 N2O5S

C

H

N

S

Calc.%

56.43%

5.01%

7.73%

8.85%

Trov. %

56.26%

5.32%

7.80%

9.06

(6)

50

PROCEDURA GENERALE PER LA SINTESI DEI DERIVATI

N-(3,4-DIMETOSSIBENZIL)-2-OXO-INDOLIN-5-SULFONAMMIDICI

3-ETEROCICLO SOSTITUITI (1a-c) [SCHEMA 1]

Ad una soluzione del derivato 6 (0.39 mmoli, 142 mg) in EtOH (7 mL) è stato aggiunta l’opportuna carbossialdeide (0.43 mmoli) ed una quantità catalitica di piperidina. La reazione è stata posta a riflusso per 18 h, quindi il solvente è stato evaporato, ottenendo un grezzo che è stato purificato mediante cristallizzazione da EtOH per fornire i composti finali 1a-c.

N H O S O O MeO MeO NH H S 1a 1a: (3Z)-N-(3,4-DIMETOSSIBENZIL)-2-OXO-3-(TIOFEN-2-ILMETILENE) INDOLIN-5-SULFONAMMIDE C22H20O5N2S2 P.f. = 246-248C RESA: 60% 1

H NMR (DMSO) δ: 3.62 (s, 6H, OCH3); 3.96 (s, 2H, CH2NH); 6.68-6.82 (m, 3H, Ar);

6.90 (d, 1H, J = 8.1 Hz, C7 Indolone); 7.27 (t, 1H, J = 4.2 Hz, Tiofene); 7.62 (d, 1H, J =

8.1 Hz, C6 Indolone); 7.82-7.94 (m, 1H, Tiofene); 7.82-7.84 (m, 2H, Tiofene, NH); 8.04 (s,

1H, CH=); 8.31 (s, 1H, C4 Indolone); 10.99 (br s, 1H, NH) ppm.

13

C NMR (DMSO) δ: 167.23, 148.39, 147.77, 143.00, 138.66, 137.10, 135.39, 133.36,

130.38, 129.74, 127.65, 127.08, 124.41, 121.53, 119.82, 118.09, 117.69, 111.31, 109.26 (Ar); 55.40 (OCH3); 55.20 (OCH3); 46.18 (CH2NH) ppm.

(7)

51 ANALISI ELEMENTARE: C22H20O5N2S2

C

H

N

S

Calc.%

57.88%

4.42%

6.14%

14.05%

Trov. %

58.10%

4.40%

6.08%

14.07%

N S N H O MeO MeO O H O H N N H 1b 1b: (3Z)-3-((1H-IMIDAZOL-2-IL)METILENE)-N(3,4DIMETOSSIBENZIL) -2-OXO-INDOLIN-5-SULFONAMMIDE C21H20O5N4S P.f. = 315-320C RESA: 62% 1 H NMR (DMSO) δ: 3.34 (s, 6H, OCH3); 3.98 (d, 2H, J = 8.1 Hz, CH2NH); 6.68-6.80 (m,

3H, Ar); 7.02 (d, 1H, J = 8.0 Hz, C7 Indolone); 7.40 (s, 1H, Imidazolo); 7.56-7.70 (m, 2H,

C6 Indolone, Imidazolo); 7.80-7.93 (m, 2H, CH= , NH); 8.12 (s, 1H, C4 Indolone); 10.00

(br s, 1H, NH) ppm. 13 C NMR (DMSO) δ: 168.96, 148.33, 147.73, 143.18, 134.33, 133.73, 133.02, 129.96, 128.58, 127.41, 126.08, 125.63, 124.10, 122.02, 119.82, 111.28, 109.74 (Ar); 55.45 (OCH3); 55.33 (OCH3); 46.15 (CH2NH) ppm. ANALISI ELEMENTARE: C21H20O5N4S

_C

_H

_N

_S

Calc.%

57.26%

4.58%

12.72%

7.28%

Trov. %

57.21%

4.73%

12.74%

7.52%

(8)

52 N S N H O MeO MeO O H O H N N 1c 1c:(3E)-N-(3,4-DIMETOSSIBENZIL)-3-((1-METIL-1H-IMIDAZOL-2-IL) METILENE)-2-OXO-INDOLIN-5-SULFONAMMIDE C22H22O5N4S P.f. = 235-237C RESA: 61% 1

H NMR (DMSO) δ: 3.59 (s, 3H, OCH3); 3.67 (s, 3H, OCH3); 3.92 (s, 3H, NCH3); 3.98

(d, 2H, J = 6.1 Hz, CH2NH); 6.68-6.82 (m, 3H, Ar); 6.96 (d, 1H, J = 8.2 Hz, C7 Indolone); 7.39 (s, 1H,Imidazolo); 7.46 (s, 1H,Imidazolo); 7.56 (s, 1H, CH=); 7.68 (dd, 1H, J = 1.8, 8.2 Hz, C6 Indolone); 7.92 (br t, 1H, J = 6.1 Hz, NH); 9.92 (d, 1H, J = 1.8 Hz, C4 Indolone); 10.99 (br s, 1H, NH) ppm. 13 C NMR (DMSO) δ: 169.27, 148.39, 147.77, 145.27, 142.14, 133.73, 130.60, 130.01, 128.59, 125.72, 123.84, 121.53, 119.69, 119.36, 111.57, 108.93 (Ar); 55.49 (OCH3); 55.18 (OCH3); 46.04 (CH2NH); 33.20 (NCH3) ppm. ANALISI ELEMENTARE: C22H22O5N4S

C

H

N

S

Calc.%

58.14%

4.88%

12.33%

7.06%

Trov. %

58.02%

5.16%

12.06%

7.16%

(9)

53

SINTESI DEL 5-CLOROACETIL-2-OXI-INDOLO (8) [SCHEMA 2]

N H O O Cl 8

Ad una soluzione di AlCl3 (29.92 mmoli, 5.99 g) in CH2Cl2 (35 mL) è stato

aggiunto a 0°C il 2-oxo-indolo 3 (8.77 mmoli, 1.17g). Dopo alcuni minuti la miscela risultante è stata addizionata del 2-cloroacetilcloruro commerciale 7 (17.42 mmoli; 1.97g). La reazione viene lasciata in agitazione a t.a. per 15 min e poi riscaldata a riflusso per 2h. Trascorso tale periodo la soluzione è stata raffreddata e addizionata ad una miscela contenente H2O e ghiaccio. Il solido formato è stato quindi separato per filtrazione su setto

fornendo il grezzo 8 che non è stato ulteriormente purificato.

C10H8NO2Cl

P.f.= 223-226C

RESA: 98%

1

H NMR (DMSO) δ: 3.57 (s, 2H, CH2); 5.09 (s, 2H, ClCH2); 6.93 (d, 1H, J = 8.1 Hz, C7

Indolone); 7.83 (s, 1H, C4 Indolone); 7.88 (d, 1H, J = 8.1 Hz, C6 Indolone); 10.84 (br s,

1H, NH) ppm. 13 C NMR (DMSO) δ: 190.05, 176.61, 148.95, 129.63, 127.70, 126.24, 124.48, 108.86 (Ar); 47.15 (CH2Cl); 35.48 (CH2 Indolone) ppm. ANALISI ELEMENTARE: C10H8NO2Cl

C

H

N

Calc.%

57.30%

3.85%

6.68%

Trov. %

57.53%

3.99%

6.71%

(10)

54

PROCEDURA GENERALE PER LA SINTESI DEI DERIVATI

5-(CLOROACETIL)-1,3-DIIDRO-2H-INDOL-2-ONE 3-ETEROCICLO

SOSTITUITI (9a-c) [SCHEMA 2]

Ad una soluzione del cloroacetil derivato 8 (0.39 mmoli, 150 mg) in EtOH (7 mL) è stato aggiunta l’opportuna carbossialdeide (0.43 mmoli) ed una quantità catalitica di piperidina. La reazione è stata posta a riflusso per 18 h, quindi il solvente è stato evaporato ottenendo un grezzo che è stato purificato mediante cristallizzazione da EtOH per fornire i composti 9a-c. H N H O O Cl S 9a 9a: (3Z)-5-(CLOROACETIL)-3-(TIOFEN-2-ILMETILIDENE)-1,3-DIIDRO-2H-INDOL-2-ONE C15H10O2NSCl P.f. = 262-266C MS (m/z): 303 (M+, 35%); 254 (M+ - CH2Cl, 99%) RESA: 65% 1 H NMR (DMSO) δ: 5.17 (s, 2H, ClCH2); 6.98 (d, 1H, J = 8.1 Hz, C7 Indolone); 7.28 (t, 1H, J = 4.3 Hz, Tiofene); 7.90 (d, 1H, J = 8.1 Hz, C6 Indolone); 7.94-8.05 (m, 2H, Tiofene); 8.37 (s, 1H, CH=); 8.40 (s, 1H, C4 Indolone); 11.01 (br s, 1H, NH) ppm.

(11)

55 ANALISI ELEMENTARE: C15H10O2NSCl

C

H

N

S

Calc.%

59.31%

3.32%

4.61%

10.56%

Trov. %

59.57%

3.38%

4.71%

10.38%

9b H N H O O Cl N N H 9b: (3Z)-5-(CLOROACETIL)-3-(1H-IMIDAZOL-2-ILMETILIDENE)-1,3-DIIDRO-2H-INDOL-2-ONE C14H10O2N3Cl P.f. = 297-301C RESA: 60% 1 H NMR (DMSO) δ: 5.17 (s, 2H, ClCH2); 7.02 (d, 1H, J = 8.4 Hz, C7 Indolone); 7.71 (s, 1H, Imidazolo); 7.88 (d, 1H, J = 8.4 Hz, C6 Indolone); 8.06-8.09 (m, 2H, CH=, Imidazolo); 8.37 (s, 1H, C4 Indolone); 11.44 (br s, 1H, NH) ppm. ANALISI ELEMENTARE: C14H10O2N3Cl

C

H

N

Calc.%

58.45%

3.50%

14.61%

Trov. %

58.22%

3.57%

14.64%

(12)

56 N N N H O O Cl H 9c 9c: (3E)-5-(CLOROACETIL)-3-[(1-METIL-1H-IMIDAZOL-2-IL) METILIDENE]-1,3-DIIDRO-2H-INDOL-2-ONE C15H12O2N3Cl P.f. = 245-249C RESA: 57% 1 H NMR (DMSO) δ: 3.92 (s, 3H, NCH3); 5.09 (s, 2H, ClCH2); 7.02 (d, 1H, J = 8.2 Hz, C7

Indolone); 7.44 (s, 2H, Imidazolo); 7.56 (s, 1H, CH); 7.95 (d, 1H, 8.2 Hz, C6 Indolone);

10.10 (s, 1H, C4 Indolone); 11.05 (br s, 1H, NH) ppm.

ANALISI ELEMENTARE:

C15H12O2N3Cl

C

H

N

Calc.%

59.71%

4.01%

13.93%

(13)

57

PROCEDURA GENERALE PER LA SINTESI DEI DERIVATI

5-(2-(6,7-DIMETOSSI-3,4-DIIDROISOCHINOLIN-2(1H)-IL)

ACETIL)- INDOLIN-2-ONE 3-ETEROCICLO SOSTITUITI (2A-C)

[SCHEMA 2]

Una miscela CH2Cl2/MeOH 9:1 (4 mL), alla quale è stato aggiunto K2CO3 (2.23

mmoli, 308 mg), è stata scaldata a 55C per 15 min. Tale miscela è stata quindi raffreddata a t.a. e addizionata della 3,4-dimetossi-benzilammina cloridrato (1.01 mmoli, 206 mg). La miscela risultante è stata poi posta in bagno di ghiaccio e addizionata dell’opportuno derivato 9a-c (1.01 mmoli) solubilizzato nella minima quantità di MeOH. La miscela di reazione è stata lasciata in agitazione a riflusso per 18 h. Trascorso tale periodo il K2CO3 è

stato filtrato e la soluzione è stata evaporata, ripresa con CHCl3 e lavata due volte con una

soluzione acquosa di HCl 1 N, ottenendo un grezzo che è stato purificato tramite cristallizzazione da AcOEt/n-Esano. 2a H N H O O N MeO MeO S 2a: (3Z)-5-(2-(6,7-DIMETOSSI-3,4-DIIDROISOCHINOLIN-2(1H)-IL) ACETIL)-3-(TIOFEN-2-ILMETILENE)INDOLIN-2-ONE C26H24O4N2S P.f. = 287-291C RESA: 30% 1 H NMR (CDCl3) δ: 2.90-2.99 (m, 4H, CH2); 3.34 (s, 2H, CH2); 3.76 (s, 2H, CH2); 3.84

(s, 3H, OCH3); 3.88 (s, 3H, OCH3); 6.53 (s, 1H, Ar); 6.67 (s, 1H, Ar); 6.95 (d, 1H, J = 8.1

(14)

58 7.92-8.03 (m, 2H, Tiofene); 8.36 (s, 1H, CH=); 8.40 (s, 1H, C4 Indolone); 10.99 (br s, 1H, NH) ppm. ANALISI ELEMENTARE: C26H24O4N2S

C

H

N

S

Calc.%

67.81%

5.25%

6.08%

6.96%

Trov. %

67.98%

5.39%

6.29%

6.82%

N H O H O N MeO MeO N N H 2b 2b:(3Z)-3-((1HTIOFEN-2-ILMETILENE)5-(2-(6,7-DIMETOSSI-3,4-DIIDROISOCHINOLIN-2(1H)-IL)ACETIL)- INDOLIN-2-ONE C25H24O4N4 P.f. = 333-335C RESA: 15% 1 H NMR (CDCl3): δ 2.85-2.95 (m, 4H, CH2); 3.34 (s, 2H, CH2); 3.76 (s, 2H, CH2); 3.85 (s,

3H, OCH3); 3.88 (s, 3H, OCH3); 6.54 (s, 1H, Ar); 6.66 (s, 1H, Ar); 6.93 (d, 1H, J = 8.2 Hz,

C7 Indolone); 7.21 (s, 1H, Imidazolo); 7.48 (d, 1H, J = 8.4 Hz, C6 Indolone); 7.61-7.68 (m,

2H, CH=, Imidazolo); 7.7 (s, 1H, C4 Indolone); 5; 8.08 (br s, 1H); 9.23 (br s, 1H) ppm.

ANALISI ELEMENTARE:

C25H24O4N4

C

H

N

Calc.%

67.55%

5.44%

12.60%

(15)

59 2c N H O H O N MeO MeO N N 2c: (Z)-5-(2-(6,7-DIMETHOXY-3,4-DIHYDROISOQUINOLIN-2(1H)-YL)ACETYL)-3-((1-METHYL-1H-IMIDAZOL-5-YL)METHYLENE)INDOLIN-2-ONE C26H26O4N4 P.f. = 314-317C RESA: 15% 1 H NMR: (CDCl3) δ: 2.90-3.00 (m, 4H, CH2); 3.35 (s, 2H, CH2); 3.78 (s, 2H, CH2); 3.84

(s, 3H, NCH3); 3.87 (s, 3H, OCH3); 3.88 (s, 3H, OCH3); 6.55 (s, 1H, Ar); 6.67 (s, 1H, Ar);

6.90 (d, 1H, J = 8.2 Hz, C7 Indolone); 7.15 (s, 2H, Imidazolo); 7.45 (s, 1H, CH=); 7.50 (d, 1H, J = 8.2 Hz, C6 Indolone); 9.27 (s, 1H, C4 Indolone); 9.38 (br s, 1H, NH) ppm. ANALISI ELEMENTARE: C26H26O4N4