Scopo della tesi
CAPITOLO 2: SCOPO DELLA TESI
Questa tesi si inserisce in un progetto a lungo termine che prevede lo sviluppo di un approccio vaccinale contro virus che infettano l’uomo utilizzando un vettore FIV-derivato codificante per immunogeni virali. Le ricerche oggetto di questa tesi avevano, quindi, come obbiettivo la produzione del sistema vettore e una sua prima caratterizzazione in vitro. Per ridurre i rischi di formazione di una particella wild-type, il vettore è stato realizzato secondo un sistema split-component in cui le diverse componenti del genoma virale sono espresse in tre plasmidi separati. Sono state, inoltre, eliminate tutte le sequenze non necessarie per la funzionalità del vettore e, ad ulteriore garanzia di sicurezza, si è mirato a produrre un costrutto del tipo SIN ottenuto mediante sostituzioni e delezioni di regioni di LTR.
Il costrutto è stato poi testato e validato per capacità di espressione e trasduzione di cellule eterologhe coltivate in vitro.
Al termine di questa fase il vettore sarà testato su modelli animali scelti ad hoc, attraverso inoculo diretto del vettore precedentemente prodotto su cellule 293T o utilizzando una strategia ”prime-boost”.
Quest’ultimo approccio sarà preferenzialmente utilizzato se la risposta immunitaria indotta dalla somministrazione di una singola dose di vaccino non sarà sufficientemente forte e sostenuta nel tempo.
