Capitolo I Introduzione Premessa Indice

Indice

Premessa

Introduzione

Capitolo I

TRATTAMENTO DELLE LESIONI OSSEE CON PERDITA DI SOSTANZA:

recenti acquisizioni

DISTRAZIONE OSTEOGENICA E TRASPORTO DI OSSO pag. 12

INNESTO OSSEO pag. 14

INNESTO AUTOLOGO pag. 14

INNESTO ALLOGENICO pag. 15

Matrice Ossea Demineralizzata pag. 16

SOSTITUTI OSSEI pag. 18

MATERIALI INORGANICI pag. 18

Biovetri pag. 18

Idrossiapatite e Fosfato tricalcico pag. 19

POLINERI NATURALI pag. 19

Collagene pag. 19

Derivati delle fibre della seta pag. 20

Polisaccaridi pag. 20

Poliesteri di origine microbica pag. 22

POLIMERI SINTETICI pag. 23

Poliesteri alifatici saturi a catena corta pag. 23

Poli-ε-caprolattone pag. 24

Poliuretani biodegradabili pag. 25

Poli-propilene fumarato pag. 25

Polifosfazeni pag. 26

FATTORI PROMOTORI DELLA CRESCITA pag. 27

Indice

ALTRI PROMOTORI pag. 27

Plasma Ricco di Piastrine pag. 28

ASPIRATO DI MIDOLLO OSSEO e

CELLULE STAMINALI MESENCHIMALI pag. 28

RIGENERAZIONE GUIDATA pag. 30

Capitolo II

TRATTAMENTO DELLE INFEZIONI OSSEE:

recenti acquisizioni

EZIOPATOGENESI pag. 34

DIAGNOSI E TRATTAMENTO pag. 35

NUOVE PROSPETTIVE DI TRATTAMENTO pag. 36

Capitolo III

STUDIO SPERIMENTALE

SCOPO DEL PROGETTO pag. 44

Capitolo IV

MATERIALI E METODI

POLI(ε-CAPROLATTONE) A STELLA pag. 46

ENROFLOXACINA pag. 46

LEVOFLOXACINA pag. 46

IDROSSIAPATITE pag. 47

WET-SPINNING e ALLESTIMENTO DEGLI SCAFFOLDS pag. 47

ALLESTIMENTO DEGLI SCAFFOLD pag. 47 Scaffold in *PCL mediante wet-spinning pag. 49 Scaffold in *PCL ed Enrofloxacina

mediante wet-spinning pag. 49

Scaffold in *PCL e Levofloxacina

mediante wet-spinning pag. 50

Scaffold in *PCL e Idrossiapatite

Indice

CARATTERIZZAZIONE FISICO-CHIMICA DEGLI SCAFFOLDS pag. 51 ANALISI DIMENSIONALE E MORFOLOGICA pag. 51 VALUTAZIONE DEL CARICAMENTO DEGLI ANTIBIOTICI

IN SCAFFOLDS POLIMERICI pag. 51

QUANTIFICAZIONE DEL CARICAMENTO DEGLI ANTIBIOTICI ENROFLOXACINA E LEVOFLOXACINA

NELLE FIBRE POLIMERICHE pag. 52

QUANTIFICAZIONE DEGLI ANTIBIOTICI ENROFLOXACINA E LEVOFLOXACINA

NEL BAGNO DI COAGULAZIONE pag. 52

VALUTAZIONE DELL’EFFICIENZADI

CARICAMENTO DEGLI SCAFFOLDS pag. 53 VALUTAZIONE DELLA CINETICA DI RILASCIO

DI ANTIBIOTICI DA SCAFFOLDS IN *PCL pag. 53 Analisi della Cinetica di Rilascio in vitro pag. 54

PROVE DI BIOCOMPATIBILITA’ IN VITRO pag. 55

PROVE DI ADESIONE E PROLIFERAZIONE CELLULARE pag. 56 Sterilizzazione e Condizionamento degli Scaffolds pag. 56 Semina delle cellule sugli Scaffolds pag. 56

Analisi qualitative pag. 57

1. Colorazione Blu di Toluidina pag. 57 2. Colorazione DAPI e Falloidina-Alexa 488 pag. 57

3. Metodo Live/Dead pag. 58

Valutazione della Citotossicità degli Scaffolds

mediante Saggio WST-1 pag. 58

1. Valutazione della Citotossicità

per Contatto Diretto pag. 59

2. Valutazione dell’Adesione e Proliferazione

Cellulare sullo Scaffold pag. 59

TEST IN VIVO pag. 61

ANIMALI pag. 61

TECNICA CHIRURGICA pag. 62

Impianti pag. 62

Espianti pag. 67

Indice

ESPIANTI: VALUTAZIONI MACROSCOPICHE

MORFOLOGICHE pag. 71

VALUTAZIONI ISTOPATOLOGICHE pag. 721

1. Emallume-Eosina pag. 72

2. Tricromica di Mallory pag. 73

3. Blu di Toluidina pag. 73

4. Emallume-Rosso Congo pag. 73

ANALISI STATISTICA pag. 74

Capitolo V

RISULTATI

PREPARAZIONE DEGLI SCAFFOLDS pag. 75

CARATTERIZZAZIONE FISICO-CHIMICA pag. 75

MICROSCOPIA ELETTRONICA A SCANSIONE pag. 75 Scaffolds ottenuti con wet-spinning manuale pag. 75 Scaffolds ottenuti con wet-spinning automatizzato pag. 77 VALUTAZIONE DEL CARICAMENTO pag. 78 CINETICA DI RILASCIO IN VITRO pag. 78

PROVE DI BIOCOMPATIBILTA’ IN VITRO pag. 80

SPERIMENTAZIONE IN VIVO pag. 84

VALUTAZIONI RADIOGRAFICHE pag. 86

VALUTAZIONI MACROSCOPICHE ESPIANTO pag. 92 VALUTAZIONI ISTOPATOLOGICHE pag. 95

Capitolo VI

DISCUSSIONI

Capitolo VII

CONCLUSIONI

ACKNOWLEDGMENTS

BIBLIOGRAFIA

RINGRAZIAMENTI